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सममित Bihemispheric शवपरीक्षा मस्तिष्क मनुष्यों में स्वस्थ और रोग मस्तिष्क की स्थिति का अध्ययन करने के लिए काटना

Published: December 18, 2016 doi: 10.3791/54602
Automatic Translation
1, 1, 1, 2
1Neuropathology Research, Biomedical Research Institute of New Jersey (BRInj), 2Department of Pathology, Atlantic Health System (AHS), Overlook Medical Center

Summary

संगठित मस्तिष्क काटने प्रक्रियाओं निश्चित neuropathologic निदान के साथ विशिष्ट neuropsychiatric संबंध घटनाओं के लिए आवश्यक हैं। ब्रेन कलमों विभिन्न Clinico शैक्षणिक आकस्मिक व्यय के आधार पर अलग ढंग से प्रदर्शन कर रहे हैं। इस प्रोटोकॉल मानव मस्तिष्क विकृतियों में hemispheric मतभेद की जांच करने के लिए और वर्तमान और भविष्य biomolecular / न्यूरोइमेजिंग तकनीक को अधिकतम करने के लिए एक सममित bihemispheric मस्तिष्क काटने की प्रक्रिया का वर्णन करता है।

Abstract

Neuropathologists, समय पर, ज्ञान की राशि जटिल neuropsychiatric उन रोगियों जिनके लिए एक मस्तिष्क शव परीक्षण का अनुरोध किया गया है में वर्णित घटना के लिए निश्चित निदान उत्पन्न करने की जरूरत से भयभीत महसूस करते हैं। हालांकि जैव चिकित्सा विज्ञान और न्यूरोइमेजिंग की प्रगति neuropsychiatric क्षेत्र में क्रांति ला दी है, वे भी भ्रामक विचार उत्पन्न किया है कि मस्तिष्क पोस्टमार्टम केवल एक पुष्टि मूल्य है। यह गलत विचार नतीजतन, एक कम संभावना अधिक विस्तृत और व्यापक नयूरोपथोलोगिकल जांच, जो कई सामान्य और रोग पहलुओं अभी तक मानव मस्तिष्क की अज्ञात को समझने के लिए जरूरी हैं प्रदर्शन करने के लिए शव परीक्षण दरों में भारी कमी बनाया है और। मनाया neuropsychiatric घटनाएं और इसी स्थानीयकरण / उनके संभव neurohistological संबद्ध के लक्षण वर्णन के बीच संबंध की पारंपरिक विधि आनुमानिक एक निर्विवाद मूल्य है जारी है। neuropsychi के संदर्भ मेंatric रोगों, पारंपरिक clinicopathological पद्धति अभी भी सबसे अच्छा संभव कार्यप्रणाली (और अक्सर ही उपलब्ध है) उनके इसी नयूरोपथोलोगिकल substrates के लिए अद्वितीय neuropsychiatric सुविधाओं से जोड़ने के लिए है, क्योंकि यह मस्तिष्क के ऊतकों के प्रत्यक्ष भौतिक मूल्यांकन पर विशेष रूप से निर्भर करता है। पोस्टमार्टम के दिमाग के आकलन के मस्तिष्क काटने प्रक्रियाओं है कि अलग अलग तंत्रिकाविकृति विज्ञान केन्द्रों में अलग अलग पर आधारित है। ब्रेन कलमों एक अपेक्षाकृत व्यापक और व्यवस्थित तरीके से प्रत्येक संस्था में उपस्थित विभिन्न नैदानिक ​​और शैक्षणिक आकस्मिक व्यय के आधार पर किया जाता है। एक और अधिक संरचनात्मक रूप से समावेशी और सुडौल द्वि-hemispheric मस्तिष्क काटने कार्यप्रणाली में कम से कम, मानव तंत्रिकाविकृति विज्ञान के क्षेत्र में अनुसंधान उद्देश्यों के लिए इस्तेमाल किया जाना चाहिए जुड़कर जांच करने के लिए गहराई, मानव मस्तिष्क (यानी, hemispheric विशेषज्ञता और विशिष्ट के लिए lateralization के peculiarities के साथ सामान्य और रोग की स्थिति में कार्य)। इस तरह की एक विधि एक अधिक व्यापक Colle प्रदान करेगाneuropathologically अच्छी तरह से विशेषता वर्तमान और भविष्य के जैव प्रौद्योगिकी और न्यूरोइमेजिंग तकनीक के लिए उपलब्ध दिमाग की ction। हम मानव मस्तिष्क विकृतियों में hemispheric मतभेद की जांच के लिए और वर्तमान के साथ उपयोग के साथ ही भविष्य biomolecular / न्यूरोइमेजिंग तकनीक के लिए एक सममित द्वि-hemispheric मस्तिष्क काटने की प्रक्रिया का वर्णन है।

Introduction

Neuropathologists वैज्ञानिक विशेषाधिकार, बौद्धिक सम्मान, और नैदानिक ​​दायित्व मानव दिमाग का आकलन किया है। कई दशकों के लिए, मस्तिष्क की बीमारियों और बड़े प्रयासों की विस्तृत वर्णन नैदानिक ​​individuate करने के लिए मानव को पोस्टमार्टम के दिमाग में उनके संभावित neurohistological संबद्ध किए गए हैं। ऐतिहासिक दृष्टि से, उन प्रयासों को सबसे अधिक उत्पादक साधन है जिसके द्वारा चिकित्सा विज्ञान, और विशेष रूप से तंत्रिका विज्ञान आधुनिक युग में उन्नत का प्रतिनिधित्व किया। पिछले प्रख्यात neuropathologists और उनके समर्पण, दृढ़ संकल्प, छात्रवृत्ति, और आश्चर्यजनक क्षमता के लिए धन्यवाद सामान्य और असामान्य मस्तिष्क के ऊतकों (अक्सर बहुत rudimental उपकरणों का उपयोग) के बीच भेदभाव करने के लिए, अब हम जांच और इस तरह अल्जाइमर-Perusini रोग के रूप में लक्ष्य रोगों (गलत तरीके से ही कहा जाता है अल्जाइमर कर सकते हैं रोग; APD / ई) 1, पार्किंसंस रोग (पीडी) 2, क्रुत्ज़फेल्ट-Jakob रोग (CJD) 3, लो-Gehrig के रोग / Amyotrophic पार्श्व Sclerosiएस (ए एल एस) 4, और गुआम रोग 5, कुछ का उल्लेख करने के लिए।

कार्यात्मक और रूपात्मक चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (यानी, fMRI, प्रसार-एमआरआई, tractography एमआरआई, आदि), पोजीट्रान एमिशन टोमोग्राफी, ऐसे उच्च परिभाषा कंप्यूटरीकृत टोमोग्राफी (सीटी एंजियोग्राफी यानी, multisection सर्पिल सीटी स्कैन) के रूप में न्यूरोइमेजिंग की उन्नत तकनीक, (पीईटी), अल्ट्रासाउंड आधारित इमेजिंग, और दूसरों को, निश्चित रूप से कैसे निदान और तंत्रिका विज्ञान और मानसिक रोगियों का इलाज करने पर हमारे सामान्य दृष्टिकोण को संशोधित किया है। बहरहाल, हालांकि न्यूरोइमेजिंग तकनीक एक व्यक्ति के मस्तिष्क visualizing जीवित है, वे होने वाली पल में, अवसर की पेशकश नहीं करते, सीधे इस तरह के न्यूरॉन्स के रूप में कोशिकाओं के अत्यधिक जटिल सेलुलर और subcellular संरचनाओं का विश्लेषण करने में सक्षम हैं; या कल्पना, मार्क, और intracellular घावों के विशिष्ट प्रकार यों के लिए; या ठीक circuital और उप पर उनके neuroanatomical या उप क्षेत्रीय स्थानीयकरण इंगित करने के लिएcircuital संरचनात्मक स्तर। उदाहरण के लिए, न्यूरोइमेजिंग तकनीक entorhinal प्रांतस्था में विज्ञापन का एक शास्त्रीय सुविधा की पहचान नहीं कर सकते हैं या स्थानीय बनाना द्रव्य नाइग्रा (एस एन), एक आम वैकृत पीडी के साथ जुड़े सुविधा, या neurofibrillary उलझनों (NFT) के pigmented न्यूरॉन्स में Lewy निकायों (पौंड), और अन्य मस्तिष्क विकृतियों। नयूरोपथोलोगिकल उन्नत डिजिटल माइक्रोस्कोपी के साथ संयुक्त जांच निश्चित निदान के लिए, विस्तृत clinicopathological सहसंबंध के लिए unreplaceable भी कर रहे हैं, और इस प्रकार।

