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Artigo de método

A confirmação da Isquemia Miocárdica e reperfusão em ratos usando Pad Superfície Eletrocardiografia

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DOI:

10.3791/54814

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24 de novembro de 2016

Neste artigo

Resumo

Durante a cirurgia de isquemia/reperfusão miocárdica murina, a colocação correta da ligadura ocluída é normalmente confirmada pela observação visível da palidez miocárdica. Aqui, um método de confirmação eletrocardiográfica de isquemia e reperfusão, para complementar a palidez miocárdica observada, é demonstrado em camundongos C57Bl/6 machos.

Resumo

Muitos modelos animais foram estabelecidos para o estudo do remodelamento miocárdico e insuficiência cardíaca devido ao seu status como a causa número um de mortalidade em todo o mundo. Em humanos, uma oclusão patológica se forma em uma artéria coronária e a reperfusão dessa artéria ocluída é considerada essencial para manter a viabilidade do miocárdio em risco. Embora essencial para a recuperação miocárdica, a reperfusão do miocárdio isquêmico cria sua própria lesão tecidual. A resposta fisiológica e a cicatrização de uma lesão de isquemia/reperfusão são diferentes de uma lesão de oclusão crônica. A lesão de isquemia/reperfusão miocárdica vem ganhando reconhecimento como um modelo clinicamente relevante para estudos de infarto do miocárdio. Por esse motivo, modelos animais paralelos de isquemia/reperfusão são vitais para o avanço da base de conhecimento sobre lesão miocárdica. Normalmente, a isquemia do coração do camundongo após a oclusão da artéria coronária descendente anterior esquerda (DA) é confirmada pela palidez visível do miocárdio abaixo da oclusão (ligadura). No entanto, isso oferece apenas uma maneira subjetiva de confirmar a colocação correta ou consistente da ligadura, pois existem várias artérias principais que podem causar palidez em diferentes regiões do miocárdio. Um método de registro de alterações eletrocardiográficas para avaliar a colocação correta da ligadura e a isquemia resultante, bem como a reperfusão, para complementar a palidez miocárdica observada, ajudaria a produzir tamanhos consistentes de infarto em modelos de camundongos. Por sua vez, isso ajudaria a diminuir o número de ratos usados. Além disso, as alterações eletrocardiográficas podem continuar a ser registradas de forma não invasiva e dependente do tempo após a cirurgia. Este artigo demonstrará um método de confirmação eletrocardiográfica de isquemia e reperfusão miocárdica em tempo real.

Introdução

A doença cardíaca continua a ser a principal causa de morte em todo o mundo 1,2. Não só é o ventrículo esquerdo (VE) da câmara mais muscular, responsável pelo bombeamento de sangue do coração para o corpo inteiro 3, é um comum local da lesão cardíaca pós-enfarte do miocárdio 4. morte do tecido ventricular esquerda muitas vezes resulta em insuficiência cardíaca sistólica. modelos animais de doença cardíaca são fundamentais para o avanço da pesquisa cardiovascular biomédica. A estirpe C57BL / 6 de camundongos têm sido uma escolha popular para modelos animais devido ao seu tempo de reprodução rápida, de baixo custo e facilidade de altera....

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Protocolo

Todos os procedimentos cirúrgicos realizados em animais devem ser realizadas de acordo com o Guia para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório 13 ou outras diretrizes éticas adequadas. Os protocolos devem ser aprovados pelo comitê de bem-estar animal na instituição adequada antes de prosseguir.

1. Preparação para o ECG

NOTA: Antes de começar, don equipamento de protecção individual, incluindo luvas, óculos e um casaco de laboratório limpo ou bata descartável.

  1. Limpe a almofada de ECG usando um não-álcool e solução de descontaminação com base não-lixívia. Gentilmente usar uma tarefa delic....

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Resultados

Um ECG normal de murino é apresentada na Figura 2 com marcadores alfabéticos para eventos eléctricos P, Q, R, S, J e T. P representa a despolarização atrial inicial. QRS é a onda de despolarização ao longo dos ventrículos. J é repolarização precoce e T representa a repolarização heterogêneo também conhecida como recuperação de 11. Deve notar-se que muitos laboratórios não utilizar a nomenclatura J-ondas e não se referem à SJT do segmento como a do segmento ST .......

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Discussão

Usando alterações no ECG como um método complementar para confirmar isquemia do miocárdio e reperfusão assegura o posicionamento preciso da ligadura oclusão. Precisão da colocação da ligadura é fundamental para a redução da variabilidade dos dados entre os animais. O LAD em um coração de rato é uma artéria difíceis de visualizar. Portanto, completando palidez visual, com alterações eletrocardiográficas vai ajudar a garantir o correto posicionamento do dano tecidual ligadura e resultante.

Uma.......

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Divulgações

Os autores não têm nada a divulgar.

Agradecimentos

Este trabalho foi apoiado por prêmios de Revisão de Mérito (BX002332 e BX000640) do Serviço de Pesquisa e Desenvolvimento de Laboratório Biomédico do Escritório de Pesquisa e Desenvolvimento de Assuntos de Veteranos, Institutos Nacionais de Saúde (R15HL129140) e fundos da conta de Pesquisa e Melhoria Institucional. O projeto é apoiado em parte pelo National Institutes of Health grant C06RR0306551.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Vevo 1100Fujifilm
Visual Sonics
Máquina de Ecocardiografia Placa
de Manuseio de MouseFujifilm
Visual Sonics
Placa de ECG Aquecida
Signa-Gel Gel Multi-Eletrodo Altamente Condutor
Parker15-25
Transpore de Eletrólito Fita Médica3M1527-0
PI-Spray IIInovações FarmacêuticasNDC 36-2013-25Agente de limpeza para placa de ECG
C57Bl6 CamundongosThe Jackson Laboratory000664Macho, 8 - 12 semanas
Isotesia-IsofluranoHenry ScheinNDC 1169-0500-1
ExcelMicrosoft
Systane Lubrificante Noturno Pomada para os OlhosAlcon65050935
7-0 Perma-Hand Silk SuturesEthicon640.O32
5-0 Perma-Hand Silk SuturesEthiconK809. Tesoura Cirúrgica O32
ROBOZRS-5881
FórcepsFerramentas de Ciência Fina11052-10
GazeBio Nuclear Diagnostics IncDIS-022B
Porta-AgulhasCiência Fina12565-14
Buprenex CIII Patterson Veterinary0-891-9756Analgésico de Cloridrato de Buprenorfina 
Produtos BetadinePurdue67618-150-08
NairChurch e Dwight Co.NRSL-22339-05
Finalidade Ferramentas de

Referências

  1. Kochanek, K. D., Murphy, S. L., Xu, J. Deaths: Final Data for 2011. Natl Vital Stat Rep. 63 (3), 1-120 (2015).
  2. World Health Organization. The 10 leading causes of death in the world. , Available from: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs310/en/ (2012).
  3. Klabunde, R. E. Cardiovascular Physiology Concepts 2edn. , Wolters....

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Reimpressões e permissões

Etiquetas

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