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Artigo de método

Lateral Crônica Cranial Janela Preparação Ativa In Vivo Observação Após Distal Middle Cerebral Oclusão da Artéria em Ratos

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DOI:

10.3791/54701

29 de dezembro de 2016

Neste artigo

Resumo

oclusão cirúrgica de um ramo distal da artéria cerebral média (MCAo) é um modelo usado com freqüência em pesquisa acidente vascular cerebral experimental. Este manuscrito descreve a técnica básica de MCAo permanente, combinada com a inserção de uma janela craniana lateral, que oferece a oportunidade para microscopia intravital longitudinal em ratinhos.

Resumo

Isquemia cerebral focal (ou seja, acidente vascular cerebral isquémico) pode causar lesão cerebral principal, que conduz a uma perda grave da função neuronal e, consequentemente, a um hospedeiro de motor e deficiências cognitivas. Sua alta prevalência coloca um problema de saúde grave, como acidente vascular cerebral é uma das principais causas de incapacidade a longo prazo e de morte em todo o mundo 1. A recuperação da função neuronal é, na maioria dos casos, apenas parcial. Até agora, as opções de tratamento são muito limitadas, em particular devido à janela de tempo estreita para trombólise 2,3. Que determina os métodos para acelerar a recuperação de acidente vascular cerebral continua a ser um objectivo médico prime; No entanto, isto tem sido dificultado pela insuficiência de conhecimentos mecanísticos para o processo de recuperação. pesquisadores tempos experimentais frequentemente empregam modelos de roedores de isquémia cerebral focal. Para além da fase aguda, a investigação acidente vascular cerebral é cada vez mais centrada na fase sub-aguda e crónica após isquemia cerebral. A maioria dos pesquisadores AVC aplicar permanente ou tranSIENT oclusão da MCA em ratinhos ou ratos. Em pacientes, oclusões do MCA estão entre as causas mais frequentes de acidente vascular cerebral isquêmico 4. Além de oclusão proximal da MCA utilizando o modelo de filamento, oclusão cirúrgica do MCA distal é provavelmente o modelo mais utilizado na pesquisa acidente vascular cerebral experimental 5. Oclusão de um distal (à ramificação das artérias lenticulo-estriadas) MCA ramo normalmente poupa o estriado e afeta principalmente o neocórtex. oclusão do vaso pode ser permanente ou transitória. Alta reprodutibilidade do volume de lesão e as taxas de mortalidade muito baixas em relação ao resultado a longo prazo são as principais vantagens deste modelo. Aqui, demonstramos como realizar uma janela craniana (CW) preparação crônica lateral ao seio sagital e, posteriormente, como na cirurgia de induzir um acidente vascular cerebral distal debaixo da janela usando uma abordagem craniotomia. Esta abordagem pode ser aplicada para imagiologia sequencial de alterações agudas e crónicas após isquemia atravésepi-iluminação, confocal de varredura a laser, e de dois fótons de microscopia intravital.

Introdução

O acidente vascular cerebral está entre as principais causas de incapacidade e morte em longo prazo em todo o mundo1, ficando em segundo lugar depois da doença coronariana. Além disso, o AVC é a principal causa de incapacidade a longo prazo, ressaltando seu tremendo impacto socioeconômico6-8. Além do tratamento agudo, a investigação de novas abordagens e mecanismos para acelerar e melhorar a recuperação após o AVC continua sendo um objetivo médico primordial7.

Nas últimas décadas, os dados da pesquisa experimental de AVC contribuíram substancialmente para a compreensão das complexas cascatas fisiopatológica....

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Protocolo

ÉTICA DECLARAÇÃO: Experimentos envolvendo indivíduos animais foram realizados de acordo com as diretrizes e regulamentos estabelecidos pela Landesamt fuer Gesundheit und Soziales, Berlim, Alemanha (G0298 / 13) e os critérios de chegar, conforme aplicável. Para este estudo, 10 a 12 do sexo masculino semanas de idade C57BL / 6J foram usadas.

1. Lateral Crônica Cranial Preparação Janela

  1. Realizar a anestesia com uma injecção subcutânea de cetamina (90 mg / kg) e xilazina (10 mg / kg). Teste para sedação adequada com um estímulo doloroso.
  2. Esterilizar os instrumentos cirúrgicos e campo cirúrgico com 70% de etanol.
  3. ....

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Resultados

A linha do tempo e os resultados representativos são mostrados nas Figuras 2 e 3. A preparação janela do crânio, com uma pequena janela lateral do crânio para o seio sagital superior (Figura 2 B, C, D) resulta em uma taxa de mortalidade e morbidade muito baixa quando realizada por um cirurgião experiente. Todos os 10 animais sobreviveram, e todos CW crónica pode ser usado para geração de imagens de alta qualidade, mesmo 28 dias após a ci.......

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Discussão

AVC é uma das principais causas de incapacidade a longo prazo e de morte em todo o mundo 1. Além do tratamento agudo, investigando novas abordagens e mecanismos para acelerar e melhorar a recuperação após acidente vascular cerebral continua a ser um objectivo primordial médica 7. pesquisadores tempos experimentais frequentemente empregam modelos de roedores de isquémia cerebral focal. De facto, os modelos indutores transiente ou permanente MCAo imitar um dos tipos mais comuns de isquemia cerebral f.......

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Divulgações

Os autores não têm nada a divulgar.

Agradecimentos

VP é participante do Programa Charité Clinical Scientist, financiado pela Charité - Universitätsmedizin Berlin e pelo Berlin Institute of Health. TB é bolsista de mobilidade de pós-doutorado do SNSF. Os autores recebem apoio financeiro da EinsteinStiftung/A-2012-153 para PV.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Microscópio cirúrgico binocularZeissStemi 2000 C
Fonte de luz para microscópioZeissCL 6000 LED
Almofada de aquecimento com sonda retalFST21061-10
Quadro estereotáxicoKopfModelo 930
Sistema de anestesia para isofluranoDraeger
IsofluranoPinça Abott
Dumont #5FST11251-10
Pinça Dumont #7FST11271-30
Pinça BipolarErbe20195-501
Pinça Bipolar Erbe                                                          20195-022
MicrodrillFST                                                          18000-17                
Porta-agulhaFST12010-14
5-0 sutura de sedaFeuerstein, Suprama
7-0 sutura de sedaFeuerstein,Suprama
8-0 sutura de sedaFeuerstein, Suprama
Câmara de Recuperação VeterináriaPeco ServicesV1200

Referências

  1. Mukherjee, D., Patil, C. G. Epidemiology and the global burden of stroke. World Neurosurg. 76 (6), Suppl 85-90 (2011).
  2. Ebinger, M., Prüss, H., et al. Effect of the use of ambulance-based thrombolysis on time to thrombolysis in acute ischemi....

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Reimpressões e permissões

Etiquetas

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