मानव मस्तिष्क की अजीब anatomo कार्यात्मक गुणों के कारण, और विशेष रूप से अपनी शारीरिक स्थानीयकरण करने के लिए (जो है, खोपड़ी, एक प्राकृतिक सुरक्षा प्रणाली है कि इसकी सामग्री का प्रत्यक्ष परीक्षा की अनुमति नहीं है अंदर), विवो न्यूरोइमेजिंग तकनीक की शुरूआत असाधारण मदद की चिकित्सकों और जांचकर्ताओं इस जटिल ऊतक के रहस्यों में से कुछ के लिए प्रारंभिक जवाब खोजने के लिए है। हालांकि, वहाँ कोई नैदानिक ​​या neuroimagiएनजी पद्धति है कि सीधे एक शव परीक्षा के दौरान मस्तिष्क के ऊतकों का विश्लेषण करने के लिए अद्वितीय अवसर बदल सकते हैं। केवल संगठित संग्रह, संरक्षण, और मानव दिमाग के वर्गीकरण neuronal और गैर neuronal कोशिकाओं, उनके subcellular घटक, intracellular और बाह्य रोग घावों के प्रत्यक्ष और व्यवस्थित जांच अनुमति दे सकते हैं, और मस्तिष्क के अंदर विषमता के किसी भी प्रकार, इस बात की पुष्टि संशोधित करने, या करने के लिए नैदानिक ​​निदान को फिर से परिभाषित करने और नए clinicopathological सहसंबंध खोजने के लिए। शव परीक्षण में मस्तिष्क के आकलन के विषय में स्पष्ट सीमाओं में से एक तथ्य यह है कि इस प्रक्रिया का एक पार के अनुभागीय पद्धति है किया गया है। वहाँ हमेशा एक लगातार चलने वाली प्रक्रिया नयूरोपथोलोगिकल (चिकित्सकीय प्रकट या नहीं) और मौका है, यदि कोई हो, neurohistological स्तर पर इसे परिभाषित करने के बीच एक देरी हो जाएगा। यह मुख्य रूप से मानव मस्तिष्क की अक्षमता के कारण खुद को पुनर्जीवित करने के लिए है। यह पीई बनाने के बिना विवो में मस्तिष्क के ऊतकों प्राप्त करने के लिए संभव नहीं हैrmanent नुकसान। नतीजतन, यह संभव नहीं है longitudinally और neuropathologically ही मस्तिष्क / व्यक्ति का आकलन करें। हालांकि, मानकीकृत मस्तिष्क बैंकिंग प्रक्रियाओं और आम जनता के बीच मस्तिष्क दान के लिए एक वृद्धि की जागरूकता बहुत लगातार मामलों की संख्या को इकट्ठा करने और विश्लेषण करने के लिए बढ़ाने के द्वारा मस्तिष्क शव परीक्षा समय के मुद्दों के समाधान के लिए योगदान कर सके। इस तरीके में, पोस्टमार्टम के दिमाग के अधिक पर्याप्त संख्या प्रत्येक मानव मस्तिष्क की बीमारी के साथ जुड़े मस्तिष्क घाव के प्रत्येक विशिष्ट प्रकार के रोग के मूल और प्रगति की लगातार पैटर्न को परिभाषित करने के लिए प्राप्त किया जा सकता है। यह सभी उम्र भर में किसी भी neuropsychiatric विकार से प्रभावित रोगियों से दान और संभव के रूप में कई दिमाग का संग्रह, के रूप में अच्छी तरह से स्वस्थ नियंत्रण विषयों की आवश्यकता होगी। एक संभव तरीका एक मानक दिनचर्या के रूप में सामान्य और विशिष्ट चिकित्सा केन्द्रों से संभव के रूप में कई पोस्टमार्टम के दिमाग इकट्ठा किया जा सकता है। मस्तिष्क दान के लिए की जरूरत है हाल ही में व्यक्त किया गया हैजो उन लोगों के पागलपन और सामान्य उम्र बढ़ने 6 अध्ययन के द्वारा। एक ही आवश्यकता के रूप में पूरे neuropsychiatric क्षेत्र द्वारा व्यक्त किया जाना चाहिए।

उपरोक्त अन्य कारणों के लिए और के लिए चल रहे मस्तिष्क काटने प्रक्रियाओं की एक अद्यतन आवश्यक है। इसके अलावा, प्रक्रियाओं को काटने के मस्तिष्क सार्वभौमिक दुनिया भर के विभिन्न तंत्रिकाविकृति विज्ञान अनुसंधान केन्द्रों भर में मानकीकृत किया जाना चाहिए, यह भी संभावना खाते में लेने के वर्तमान और भविष्य के जैव प्रौद्योगिकी तकनीकों को रोजगार के लिए बेहतर जांच करने के लिए और उम्मीद है, निश्चित रूप से समझने के लिए, का कारण बनता है और मस्तिष्क रोगों के तंत्र में मनुष्य।

इधर, मुख्य रूप से अनुसंधान प्रयोजनों के लिए, हम एक सममित कार्यप्रणाली को पोस्टमार्टम के मस्तिष्क मानव में काटने के लिए का वर्णन है। यह प्रक्रिया सामान्य रूप से काम से और दोनों मस्तिष्क और अनुमस्तिष्क गोलार्द्धों से अधिक मस्तिष्क क्षेत्रों इकट्ठा करने का प्रस्ताव है। एक सममित द्वि-hemispheric मस्तिष्क काटने की प्रक्रिया में ज्यादा मानव की हमारी वर्तमान ज्ञान के साथ बेहतर फिट होगाneuroanatomy, neurochemistry, और neurophysiology। इस विधि को भी संभावना neuropathologically ऐसे hemispheric विशेषज्ञता और lateralization कि उच्च संज्ञानात्मक और गैर-संज्ञानात्मक कार्यों को आम तौर पर या विशेष रूप से हमारी प्रजाति में वर्तमान के साथ जुड़े रहे हैं के रूप में मानव मस्तिष्क की अनूठी विशेषताओं, विश्लेषण करने के लिए अनुमति देता है। hemispheric विशेषज्ञता / lateralization और मस्तिष्क घावों के विशिष्ट प्रकार के बीच विशिष्ट विकारी रिश्तों को देखते हैं, या शुरू में, प्रचलन, या विशेष रूप से एक विशिष्ट गोलार्द्ध के साथ जुड़े एक अजीब neuropsychiatric विकारी घटना है कि क्या और समारोह वर्तमान में ज्ञात नहीं है। इस सममित मस्तिष्क काटने की प्रक्रिया का वर्णन करके, हम मानव मस्तिष्क विच्छेदन का एक अद्यतन तरीका है कि बेहतर एक अति विशिष्ट ऊतकों में सामान्य और रोग की स्थिति, मस्तिष्क को समझने में मदद कर सकता का प्रस्ताव करने का लक्ष्य है। इस विधि को भी ध्यान में उन Morpho कार्यात्मक hemispheric पहलुओं है कि केवल मनुष्य में मौजूद लेता है।

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Protocol

पोस्टमार्टम मानव ऊतकों को शामिल प्रक्रियाओं संस्थागत समीक्षा बोर्ड द्वारा समीक्षा की और 45 सीएफआर (संघीय विनियम संहिता) के तहत छूट दी गई है।

नोट: प्रोटोकॉल पोस्टमार्टम मस्तिष्क आकलन मानव में नयूरोपथोलोगिकल अध्ययन के लिए अंतिम रूप के लिए एक सममित bihemispheric मस्तिष्क काटने की प्रक्रिया का वर्णन करता है। apparatuses, उपकरणों, सामग्री, और मानव मस्तिष्क काटने प्रदर्शन करने के लिए आवश्यक आपूर्ति का विस्तृत विवरण बाहर रखा जाएगा। सामग्री और मस्तिष्क विच्छेदन के लिए आपूर्ति एकल अन्वेषक के विवेक पर चयन किया जाता है और शव को उपकरण की अनुमति है या प्रत्येक अनुसंधान संस्थान में मंजूरी दे दी है पर आधारित हैं। उपकरण और सामग्री इस प्रक्रिया के लिए आवश्यक न्यूनतम सेट सामग्री / उपकरण तालिका में वर्णित है। विशिष्ट काटने प्रक्रियाओं और इस तरह के मानव CJD संदिग्ध के रूप में संक्रामक रोगों मस्तिष्क, के लिए सावधानियों, इस पांडुलिपि के उद्देश्य से बाहर हैं और अन्य स्रोतों 7 से उपलब्ध हैं।

1. सममित द्विपक्षीयhemispheric मस्तिष्क काटना

नोट: यह सुनिश्चित करें कि मस्तिष्क ऊतक निर्धारण आवश्यक प्राप्त हुआ है (का उपयोग, उदाहरण के लिए, तटस्थ बफर 10% formalin), दो से तीन सप्ताह की अवधि के लिए periagonal, चयापचय पर निर्भर करता है (यानी, पीएच), और ऊतक संरक्षण ( यानी, तापमान) की स्थिति। हालांकि, इमेजिंग-विकृति सहसंबंध पढ़ाई, निर्धारण की एक लंबी अवधि के लिए (> 5.4 सप्ताह) 8 सुझाव दिया गया है।

  1. एक सपाट सतह अन्वेषक का सामना करना पड़ पर मस्तिष्क की जगह, अन्वेषक के संबंध में विपरीत दिशा में निर्देशित ललाट डंडे के साथ।
  2. इस तरह से मस्तिष्क सभी cortical gyri और पूरे मस्तिष्क (चित्रा 1 ए) के sulci का एक पूर्ण और स्पष्ट दृश्य की अनुमति के रूप में रखें।
  3. तानिका विसंगतियों के लिए पहले देखो, स्थूल hemispheric विषमताओं (फोकल, लोबार, या शोष की सामान्यीकृत hemispheric घटना के संभावित संकेतक), स्थूल tissutal घावों (यानी, Tumoरुपये या हर्नियेशन), जन्मजात विकृतियों, पोत असामान्यताओं, और किसी भी अन्य संभावित असामान्यताएं या मस्तिष्क की सतह के असामान्य प्रस्तुतियों।
    नोट: कैसे एक मानव मस्तिष्क का आकलन करने के बारे में विस्तृत विवरण के लिए, व्यावसायिक रूप से उपलब्ध तंत्रिकाविकृति विज्ञान की पाठ्यपुस्तकों और शव को मैनुअल 9,10 को देखें।

