Este artigo descreve como realizar bypass cardiopulmonar em ratos. Este novo modelo facilitará a investigação dos mecanismos moleculares envolvidos na lesão de órgão.
É necessária uma assinatura do JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou inicie seu teste gratuito.
Artigo de método
Bypass cardiopulmonar em um modelo do rato: uma nova abordagem
* These authors contributed equally
Neste artigo
Resumo
Resumo
Como extracorpórea prolongada torna-se mais essencial durante intervenções cardíacas, uma crescente demanda clínica surge para otimização do processo e para minimizar danos nos órgãos resultantes de circulação extracorporais prolongada. O objetivo deste trabalho foi demonstrar um modelo totalmente funcional e clinicamente relevante de bypass cardiopulmonar em um rato. Relatamos o dispositivo design, otimização do circuito de perfusão e técnicas microcirúrgicos. Este modelo é um modelo agudo, que não é compatível com a sobrevivência, devido à necessidade de vários desenhos de sangue. Devido a gama de ferramentas disponíveis para ratos (por exemplo, marcadores, nocautes, etc), este modelo facilitará a investigação sobre os mecanismos moleculares de danos nos órgãos e o efeito de bypass cardiopulmonar em relação a outros comorbidades.
Introdução
Desde a introdução do extracorpórea (CEC), para a clínica, ele tem desempenhado um papel essencial na cirurgia cardíaca1. Na moderna cirurgia cardíaca, prolongado tempo de CEC é essencial para realizar procedimentos combinados e extensas reconstruções da aorta. Embora os avanços tecnológicos têm sido tremendos, o uso de circulação extracorporais é associado com intra e pós-operatória sistêmica e órgão local danificar2,3.
Grandes modelos animais foram desenvolvidos para investigar o papel da CEC em processos fisiológicos4,
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Protocolo
todas as experiências em animais foram realizadas em conformidade com a lei alemã de proteção Animal (TierSchG) e foram aprovadas pelo Comitê de bem-estar dos animais locais (Baixa Saxônia Secretaria de defesa do consumidor e da segurança alimentar, protocolo TSA 14/1556). O peso mínimo de mouse apropriado para este modelo é de 25 g.
1. preparativos pré-operatório
Nota: todos os procedimentos são realizados sob condições limpas, não estéril, com instrumentos esterilizados.
- Lugar 50-60 8 cm longo propileno oco fibras em paralelo em um tubo e se conectar com um adaptador T em ambos os lados. Pr....
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Resultados
Este protocolo descreve o circuito de perfusão, procedimentos cirúrgicos e monitoramento de parâmetros fisiológicos durante a CEC de um rato. Quando realizada por um micro-cirurgião adequadamente qualificado, os resultados são consistentemente e reproducibly obtidos.
Para manter a perfusão adequada do tecido, a pressão arterial média é sempre mantida entre 40 e 60 mmHg, ajustando o fluxo de sangue do CPB e adicionando de volume .......
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Discussão
Nós desenvolvemos um modelo clinicamente relevante pleno funcionamento da CEC em um rato. Com mais de 30 cepas de ratos a ter doenças cardiovasculares, nosso modelo poderia ser um ponto de partida para o desenvolvimento de novos protocolos potenciais relacionados à CEC. Além disso, devido a infinidade de reagentes específicos de rato e camundongos nocaute-para fora, este modelo não pode apenas substituir o actual modelo de rato da CEC, mas irá facilitar a dissecação dos mecanismos moleculares envolvidos em danos nos órgã.......
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Divulgações
Os autores não têm nada para divulgar.
Agradecimentos
Os autores têm sem agradecimentos.
....Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Sterofundin | B.Braun Petzold GmbH | PZN:8609189 | volume de escorva, 1:1 com Tetraspan |
| Tetraspan 6% HES Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 05565416 | volume de escorva, 1:1 com Sterofundin |
| Heparin Natrium 25.000 | Ratiopharm GmbH | PZN: 3029843 | 2,5 UI por ml de solução de escorva |
| NaHCO3 Solução a 8,4% | B. Braun Melsungen AG | PZN: 1579775 | 3% em solução de primer |
| KCL 7,45% Solução | B. Braun Melsungen AG | PZN: 2418577 | 0,1 mL para cardioplegia |
| Carprofeno | Zoetis Inc., EUA | PZN: 00289615 08859153 | 5 mg / kg / BW |
| 1 Fr PU Catheter | Instechlabs INC., EUA | C10PU-MCA1301 | artéria carótida |
| 2 Fr PU Catheter | Instechlabs INC., EUA | C20PU-MJV1302 | veia jugular |
| Vasofix Cateter de segurança 20G | B.Braun Medical | 4268113S-01 | intubação orotraqueal |
| 8-0 Sutura de seda trançada | Ashaway Line & Twine Mfg. Co., EUA | 75290 | ligadura |
| Isoflurano | Piramal Critical Care Deutschland GmbH | PZN:9714675 | narcose |
| CLINITUBES capilares sanguíneos | Radiomed GmbH | 51750132 | amostragem de sangue 60 - 95 microlitros |
| Tesoura de mola - lâminas de 6 mm | Fine Science Tools GmbH | 15020-15 | instrumentos |
| Tesoura de mola - lâminas de 2 mm | Ferramentas de ciência fina Instrumentos de GmbH | 15000-03 | |
| Ferramentas | Fine Science GmbH | 13009-12 | |
| Instrumentos de Dumont #55 Forceps | Fine Science Tools GmbH | 11295-51 | |
| Porta-agulhas Castroviejo Micro - 9cm | Ferramentas de Belas Ciências GmbH | 12060-02 | instrumentos |
| Micro Serrefines | Fine Science Tools GmbH | 18555-01 | Instrumentos |
| Bulldog Serrefine | Fine Science Tools GmbH | 18050-28 | instrumentos |
| MiniVent Ventilador para Ratos (Modelo 845) | Harvard Apparatus | 73-0044 | ventilação mecânica |
| Vaporizador de isoflurano Drager 19.1 | Drä gerwerk AG & Co. KGaA | anestesia 1,3 - 2,5% | |
| Dispositivo de aquisição de dados PowerLab 4/35 | ADInstruments Ltd, Nova Zelândia | PL3504 | pressão invasiva, ECG, temperatura |
| ABL 800 Flex | Radiometer GmbH | análise de gases sanguíneos | |
| NMRI camundongos | Charles River Laboratories | Crl:NMRI(Han) | macho, 30 - 35 g, 12 semanas de idade, alojado pelo menos 1 semana antes do experimento |
Referências
- Edmunds, L. Cardiopulmonary Bypass after 50 Years. N. Engl. J. Med. 351 (16), 1601-1603 (2004).
- Goto, T., Maekawa, K. Cerebral dysfunction after coronary artery bypass surgery. J. Anesth. 28 (2), 242-248 (2014).
- Uysal, S., Reich, D. L.
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Reimpressões e permissões