2. प्रोटोकॉल अनुक्रम

  1. ललाट डंडे का सामना करना अन्वेषक से दूर, गोलार्द्धों (telencephalon) की सतही पहलुओं अन्वेषक सामना करना पड़ रहा है। संभव मैक्रो-विसंगतियों दस्तावेज़ करने के लिए और संभव Clinico-neuroanatomical और बाद के काटने विचार के लिए खाते में एक विशेष मामले में आवश्यक के रूप में के रूप में कई डिजिटल तस्वीरें ले लो। एक शोध के सहायक मस्तिष्क के लंबवत डिजिटल तस्वीरें ले पूरे cortical सतह पर कब्जा करने के लिए (चित्रा 1 ए - ग)।
  2. मार्क पूर्व और postcentral cortical gyri मस्तिष्क काटने से पहले स्याही या रंग का सुइयों का उपयोग (चित्रा 1 बी नोट: यह प्रक्रिया मोटर और काटने के बाद somatosensory प्राथमिक cortices की एक और तत्काल मान्यता की सुविधा।
  3. 180 डिग्री से मस्तिष्क घुमाएँ, जबकि यह एक ही दिशा का सामना करना पड़ रखते हुए (यानी, ललाट डंडे अन्वेषक से दूर का सामना करना पड़)। ध्यान से मस्तिष्क के आधार का निरीक्षण किया। Cerebrovascular सिस्टम की शर्तों (यानी, आधारी और कशेरुका धमनियों और विलिस के चक्र) और उनके मस्तिष्क से बाहर निकलें / प्रवेश द्वार के स्तर पर कपाल नसों के लिए विशेष ध्यान दे। अपने चरम दोष के कारण tissutal पंगु बनाना बचने के लिए, विशेष देखभाल के साथ घ्राण बल्ब और इलाकों की व्यवस्था करें।
    1. संभव मैक्रो-विसंगतियों दस्तावेज़ करने के लिए और संभव Clinico-neuroanatomical और बाद के काटने विचार के लिए खाते में एक विशेष मामले में आवश्यक के रूप में के रूप में कई डिजिटल तस्वीरें ले लो। एक शोध के सहायक लंबरूप मस्तिष्क के लिए डिजिटल तस्वीरें लेने cortical और brainstem सतहों की सम्पूर्णता पर कब्जा किया।
    2. मस्तिष्क के आधार सामना करना पड़ रहा है और एक छुरी का उपयोग कर, पोंस के ऊपरी हिस्से के स्तर पर brainstem transversally कटौती (संभव के रूप में बंद मस्तिष्क के आधार पर)। ध्यान से एसएन (यानी, पीलापन लिए) का निरीक्षण 11 और अन्य पड़ोसी संरचनाओं 12। ध्यान रखना है, संभवतः एक सामान्य मस्तिष्क 13 की तुलना में एक ऑडियो रिकॉर्डर उपकरण का उपयोग कर, मस्तिष्क के किसी भी असामान्य उपस्थिति की।
    3. फिर 180 डिग्री से बारी बारी से और मस्तिष्क, एक तेज चाकू का उपयोग कर, औसत दर्जे का अनुदैर्ध्य विदर के माध्यम से केन्द्र महासंयोजिका काटने और एक ललाट पश्चकपाल दिशा का पालन करते हुए दो गोलार्द्धों अलग। संभव विसंगतियों (जैसे, वेंट्रिकुलर enlargements, विकृतियों, ऊतक नरमी, ट्यूमर, आदि) 13 के लिए प्रत्येक गोलार्द्ध के प्रत्येक पक्ष का निरीक्षण किया। चित्रा 2A देखें।
      1. संभव मैक्रो-विसंगतियों दस्तावेज़ करने के लिए एक विशेष मामले में आवश्यक के रूप में के रूप में कई डिजिटल तस्वीरें ले लो औरसंभव Clinico-neuroanatomical और बाद के काटने विचार के लिए खाते। एक शोध के सहायक लंबरूप मस्तिष्क के लिए डिजिटल तस्वीरें लेने के लिए पूरे cortical सतह पर कब्जा किया। एक सामान्य मस्तिष्क की तुलना में मस्तिष्क के किसी भी असामान्य विशेषता का ध्यान रखना।
    4. जगह दो गोलार्द्धों फ्लैट, उनकी औसत दर्जे का पहलुओं पर झूठ बोल रही है, ललाट lobes, अन्वेषक से दूर का सामना करना पड़ के रूप में चित्रा 2 बी में दिखाया गया है। उन्हें इस तरह है कि उनके केन्द्रों स्पर्श (भी चिह्नित hemispheric विषमता के मामले में) में रखें।
    5. एक तेज चाकू का प्रयोग, मैन्युअल दोनों मस्तिष्क गोलार्द्धों के माध्यम से काटा, ललाट ध्रुवों पर शुरू करने और गोलार्द्धों की पूरी लंबाई के माध्यम से पश्चकपाल ध्रुवों की ओर बढ़ रहा है। (प्रत्येक गोलार्द्ध के लिए 18 स्लैब के आसपास) मस्तिष्क के ऊतकों की 1 सेमी मोटी ब्लॉक के दो श्रृंखला प्राप्त करते हैं।
    6. एक अलग सपाट सतह पर एक anatomically का आयोजन (ललाट पश्चकपाल दिशा) अनुक्रम में मस्तिष्क स्लैब रखें। एक सफेद surfa का प्रयोग करेंएक शासक बेहतर विपरीत के लिए उस पर छपी जब photographing के साथ सीई। एक anatomically सममित रास्ता (ललाट पश्चकपाल दिशा) में मस्तिष्क स्लैब के दो श्रृंखला प्रदर्शन, यकीन है कि उनके राज्याभिषेक सतहों सीधा आंख निरीक्षण और डिजिटल फोटोग्राफी (चित्रा 3 ए) के लिए दिखाई दे रहे हैं बना रही है। एक और अधिक सटीक ढंग से मस्तिष्क संरचना, आकार, और संभव असामान्यताएं स्थानीयकरण करने के लिए दोनों पक्षों पर मुद्रित millimetric ग्रिड के साथ सतहों काटने का प्रयोग करें।
      1. संभव मैक्रो-विसंगतियों दस्तावेज़ करने के लिए और संभव Clinico-neuroanatomical और बाद के काटने विचार के लिए खाते में एक विशेष मामले में आवश्यक के रूप में के रूप में कई डिजिटल तस्वीरें ले लो। एक शोध के सहायक लंबरूप मस्तिष्क के लिए डिजिटल तस्वीरें लेने के लिए पूरे cortical सतह पर कब्जा किया। एक सामान्य मस्तिष्क की तुलना में (संभवतः एक ऑडियो रिकॉर्डर डिवाइस का उपयोग), मस्तिष्क के किसी भी असामान्य पहलू का नोट ले लो।
    7. एक तेज छुरी का प्रयोग, मैन्युअल के छोटे आयताकार ब्लॉक काटनाप्रत्येक स्थापित मस्तिष्क क्षेत्र के लिए मस्तिष्क के ऊतकों। प्रस्तावित मस्तिष्क क्षेत्र संग्रह योजना तालिका 1 में वर्णित का पालन करें।
      1. अलग-अलग लेबल histocassettes में प्रत्येक ऊतक ब्लॉक रखो।
        नोट: मस्तिष्क के ऊतकों के प्रत्येक ब्लॉक, फिट करने के लिए कटौती करने के लिए जितना संभव हो उतना जरूरत है, मानक histocassette अधिक से अधिक मात्रा (30 x 20 x 4 मिमी 3)।
      2. प्रत्येक मामले के लिए एक डे की पहचान कोड का उपयोग और विशिष्ट neuroanatomical पहचानकर्ता का उपयोग कर histocassettes लेबल (विभिन्न दिमाग के लिए यादृच्छिक पत्र या संख्या का उपयोग नहीं करते, बल्कि हमेशा एक ही क्षेत्रीय संरचनात्मक नाम या इसी संख्या के रूप में तालिका 1 में दिखाया गया है) का उपयोग करें। बनाएं de-पहचान कोड, उदाहरण के लिए, (प्रत्येक मामले के लिए बिना सोचे समझे या अर्द्ध यादृच्छिक संख्या पैदा यानी, बीआरसी 130, जहां बी मस्तिष्क के लिए रहता है, आर संसाधन के लिए रहता है, सी केंद्र के लिए रहता है और 130 एक प्रगतिशील परिग्रहण या AD160001 गया है, जहां ईस्वी के लिए खड़ा है "अल्जाइमर रोग अध्ययन," 16 हैसाल जब शव परीक्षा प्रदर्शन किया गया था (2016), और 0001 में एक प्रगतिशील परिग्रहण नमूना संख्या)।
        नोट: यह कदम भविष्य के शोधकर्ताओं के लिए बहुत उपयोगी है; एक पौराणिक कथा है रखने के लिए, और गोलार्द्ध (एल = बाएँ गोलार्द्ध, आर = दाएँ गोलार्द्ध) निर्दिष्ट करें। histocassettes की दो अलग अलग रंग का प्रयोग करें, प्रत्येक गोलार्द्ध के लिए एक विशेष रंग की स्थापना।
      3. संभव macroanomalies दस्तावेज़ करने के लिए और संभव Clinico-neuroanatomical और बाद के काटने विचार के लिए खाते में एक विशेष मामले में आवश्यक के रूप में के रूप में कई डिजिटल तस्वीरें ले लो। एक शोध के सहायक लंबरूप मस्तिष्क के लिए डिजिटल तस्वीरें लेने के लिए पूरे cortical सतह पर कब्जा किया। एक सामान्य मस्तिष्क की तुलना में मस्तिष्क के किसी भी असामान्य विशेषता का ध्यान रखना।
    8. डिजिटल तस्वीरें ले लो पूरे कटौती मस्तिष्क और संबद्ध histocassettes की (आवश्यक या वांछित के रूप में कई के रूप में)।
    9. पंच (जैसे, Accu-पंच से) डीएनए निष्कर्षण और आनुवंशिक विश्लेषण के लिए ऊतक के छोटे टुकड़े। उपयोगव्यास में 5 मिमी - 2 के एक पंच।
      नोट: जीनोमिक सामग्री के अपने उच्च सामग्री के लिए, सेरिबैलम पसंदीदा विकल्प है; हालांकि, किसी भी अन्य क्षेत्र ठीक है।
    10. लगानेवाला समाधान (जैसे, 10% तटस्थ बफर formalin) पहले से ऊतक प्रसंस्करण के अगले चरण तक इस्तेमाल के रूप में एक ही प्रकार के मस्तिष्क ऊतक ब्लॉक युक्त सभी histocassettes पुनः विसर्जित कर दिया।
    11. मानव formalin तय ऊतक प्रसंस्करण 14 के लिए मानक प्रक्रियाओं का पालन करें।

    3. एक विशेष दृष्टिकोण: बारी जमे हुए और फिक्स्ड सममित Bihemispheric काटना

    नोट: सममित bihemispheric मस्तिष्क काटने धारा 2 में वर्णित प्रोटोकॉल (जब उपलब्ध है) unfixed, ताजा दिमाग से ऊतक स्लैब काटने की संभावना ही व्यवस्थित और सुडौल ढंग से प्रदान करता है।

    1. 10 मिनट के एक -80 सेल्सियस फ्रीजर मस्तिष्क के ऊतकों कड़ा करने के लिए withou - पूरे ताजा मस्तिष्क उल्टा (अधिमानतः एक semispherical कटोरा की तरह प्लास्टिक की सतह पर) 8 के लिए जगहटी जैव रासायनिक नुकसान उत्तेजक और मैनुअल काटने की सुविधा के लिए।
    2. एक तेज चाकू का उपयोग करना, एक वैकल्पिक और लगातार ढंग से दोनों गोलार्द्धों में कटौती मस्तिष्क काटने धारा 2 में वर्णित प्रोटोकॉल के बाद, लेकिन स्थिर और (दोनों गोलार्द्धों से और साथ में एक ललाट पश्चकपाल संरचनात्मक दिशा) हर दूसरे स्लैब तय कर लो।
      1. इस बिंदु पर, प्रत्येक मस्तिष्क क्षेत्र, 1 टेबल में वर्णित के रूप में कटौती करने की कोशिश नहीं करते। विशिष्ट ताजा मस्तिष्क क्षेत्रों कट ही अगर तत्काल शाही सेना या प्रोटीन निष्कर्षण (यानी, जीनोमिक या प्रोटिओमिक अध्ययन के लिए) 15 के लिए जरूरी है।
    3. काटने के बाद, तुरंत फ्रीज, लेबल, और संख्या प्रत्येक ताजा ऊतक। पूरे स्लैब श्रृंखला की डिजिटल तस्वीरें ले लो; एक भी प्लास्टिक की थैली में प्रत्येक स्लैब पैक; एक अलग, एक-मस्तिष्क केवल कंटेनर में स्लैब इकट्ठा; और एक समर्पित -80 डिग्री सेल्सियस फ्रीजर में कंटेनर की दुकान।
      ध्यान दें: फ्रीजर मानव मस्तिष्क के ऊतकों को ही समर्पित होना चाहिए। केवल बाद गाऊंगाLe जमे हुए मस्तिष्क क्षेत्रों के रूप में प्रत्येक विशिष्ट प्रयोग के लिए आवश्यक कटौती की जा।
    4. हर दूसरे ऊतक स्लैब लगानेवाला की पर्याप्त मात्रा (लगानेवाला / ऊतक-ब्लॉक अनुपात की 3/1 मात्रा) युक्त अलग बैग में नियतन (10% तटस्थ बफर formalin या अन्य लगानेवाला) के लिए चुना विसर्जित कर दिया। लगातार उन्हें एक ललाट पश्चकपाल अनुक्रम के बाद नंबर से प्रत्येक बैग लेबल। प्रत्येक बैग सील, डिजिटल तस्वीरें ले, और उन्हें एक प्लास्टिक कंटेनर में स्टोर।
    5. ऊतक निर्धारण के 2 हफ्तों के बाद लगानेवाला युक्त बैग खोलें और तालिका 1 में वर्णित के रूप में प्रत्येक मस्तिष्क क्षेत्र काटा।

    4. Histostain और immunohistochemistry

    नोट: मस्तिष्क क्षेत्रों के सेट प्रस्तावित योजना के आधार पर कटौती (तालिका 1) ई 16 के लिए सबसे अधिक है, नहीं तो सब, वर्तमान में स्थापित आम सहमति के आधार रोग मानदंडों को पूरा करने के लिए पर्याप्त हैं, पीडी 17, Lewy निकायों (DLB) 18 के साथ मनोभ्रंश, frontotemporal मनोभ्रंश (FTD / MND) 20, विभिन्न सिस्टम शोष (एमएसए) 21, जीर्ण दर्दनाक मस्तिष्क विकृति (सीटीई) 22, आदि।

    1. प्रत्येक मस्तिष्क क्षेत्र के लिए और दोनों गोलार्द्धों के लिए, histostains के निम्नलिखित न्यूनतम सेट प्रदर्शन: hematoxylin और eosin (एच एंड ई), cresyl वायलेट (सीवी, अगर मात्रात्मक morphometric अध्ययन, उदाहरण के लिए योजना बनाई है), और चांदी धुंधला (यदि "खोजपूर्ण" विश्लेषण कर रहे हैं जरूरत है)।
    2. प्रत्येक मस्तिष्क क्षेत्र के लिए और दोनों गोलार्द्धों के लिए, प्रदर्शन immunohistochemistry प्रोटोकॉल का निम्न न्यूनतम सेट: -amyloid बीटा (β ए), फॉस्फोरिलेटेड-ताउ (pTau), फॉस्फोरिलेटेड α-synuclein (pα-syn), और फॉस्फोरिलेटेड-TDP43 (pTDP43) , के रूप में 14 में वर्णित है।
      नोट: इस प्रोटोकॉल के बाद प्रत्येक मस्तिष्क का आकलन करने में ऊतक वर्गों की कुल संख्या 46 है (यदि दोनों गोलार्द्धों से सभी मस्तिष्क क्षेत्रों में उपलब्ध हैं)।

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Representative Results

प्रोटोकॉल की लंबाई

समय एक भी सममित bihemispheric तय मस्तिष्क काटने की प्रक्रिया के लिए खर्च होने का अनुमान है 1 घंटे (; लेबलिंग, समय सतहों विच्छेदन मेज, उपकरण की स्थापना, और काटने में खर्च को छोड़कर। आदि)। समय जमे हुए हैं और प्रक्रिया को काटने के मस्तिष्क तय एक भी सममित द्वि-hemispheric बारी के लिए आवश्यक 2 घंटे लेने के लिए अनुमान है। 6 सप्ताह के लिए एक एकल मानव मस्तिष्क / विषय के लिए निश्चित ऊतकीय निदान प्राप्त करने के लिए - यह कम से कम 4 के बीच ले जा सकते हैं। (- कम से कम 3 सप्ताह 2) होने चाहिए खोपड़ी, ऊतक निर्धारण का एक उचित अवधि से पोस्टमार्टम के मस्तिष्क को हटाने के बाद। फिर, सममित bihemispheric मस्तिष्क काटने, ऊतक प्रसंस्करण, ऊतक एम्बेड, ब्लॉक सेक्शनिंग, और धुंधला और immunohistochemistry सहित प्रोटोकॉल की एक श्रृंखला है, बाहर किया जाना चाहिए। अंत में, गोलार्द्ध प्रति प्रत्येक क्षेत्र की सूक्ष्म मूल्यांकन, सीओ का उपयोगnsensus की स्थापना की विकृति मानदंड और वर्गीकरण, नैदानिक ​​रिकॉर्ड की समीक्षा, और संभवतः clinicopathology के सहसंबंध, नयूरोपथोलोगिकल निष्कर्ष से पहले जगह ले जाना होगा। एक पूर्ण मानव मस्तिष्क नयूरोपथोलोगिकल मूल्यांकन के लिए पूरे समय ध्यान से विचार किया जाना चाहिए जब विशिष्ट अनुसंधान अध्ययन के लिए योजना बना रहा। इसके अलावा, चिकित्सा सहयोगियों और अनुसंधान जांचकर्ताओं, दाताओं के परिवारों, और कानूनी अधिकारियों कुल समय की आवश्यकता है, जटिलता, और टीम समय / प्रयास एक आधुनिक नयूरोपथोलोगिकल आकलन प्राप्त करने के लिए के बारे में सूचित किया जाना चाहिए।

हालांकि प्रस्तावित मस्तिष्क काटने प्रोटोकॉल एक समय लेने वाली और चुनौतीपूर्ण प्रक्रिया का प्रतिनिधित्व करता है, यह वास्तव में एक वैज्ञानिक रूप से पुरस्कृत कार्यप्रणाली बड़े पैमाने पर दोनों स्वस्थ और रोग की स्थिति में मानव दिमाग का आकलन करने का प्रतिनिधित्व करता है। यह नियंत्रण / सामान्य विषयों के रूप में प्राप्त ऑटोप्सी, दिमाग के दौरान उस पर जोर देना, अक्सर महत्वपूर्ण है (यानी, चिकित्सकीय या neurologically सामान्य मृत्यु से पूर्व) के रूप में मूल्यांकन विषयों वास्तव में एक सटीक नयूरोपथोलोगिकल आकलन के बाद मस्तिष्क के विभिन्न विकृतियों के लिए सकारात्मक हो पाया जा सकता है। इन मामलों में, विशेष रूप से उम्र से संबंधित neurodegenerative रोगों निस्र्पक उन मस्तिष्क के विभिन्न रोगों के लिए तथाकथित स्पर्शोन्मुख और preclinical विषयों प्रतिनिधित्व करते हैं। यह विशेष रूप से अनुसंधान प्रयोजनों के लिए, एक बहुत ही व्यापक और जटिल तरीके से "नियंत्रण" के रूप में प्राप्त दिमाग का आकलन करने के महत्व को रेखांकित करता है। यह तेजी से स्पष्ट है कि मानव दिमाग / विषयों, प्रतीक या नहीं न्यूरोलॉजिकल / मानसिक विकारों के लिए, उम्र बढ़ने 23,24 के दौरान कई मस्तिष्क विकृतियों (तथाकथित सह होने वाली विकृतियों) जमा कर सकते हैं होता जा रहा है। दिलचस्प, इन सह होने वाली मस्तिष्क घावों biochemically चिकित्सकीय प्रकट रोगों के साथ रोगियों में पाए जाने वाले के समान हैं और अच्छी तरह से (Pars, ARTAG, गाड़ियां) 25-27 ही संरचनात्मक क्षेत्रों में स्थानीय कर रहे हैं। ये मोहाल के निष्कर्षों (केवल शव परीक्षण जांच के माध्यम से संभव है) फिर से मानव मस्तिष्क पर उम्र बढ़ने के प्रभाव के अध्ययन के लिए एक असाधारण प्रासंगिकता है।

2 टेबल और चित्रा 4 एक सममित द्वि-hemispheric मस्तिष्क काटने हमारे मस्तिष्क बैंक में एकत्र मानव दिमाग की एक श्रृंखला पर प्रदर्शन किया प्रक्रिया का उपयोग कर प्राप्त कुछ प्रारंभिक semiquantitative डेटा का वर्णन है। इन प्रारंभिक आंकड़ों से पता चलता है कि ज्यादातर दिमाग के रूप में "सामान्य" या पुराने विषयों से "नियंत्रण" β ए-neuritic सजीले टुकड़े हैं और ताऊ-neurofibrillary उलझनों (ताऊ-NFT) के लिए सकारात्मक थे वास्तव में न केवल, के रूप में पहले से ही 28-32 जाना जाता है, लेकिन यह भी प्राप्त कि अघुलनशील β ए-neuritic सजीले टुकड़े के बोझ सही entorhinal प्रांतस्था और एक ही मस्तिष्क के हिप्पोकैम्पस की तुलना में बाईं entorhinal प्रांतस्था और हिप्पोकैम्पस में अधिक थे। दिमाग CERAD 33 का उपयोग कर मूल्यांकन किया गया और Braak 34 syste मंचनएमएस, जो क्रमशः β ए-neuritic सजीले टुकड़े हैं और ताऊ-NFT का आकलन करें। एक विकृति β अघुलनशील के लिए मनाया बाएँ गोलार्द्ध झुकाव भी मौजूद था, हालांकि केवल दाएँ गोलार्द्ध की तुलना में एक प्रवृत्ति, बाएँ गोलार्द्ध के शेष क्षेत्रों के अधिकांश के रूप में। इन प्रारंभिक द्वि-hemispheric ढूँढने की प्रासंगिकता का विश्लेषण किया है कि दिमाग में एक सामान्य आबादी शव परीक्षण पलटन से सभी थे। सभी विषयों वास्तव में अस्पताल में भर्ती थे, गैर न्यूरोलॉजिकल / मनोरोग कारणों के लिए और गैर-मस्तिष्क संबंधी कारणों के लिए अलग-अलग समुदाय के सामान्य अस्पतालों में मौत हो गई। तथ्य यह है कि विश्लेषण किया दिमाग जब केवल विशेष न्यूरोलॉजिकल / मनोभ्रंश केन्द्रों से दिमाग का विश्लेषण संभवतः वर्तमान में एक सामान्य आबादी शव परीक्षण पलटन को कम से कम चयन पूर्वाग्रहों से थे। यह भी देखें NINDS 6 से सिफारिश। हमारा निष्कर्ष प्रारंभिक (46 में से 4 उपलब्ध "नियंत्रण" दिमाग) कर रहे हैं और एक बहुत बड़े पैमाने पर पुष्टि की जरूरत है। हालांकि, इन उपन्यास निष्कर्षएस, अगर पुष्टि की, संचय और ई विकृति की प्रगति के लिए एक hemispheric झुकाव के संभावित घटना का सुझाव है, या कम से कम एक विकृति बीटा। रोग hemispheric predilections के समान प्रकार के काफी संभवतः neuropsychiatric या neurodegenerative विकार के प्रत्येक विशिष्ट प्रकार के साथ जुड़ा हो सकता है। इसके अलावा, सटीक सेलुलर और घाव quantifications (यानी, निष्पक्ष Stereology) के तरीकों के साथ सममित द्वि-hemispheric मस्तिष्क काटने प्रक्रियाओं के संयोजन से, यह संभव दृढ को रोग की स्थिति के लिए सामान्य के अनुपात, साथ ही neuronal नुकसान के अनुपात को मापने के लिए किया जा सकता है / neuroplasticity घटना है कि एक विशिष्ट गोलार्द्ध और समारोह के संबंध में मनुष्यों में मौजूद हो सकता है। दिलचस्प, हालांकि मस्तिष्क विकृति के प्रत्येक प्रमुख प्रकार (β -amyloid, ताऊ, पौंड, TDP43, FUS, आदि।) के लिए hemispheric झुकाव की स्थापना की बात है, कार्यात्मक न्यूरोइमेजिंग 34, 36 neuropsychological p>, और microstructural संरचनात्मक विश्लेषण 37,38 हमारे प्रारंभिक परिणामों के साथ लाइन में लग रहे हो। यह मस्तिष्क विकृति और संबंधित रोग से प्रत्येक के विभिन्न प्रकार के लिए एक संभव hemispheric झुकाव की परिकल्पना को पुष्ट।

आकृति 1
चित्रा 1. इससे पहले Bihemispheric मस्तिष्क काटना प्रारंभिक ब्रेन आकलन। यह आंकड़ा 10% तटस्थ बफर formalin में नियतन के 2 हफ्तों के बाद एक मानव मस्तिष्क के विभिन्न पहलुओं को सतही पता चलता है। एक घड़ी की अनुक्रम में, दिमाग के बेहतर पहलुओं (क, ख) मस्तिष्क है, जो (ग) सेरिबैलम का निरीक्षण, मस्तिष्क और कपाल नसों (घ), और घ्राण बल्ब शामिल हैं के आधार पर टिप्पणियों के द्वारा पीछा कर रहे हैं और इलाकों (ई)।02 / 54602fig1large.jpg "लक्ष्य =" _blank "> यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र 2
चित्रा 2 Bihemispheric मानव मस्तिष्क काटना। Formalin तय मानव मस्तिष्क आंख निरीक्षण के लिए एक फ्लैट सतह पर रखा (क)। लाल रेखा औसत दर्जे का अनुदैर्ध्य विदर इंगित करता है। औसत दर्जे का अनुदैर्ध्य विदर (ख) के माध्यम से एक केंद्रीय कटौती के बाद दो मस्तिष्क गोलार्द्धों की नियुक्ति। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र तीन
चित्रा 3. Bihemispheric मस्तिष्क काटना प्रक्रिया। यह आंकड़ा के कदम का कुछ पता चलता है bihemispheric मानव मस्तिष्क काटने प्रोटोकॉल। सभी मस्तिष्क स्लैब (दोनों गोलार्द्धों के लिए) के निपटान और एक ललाट पश्चकपाल दिशा (एक), प्रत्येक स्थापित मस्तिष्क क्षेत्र को इकट्ठा करने के लिए निम्न (तालिका 1) के बाद ऊतक ब्लॉक में कटौती की जाएगी फिटिंग मानक histocassette आयाम (ख - ई)। सेरिबैलम ऊतक ब्लॉक की आवश्यकता होगी बड़ा histocassettes (हरी [सही अनुमस्तिष्कीय गोलार्द्ध] और नीले रंग [बाएं अनुमस्तिष्कीय गोलार्द्ध] देखो, ई और एफ)। व्हाइट कैसेट ऐसे ओब्लोंगता, रीढ़ की हड्डी, आदि के रूप में मंझला संरचनाओं, के लिए कर रहे हैं। (ई - छ)। अंतिम bihemispheric मानव मस्तिष्क काटने प्रोटोकॉल और प्रत्येक neuroanatomical 1 टेबल में सूचीबद्ध क्षेत्र से युक्त मस्तिष्क के ऊतकों ब्लॉकों के बाद प्राप्त histocassettes लगानेवाला समाधान (10% तटस्थ बफर formalin) (- जी एफ) के एक ही प्रकार प्रारंभिक में फिर से डूब रहे हैं।tp_upload / 54602 / 54602fig3large.jpg "लक्ष्य =" _blank "> यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 4
चित्रा Immunohistochemistry द्वारा विभिन्न एंटीजन के लिए प्रत्येक मस्तिष्क गोलार्द्ध सना से 4. ऊतक वर्गों। (ए) यह आंकड़ा एक ही मानव मस्तिष्क के दोनों गोलार्द्धों से ऊतक वर्गों की एक श्रृंखला से पता चलता है। द्वि-hemispheric वर्गों की प्रत्येक श्रृंखला β -amyloid, फॉस्फोरिलेटेड-ताऊ, और फॉस्फोरिलेटेड α-synuclein (α-syn), जिसका सकारात्मकता अल्जाइमर और पार्किंसंस के रूप में आम उम्र से संबंधित neurodegenerative रोगों के साथ जुड़ा हुआ है के लिए immunostained गया। छवि की प्रस्तावित द्वि-hemispheric सममित मस्तिष्क काटने प्रोटोकॉल का उपयोग का विश्लेषण करने के वर्गों के संभावित कुल राशि का एक प्रतिनिधि उदाहरण दिखाता है। एलएच = बाएँ गोलार्द्ध, आरएच = सही गोलार्ध। ( ख) इन छवियों के रूप में β -amyloid neuritic सजीले टुकड़े, ताऊ-neurofibrillary tangles, और α-synuclein (α-syn) पॉजिटिव Lewy निकायों के लिए विशिष्ट immunohistochemistry प्रोटोकॉल का उपयोग करने के बाद माइक्रोस्कोप के नीचे देखा, आम उम्र से संबंधित मस्तिष्क घावों के नमूने दिखा। प्रत्येक छवि के अवर दाएं कोने में इस्तेमाल किया (5X, 20X, 40X और) बढ़ाना है और इसे सही घाव के प्रत्येक प्रकार की पहचान करने के उद्देश्य के प्रकार है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

आकृति 1
तालिका 1 Bihemispheric योजना काटना। इस तालिका में एक संरचनात्मक क्षेत्र प्रत्येक मस्तिष्क के दोनों बाएँ और दाएँ गोलार्द्धों में काटना को दर्शाता है। bihemispheric सममित काटने ताजा और तय दिमाग पर किया जा सकता है।यहाँ क्लिक करें इस फाइल को डाउनलोड करने के लिए rce.jove.com/files/ftp_upload/54602/54602table1.xlsx">Please~~MD~~aux।

आकृति 1
तालिका 2 प्रारंभिक निष्कर्षों Bihemispheric मानव मस्तिष्क काटना माध्यम से प्राप्त की। इस तालिका में चिकित्सकीय सामान्य, पुराने विषयों से चार मानव दिमाग पर प्रदर्शन एक bihemispheric सममित मानव मस्तिष्क काटने की प्रक्रिया के माध्यम से प्राप्त प्रारंभिक निष्कर्षों से पता चलता है। डेटा कि दो मस्तिष्क क्षेत्रों (entorhinal प्रांतस्था और हिप्पोकैम्पस) लगातार और जल्दी β -amyloid neuritic सजीले टुकड़े हैं और ताऊ-NFT के संचय में शामिल कर रहे हैं दिखा। घाव के इस प्रकार के सबसे संभावित विकारी प्रक्रिया के कारण ई माना जाता है। च = मादा; मीटर = पुरुष। कोष्ठकों के बीच संख्या प्रत्येक autopsied विषय की मौत पर आयु (वर्षों में) का प्रतिनिधित्व करते हैं। संभव हेमिस के त्वरित दृश्य के लिए एक अर्द्ध मात्रात्मक वर्णमिति कोडघावों, गंभीरता का स्तर, और अलग अलग उम्र के विषयों के बीच शारीरिक स्थानीयकरण के प्रकारों में pheric मतभेद इस्तेमाल किया गया है। Neg = नकारात्मक (हरा); विरल = 1 - 2 के घावों (पीला); मॉडरेट = 3 - 6 घावों (नारंगी); लगातार => 6 घावों (लाल)। इस फाइल को डाउनलोड करने के लिए यहां क्लिक करें।

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Discussion

यह मस्तिष्क को काटने विधि प्रत्येक तंत्रिकाविकृति विज्ञान प्रयोगशाला की विशिष्ट आवश्यकताओं, जबकि अभी भी इसकी मुख्य विशेषताओं में से एक के रूप में bihemispheric सममित काटने की प्रक्रिया को बनाए रखना है (उदाहरण के लिए, प्रत्येक गोलार्द्ध के लिए आकलन करने के लिए मस्तिष्क क्षेत्रों की संख्या को कम करने से) के लिए अनुकूलित किया जा सकता है। इस प्रस्तावित प्रोटोकॉल नियमित प्रक्रिया (शोध उन्मुख नयूरोपथोलोगिकल केन्द्रों) या केवल जब आवश्यक (विशिष्ट चिकित्सकीय उन्मुख अध्ययन) के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। यह चुनिंदा केवल जांच के विशिष्ट प्रकार के (यानी, immunohistochemistry) या आणविक विश्लेषण (यानी, जीनोमिक या प्रोटिओमिक विश्लेषण करती है) के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। देखने की एक तकनीकी बिंदु से, यह है कि कुछ रोग मतभेद (विशेष रूप से immunohistochemistry में) immunohistostaining तीव्रता में संभव artifactual बदलाव के कारण हो सकता है उल्लेख करने के लिए उपयोगी है। ये स्वत: धुंधला मशीनों का उपयोग, जो तेजी से artifactual धुंधला प्रभाव एक की संभावना को कम से कम किया जा सकताएन डी विविधताओं। यह तकनीकी रूप से विश्वसनीय रोबोट धुंधला मशीनों का उपयोग करके तकनीकी कलाकृतियों के कारण कारकों में से सबसे कम करने के लिए, वास्तव में वर्तमान में संभव है। इस प्रकार, तुलनीय परिणाम जब आकलन प्राप्त किया जा सकता है उदाहरण के लिए, एक ही विषय, या कई विषयों से दोनों गोलार्द्धों के एकाधिक सेट से दो मस्तिष्क गोलार्द्धों।

इसके अलावा, पिछले कुछ वर्षों के दौरान, मस्तिष्क घावों मानव दिमाग में मान्यता प्राप्त की संख्या अत्यधिक 39 बढ़ा दी गई है। मस्तिष्क घावों के इन नए प्रकार के एक बढ़ा जोखिम है कि पिछले दिमाग सामान्य या नियंत्रण के रूप में वर्गीकृत वास्तव में नहीं हैं बनाया। Immunohistochemistry तकनीक और नए नयूरोपथोलोगिकल खोजों के सुधार सभी के दिमाग में पहले के रूप में बैंकिंग का एक बुद्धिमान और समय-समय पर पुनर्मूल्यांकन सुझाव है कि "नियंत्रण," "छद्म-नियंत्रण" या "झूठी" नियंत्रण के मामलों के बाद से दिमाग हमेशा संभव 40 हैं।

की मुख्य सीमाइस विधि के समय और विशेषज्ञता (शारीरिक और रोग ज्ञान) आवश्यक है कि यह प्रदर्शन करने की राशि में होते हैं। इसके अलावा, मानव मस्तिष्क के जीनोमिक और प्रोटिओमिक पहलुओं का विश्लेषण करने के लिए लक्ष्य के अध्ययन के लिए एक मस्तिष्क बैंक टीम का प्रबंधन करने के लिए तैयार हैं, सभी मस्तिष्क दान प्रक्रियाओं, कानूनी सहमति व्यवस्था, मस्तिष्क हटाने, और ठंड या निर्धारण प्रक्रियाओं के लिए तत्काल काटने की जरूरत के लिए एक त्वरित ढंग से। आम तौर पर, इन सुविधाओं और कर्मियों को केवल विशेष अकादमिक या अनुसंधान केंद्रों में उपलब्ध हैं। इसके अलावा, जबकि विस्तृत काटने प्रक्रियाओं निश्चित रूप से बेहतर संभव संरचनात्मक मूल और प्रत्येक मस्तिष्क रोग के प्रसार रास्ते को समझने में मदद कर सकते हैं, वे भी हमेशा विस्तृत नैदानिक ​​जानकारी प्रत्येक मामले के लिए उपलब्ध की राशि के क्रम में सही clinicopathological सहसंबंध पढ़ाई प्रदर्शन करने के लिए निर्भर करेगा। इस प्रोटोकॉल के लिए सबसे अच्छा उपयोग करता है की एक है, तो, clinicopathological अनुदैर्ध्य अध्ययन है, जो अक्सर investigatio का सबसे अच्छा प्रकार हैं के संदर्भ में किया जाएगाn शव परीक्षण, सूक्ष्म, और immunohistochemistry पहले से एकत्र नैदानिक ​​डेटा के साथ निष्कर्षों सहसंबंधी अधिक विस्तृत नैदानिक, इमेजिंग, आनुवंशिक, पर्यावरण, और डेटा के अन्य प्रकार के इकट्ठा करने के लिए।

हैरानी की बात है, नयूरोपथोलोगिकल जांच, विश्लेषण वर्गीकृत करने, या hemispheric समारोह या स्थानीयकरण के संबंध में नयूरोपथोलोगिकल घावों की व्यापक स्पेक्ट्रम बढ़ाता अत्यंत दुर्लभ 41-44 कर रहे हैं। हालांकि, यह प्रतीत होता है कि कई बार और प्रौद्योगिकियों मानव तंत्रिकाविकृति विज्ञान के अध्ययन में अभूतपूर्व चुनौतियों के लिए तैयार हैं। एक सममित द्वि-hemispheric मस्तिष्क काटने प्रक्रिया का प्रस्ताव करने के लिए मुख्य कारण यह अजीब कार्यात्मक विषमताओं (शारीरिक या रोग) मानव दिमाग का सम्मान करने के लिए किया गया था। बहुत बार, आँख बंद करके स्वीकार कर लिया परंपरा सिद्ध से वैज्ञानिक कारण, केवल एक गोलार्द्ध (अक्सर प्रसंभात्य चयनित) के लिए और अधिक नयूरोपथोलोगिकल या प्रतिरक्षाऊतकरसायन मूल्यांकन के लिए निर्धारित किया गया है, जबकि अन्य संभावित आणविक के लिए जमे हुए किया गया हैया जैव रासायनिक विश्लेषण करती है। खासकर जब मानव दिमाग का अध्ययन, गोलार्द्ध और फलस्वरूप मस्तिष्क काटने के आकस्मिक चयन संरचनात्मक दृष्टि से संभावित खतरों होते हैं और संभव pathophysiological चयन पूर्वाग्रहों का कारण बन सकता है। जबकि व्यावहारिक कारणों के लिए, एक गोलार्द्ध फिक्सिंग और विपरीत ठंड एक गैर अनुसंधान के माहौल में उचित है, यह किसी भी अब neuropsychiatric विकारों के लिए नयूरोपथोलोगिकल अनुसंधान के संदर्भ में तर्कसंगत नहीं है। विशेष रूप से वर्तमान समय में, जब "इन विवो" न्यूरोइमेजिंग और आनुवंशिक जानकारी के अनुरूप मात्रा में शव परीक्षण में संभावित उपलब्ध हैं, एक इसी व्यापक नयूरोपथोलोगिकल आकलन के साथ एक सममित द्वि-hemispheric मस्तिष्क काटने की प्रक्रिया को नियमित किया जाना चाहिए। मानव मस्तिष्क की hemispheric विशेषज्ञता, इस तरह की भाषा, निपुणता, और भावनाओं (यानी, बाएँ और दाएँ प्रमस्तिष्कखंड में अंतर सक्रियण) के रूप में कई संज्ञानात्मक कार्यों में प्रदर्शन किया गया है नाम वायुसेना के लिएईडब्ल्यू। इस hemispheric विशेषज्ञता और उच्च संज्ञानात्मक और गैर-संज्ञानात्मक कार्यों में lateralization, जो आम तौर पर अंतर और अन्य स्तनधारी और गैर स्तनधारी प्रजातियों से मनुष्य की विशेषताएँ, ध्यान से तंत्रिकाविकृति विज्ञान की दृष्टि से विचार किया जाना चाहिए। वहाँ है कि, मनुष्यों में, neurodegeneration, neuroinflammatory प्रतिक्रिया, और neuroreparative क्षमता के संदर्भ में विशिष्ट रोग प्रक्रियाओं के लिए एक hemispheric झुकाव अभी तक ज्ञात नहीं है, और यह बहुत मुश्किल से ही किया गया है 40-43 की जांच की। इमेजिंग physiologically अच्छी तरह से जाना जाता है और चिकित्सकीय hemispheric विशेष सुविधाओं का समर्थन करता है, यह कितना कम संभव नयूरोपथोलोगिकल मतभेदों के संदर्भ में जाना जाता है आश्चर्य की बात है। एक सममित द्वि-hemispheric मस्तिष्क प्रक्रिया काटने, या और अधिक परिष्कृत बारी जमे हुए और सुडौल द्वि-hemispheric मस्तिष्क काटने प्रोटोकॉल तय प्रस्ताव द्वारा, हम एक विधि स्वस्थ और pathologi के दौरान मानव मस्तिष्क के विशिष्ट पहलुओं की खोज करने में मदद कर सकता है कि वर्णन करने के उद्देश्य सेकैलोरी की स्थिति, अपनी अनूठी hemispheric विशेषज्ञता और lateralization सुविधाओं पर आधारित है।

इस प्रोटोकॉल का सबसे महत्वपूर्ण कदमों में से एक, किसी भी क्षण में स्थापित करने, सामग्री, उपकरण और तुरंत उपलब्ध काटने के बाद से यह बहुत ही, जब एक मस्तिष्क पूर्वानुमान करने के लिए विशेष रूप से एक ताजा नमूना में सक्षम होने के लिए दुर्लभ है मस्तिष्क होने की आवश्यकता में होते है आ रहा है। इस प्रोटोकॉल की एक और महत्वपूर्ण कदम मैनुअल ताजा और तय मस्तिष्क काटने के लिए आवश्यक कौशल में होते हैं। एक समान ऊतक के साथ काम हालांकि, दो भौतिक-रासायनिक शर्तों (ताजा और तय ऊतक) प्रोटोकॉल का एक अनिवार्य और महत्वपूर्ण घटक काटने मस्तिष्क के लिए विशेषज्ञता का अधिग्रहण कर सकते हैं। इसके अलावा, neuroanatomical ज्ञान (विशेष रूप से ताजा मस्तिष्क प्रक्रियाओं के लिए) विशिष्ट शैक्षिक प्रशिक्षण अवधि supposes। ताजा मस्तिष्क प्रक्रियाओं के लिए, इसके अलावा, यह जरूरी और महत्वपूर्ण संभव के रूप में जल्दी से स्थानांतरित करने के लिए और सटीक और Tissu की अखंडता को बनाए रखने के लिए हैई। इस ऊतक में निहित सभी जैविक जानकारी, साथ ही संभावना भविष्य ताजा जमी सामग्री की आवश्यकता होती है जांच के प्रदर्शन करने के लिए रक्षा करेंगे (आरएनए, प्रोटीन, आदि।)।

डबल स्थिर और निश्चित सममित मस्तिष्क काटने विधि दोनों ताजा जमी प्राप्त करने के लिए सबसे अच्छा संभव समझौता प्रतिनिधित्व करता है (आनुवंशिक आणविक के लिए उपयोगी है, और microdissection का विश्लेषण करती है) और निश्चित (neuroanatomy, immunohistochemistry के लिए उपयोगी है, और बगल में पीसीआर का विश्लेषण करती है) से मस्तिष्क ऊतक वर्गों विशिष्ट मस्तिष्क क्षेत्रों में से है और दोनों गोलार्द्धों से सटे क्षेत्रों में। इस पद्धति वास्तव में एक ही मस्तिष्क क्षेत्र / क्षेत्र का उपयोग कर विभिन्न आणविक और इमेजिंग तकनीक के माध्यम से प्राप्त तुलनात्मक विश्लेषण का एक स्रोत का प्रतिनिधित्व करता है (उप-संरचनात्मक क्षेत्र, ग्रे बात नाभिक, सेल समूहों, वृक्ष के समान / कांटा, आदि।)। एक डबल जमे हुए और तय सममित मस्तिष्क काटने की प्रक्रिया एक ही ne से सटे मस्तिष्क ऊतक वर्गों प्राप्त करने की अनुमति होगीuroanatomical क्षेत्र। यह उनके विश्लेषण उज्ज्वल प्रकाश, रोशनी, और इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी का उपयोग (माइक्रोस्कोपी के प्रत्येक प्रकार के लिए विभिन्न प्रक्रियाओं रोजगार) के लिए अनुमति होगी। आरएनए / डीएनए / प्रोटीन निकासी की तकनीक भी लागू किया जा सकता है लेजर कब्जा microdissections के माध्यम से, उदाहरण के लिए, ठीक उसी क्षेत्र या न्यूरॉन्स, कोशिकाओं, बर्तन, आदि के समूह के लिए। यह बारी जमे हुए और सुडौल bihemispheric मस्तिष्क काटने तकनीक तय, संयुक्त रूप से नमूना ट्रैकिंग और प्रशीतन के लिए कम्प्यूटरीकृत सिस्टम के साथ चल रही है और संभावित भविष्य biomolecular के अध्ययन के आवेदन के लिए विशाल क्षमता की पेशकश करने लगता है।

वर्णित मस्तिष्क काटने की प्रक्रिया के लिए एक वैकल्पिक दृष्टिकोण प्रत्येक पूरे hemispheric सतह के पार के अनुभागीय काटने हो सकता है। हालांकि, इस विधि को और अधिक विशिष्ट और महंगे उपकरण (यानी, एक बड़ा microtome, बड़ा स्लाइड, आदि।) लोगों को सामान्य रूप से सबसे तंत्रिकाविकृति विज्ञान प्रयोगशालाओं में इस्तेमाल की तुलना की आवश्यकता है। इसके बजाय, हमारे मीethod, दोनों गोलार्द्धों से मस्तिष्क क्षेत्रों के एक अधिक व्यापक संग्रह का प्रस्ताव सामान्य रूप से सबसे अनुसंधान तंत्रिकाविकृति विज्ञान प्रयोगशालाओं में उपलब्ध है (और सस्ती) उपकरण का उपयोग कर उन एकल मस्तिष्क क्षेत्रों को काटने।

प्रस्तावित मस्तिष्क काटने, ऊतकीय सेलुलर, और subcellular मात्रा का ठहराव (यानी, निष्पक्ष Stereology के लिए) 45-47 की सटीक तरीकों के साथ जोड़ा जा सकता है। बाद सर्किट, नाभिक, न्यूरॉन्स, गैर neuronal कोशिकाओं, नाड़ी तंत्र असामान्यताएं, और neuronal नुकसान विशिष्ट रोग घावों से संबंधित पर मात्रात्मक डेटा ज्यादातर मनुष्यों में कमी कर रहे हैं मात्रात्मक नयूरोपथोलोगिकल अध्ययन, प्राथमिक महत्व है, और आवश्यकता से कर रहे हैं। हाल ही में, निष्पक्ष Stereology प्रोटोकॉल को रोजगार से प्राप्त विशिष्ट नयूरोपथोलोगिकल घावों की सटीक quantifications, एक विशिष्ट intraneuronal घाव के संचय के बीच संभव उपन्यास रिश्तों (यानी, Lewy निकायों), neuronal नुकसान (यानी, nigral हानि) पर प्रकाश डाला करने के लिए शुरू कियाऔर नैदानिक अभिव्यक्तियाँ (यानी, Parkinsonian लक्षण) जब मानव दिमाग 48 का विश्लेषण। अवशिष्ट कामकाज न्यूरॉन्स के रिश्तेदार मात्रा का निर्धारण या आवश्यक neuroglial कोशिकाओं प्रतिक्रिया, उदाहरण के लिए, इसके विपरीत, देरी, या विशिष्ट नयूरोपथोलोगिकल प्रक्रियाओं के लिए क्षतिपूर्ति, बेहतर विशेष रूप से उम्र बढ़ने के दौरान, वयस्क मानव मस्तिष्क की संवेदनशील और अनुकूली क्षमता को समझने में मदद कर सकता है। बड़ा न्यूरोनल परिवर्तन, neurites, घाव भार, फाइबर लंबाई, मोटाई cortical, cortical परत मोटाई अनुपात, और अन्य संभावित morphometric पहलुओं, विशेष रुचि के हैं neuropsychiatric रोगों या neurodegenerative प्रक्रियाओं के संदर्भ में सेलुलर और subcellular स्तर पर अपने संभावित pathophysiological प्रासंगिकता के बाद नहीं अभी तक पूरी तरह से 49 elucidated किया गया है। संख्या, आकार, फाइबर या neurites, ग्रे और सफेद पदार्थ की मात्रा और अनुपात की लंबाई, cortical परत का विश्लेषण करती है, आदि सभी मापदंडों ठीक दर्जे का धन्यवाद कर रहे हैंविशिष्ट सांख्यिकीय सूत्रों और ज्यामितीय एल्गोरिदम 50 के संयोजन के लिए। ज्यामितीय समीकरण और सांख्यिकीय फार्मूले सुंदर ढंग से अत्यधिक संवेदनशील, कम्प्यूटरीकृत micrometric tridimensional समन्वय मोटर चालित जैव tissutal माप के लगभग किसी भी प्रकार के histological मात्रा का ठहराव के लिए सिस्टम (Stereology मोटर चालित सिस्टम) के साथ एकीकृत किया गया है।

अब उपलब्ध मानव मस्तिष्क के ऊतकों का अध्ययन करने के neuroanalyses के सेट में कुछ साल पहले कल्पना नहीं था, और यह बहुत संभव है कि निकट भविष्य में आगे प्रगति होगी। रोगियों, चिकित्सकीय स्पर्शोन्मुख विषयों, और सामान्य व्यक्तियों से आज के दिमाग की विस्तृत लक्षण वर्णन अविश्वसनीय रूप से कल की खोजों और सबसे neuropsychiatric और neurodegenerative रोगों के लिए चिकित्सा के individuation को गति देगा। ऐसे neuropsychiatric रोगों के रूप में जटिल बीमारियों के संदर्भ में, यहां तक ​​कि वर्तमान परिष्कृत न्यूरोइमेजिंग तकनीक नहीं कर सकतेसेलुलर परिभाषा और जैविक जानकारी है कि आधुनिक तकनीक नयूरोपथोलोगिकल कर सकते हैं के उच्च स्तर प्रदान करते हैं। इसके अलावा, केवल स्थिर मस्तिष्क के ऊतकों छवियों neuronal कोशिकाओं या घावों या संभावना एकल न्यूरॉन्स में कटौती करने के एक समूह पर निष्पक्ष मात्रात्मक अध्ययन करने का अवसर प्रदान करते हैं (यानी, लेजर microdissection) आनुवंशिक या प्रोटीन सामग्री जन स्पेक्ट्रोस्कोपी के लिए विश्लेषण करती है निकालने के लिए, के लिए उदाहरण 51 व्याप्ति सममित bihemispheric मस्तिष्क काटने कार्यप्रणाली दूसरों के बीच में लागू किया जा सकता है, इस तरह के समान जुड़वां दिमाग की जांच कर उन के रूप में विशेष अध्ययन, करने के लिए। इस अनूठी experimentum Naturae स्थिति में, संभावित बेहतर समझने के लिए संभव hemispheric विशेषज्ञता / lateralization और अनुभूति / विकृति के बीच मौजूदा संबंधों में प्रभावशाली है। hemispheric संबंधी रोग समरूपता / विषमता के विभिन्न स्तरों और अधिक आसानी से एक प्रकृति / पोषण दुविधा के संदर्भ में विस्तार से बताया जा सकता है। उदाहरण के लिए, एक सममितद्वि-hemispheric मस्तिष्क काटने प्रक्रिया सहोदर जुड़वाँ 52-56 बनाम समान जुड़वा बच्चों के दिमाग पर किया जा सकता है।

एक सममित bihemispheric मस्तिष्क काटने तकनीक को भी मानव neurodevelopmental अध्ययनों से 57 करने के लिए लागू किया जाना चाहिए। बेहद जानकारीपूर्ण डेटा बचपन और बचपन के दौरान hemispheric से संबंधित neuronal और glial परिपक्वता समय, विकासात्मक neuroplasticity घटनाएं, और केंद्रीय तंत्रिका तंत्र के neuroreparative क्षमता के विशिष्ट पहलुओं के लिए एकत्र किया जा सकता है। एक सममित द्वि-hemispheric मस्तिष्क काटने प्रक्रिया बहुत बेहतर सामान्य विकास, सामान्य उम्र बढ़ने के दौरान व्यक्तित्व विशेषता गठन और व्यवहार में बदलाव के लिए प्रकृति / पोषण दुविधा को परिभाषित करने के लिए योगदान कर सकता है, और प्रारंभिक नैदानिक अभिव्यक्तियाँ के हिस्से के रूप में "छिटपुट" neurodegenerative प्रक्रियाओं 58।

शास्त्रीय clinicopathological संरचित मस्तिष्क काटने प्रक्रियाओं के माध्यम से प्रदर्शन किया दृष्टिकोण एक नहीं हैऐतिहासिक तकनीक है, लेकिन यह अभी भी निदान और अनुसंधान के एक वैध और उपयोगी उपकरण है। विशेष रूप से वर्तमान समय में, जब नैदानिक ​​और जैविक जानकारी के प्रभावशाली मात्रा में शव परीक्षण में संभावित उपलब्ध हैं, चिकित्सकीय अच्छी तरह से विशेषता मामलों, न्यूरोइमेजिंग डेटा, और विस्तृत आधुनिक नयूरोपथोलोगिकल / मात्रात्मक विश्लेषण के साथ आनुवंशिक / आणविक जानकारी का संयोजन एक अभूतपूर्व "का प्रतिनिधित्व कर सकता सही मैच "तंत्रिका विज्ञान के इतिहास में। संयुक्त मृत्युपूर्व और पोस्टमार्टम जांच काफी neuropsychiatric बीमारियों के कार्यात्मक और neuronal / tissutal ठिकानों को स्पष्ट और इन बीमारियों का सही etiopathogenetic तंत्र पर प्रकाश डाला, को भी ध्यान में संभव hemispheric कारक है कि विशेष रूप से पहले विचार नहीं किया गया ले जा सकते हैं। लेखकों को पता है कि प्रस्तावित सममित bihemispheric मस्तिष्क काटने तकनीक समय और धन लेने वाली हैं, लेकिन न्यूरोइमेजिंग की उन्नति के लिए प्रदर्शन किया उन लोगों के लिए इसी तरह के प्रयासों चाहिएसाथ ही तंत्रिकाविकृति विज्ञान अनुसंधान के क्षेत्र में किया जा सकता है। अधिक सामंजस्य और संरचित मस्तिष्क बैंकिंग गतिविधियों के निर्माण या एमआरआई मशीन खरीदने संभावित वैज्ञानिक परिणाम है कि न्यूरोइमेजिंग के अध्ययन से प्राप्त उन लोगों की तुलना में कम फायदेमंद नहीं होगा, के साथ अधिक से अधिक महंगा नहीं होगा।

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Disclosures

लेखकों के पास खुलासे के लिए कुछ भी नहीं है।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Copy of signed informed consent allowing autopsy and brain donation for research use.
Detailed clinical history of the subject which should include a detailed description of any neurologic and psychiatric symptoms and signs.
Medical or nonmedical video-recordings when available (especially useful in movement disorders field). Next-of-kin’s consent required.
Neuroimaging, neurophysiology, neuropsychiatric and assessment or clinicometric scales.
Genetic and family history data. Genetic reports review, if neurogenetic diseases were diagnosed.
Histology Container ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES 64233-24
Histology Cassettes VWR 18000-142 (orange)
Histology Cassettes VWR 18000-132 (navy)
Knife Handles and Disposable Blades ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES 62560-04
Long Blades ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES 62561-20
Disposable Blade Knife Handles ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES 72040-08
Scalpel Blades ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES 72049-22
Accu-Punch 2 mm ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES 69038-02 
Polystyrene Containers – Sterile ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES 64240-12
Dissecting Board ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES 63307-30
Formalin solution, neutral buffered, 10% Sigma-Aldrich HT501128 SIGMA
Hematoxylin Solution, Gill No. 2 Sigma-Aldrich GHS280 SIGMA
Eosin Y solution, aqueous Sigma-Aldrich HT1102128 SIGMA
anti-beta-amyloid Covance, Princeton, NJ SIG-39220 1:500
anti-tau Thermo Fisher Scientific MN1020 1:500
anti-alpha-synuclein Abcam ab27766 1:500
anti-phospho-TDP43 Cosmo Bio Co. TIP-PTD-P02 1:2000
Digital Camera Any
Head Impulse Sealing machine  Grainger 5ZZ35

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चिकित्सा अंक 118 मानव मस्तिष्क hemispheric विशेषज्ञता / lateralization neuropsychiatric बीमारियों neurodegenerative विकारों clinicopathologic सहसंबंध सममित मैक्रो-विच्छेदन सममित सूक्ष्म विच्छेदन biomolecular विश्लेषण न्यूरोइमेजिंग विश्लेषण
सममित Bihemispheric शवपरीक्षा मस्तिष्क मनुष्यों में स्वस्थ और रोग मस्तिष्क की स्थिति का अध्ययन करने के लिए काटना
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Iacono, D., Geraci-Erck, M., Peng,… More

Iacono, D., Geraci-Erck, M., Peng, H., Bouffard, J. P. Symmetric Bihemispheric Postmortem Brain Cutting to Study Healthy and Pathological Brain Conditions in Humans. J. Vis. Exp. (118), e54602, doi:10.3791/54602 (2016).

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