Benefícios da terapia de ressincronização cardíaca em um modelo assíncrono de insuficiência cardíaca induzida por ablação de ramo esquerdo e ritmo rápido

Resumo

O estabelecimento de um modelo assíncrono insuficiência cardíaca (IC) crônica por estimulação rápida combinada com ablação de ramo esquerdo é apresentado. Speckle bidimensional imagem e aórtica integral de tempo velocidade de rastreamento são aplicados para validar este modelo HF estável com assincronismo ventricular esquerdo e os benefícios da terapia de ressincronização cardíaca.

Resumo

Agora é bem reconhecido que pacientes com insuficiência cardíaca (HF) com bloqueio de ramo esquerdo (LBBB) derivam substanciais benefícios clínicos de terapia de ressincronização cardíaca (CRT), e LBBB tornou-se um dos preditores importantes para resposta de CRT. O modelo convencional de HF induzida por tachypacing tem várias limitações principais, incluindo a ausência de LBBB estável e rápida reversão da disfunção ventricular esquerda de (LV) após a interrupção da estimulação. Portanto, é essencial estabelecer um modelo ideal de HF crônica com LBBB isolado para estudar os benefícios de CRT. No presente estudo, é estabelecido um modelo canino de HF assíncrona induzida pela ablação do ramo (LBB) esquerdo e 4 semanas de rápida estimulação ventrículo direito (RV). O RV e bem atrial eletrodos de estimulação (RA) através da abordagem da veia jugular, juntamente com um LV Epicárdica estimulação eletrodo, foram implantados para desempenho de CRT. Aqui apresentados são os protocolos detalhados de ablação por cateter de radiofrequência (RF), ritmo de implantação de pistas e estratégia de marca-passo rápida. Electrogramas intracardíacos e superfície durante a operação também foram fornecidas para uma melhor compreensão da ablação do LBB. Imagem de rastreamento de speckle bidimensional e integral do tempo de velocidade da aorta (aVTI) foram adquiridos para validar o modelo de HF estável crônico com assincronismo LV e benefícios do CRT. Através da coordenação de contração e ativação ventricular, CRT uniformizados o trabalho mecânico de LV e restaurou a função de bomba de LV, que foi seguida por reversão de dilatação de LV. Além disso, o estudo histopatológico revelou uma restauração significativa de casos diâmetro e colágeno fração de volume (CVF) após o desempenho de CRT, indicando um histológica e celular inverter remodelação provocada pela CRT. Neste relatório, nós descrevemos um método viável e válido para desenvolver um modelo HF assíncrono crônico, que era adequado para o estudo estrutural e biológico CRT seguir remodelação reversa.

Introdução

HF crônica avançada é das principais causas de mortalidade por várias doenças cardiovasculares. Um subconjunto de pacientes com insuficiência cardíaca congestiva (ICC), também, desenvolver descoordenação de condução ventricular que agrava os sintomas e prognóstico. CRT, também conhecido como estimulação biventricular, foi introduzido como uma terapia alternativa para estes pacientes para mais de 20 anos,^1,2. Infelizmente, cerca de 20-40% dos pacientes mostram má resposta à CRT. Desde então, muitos estudos foram realizados a fim de maximizar a CRT resposta³. Agora é bem reconhecido que pacientes com LBBB poderiam beneficiar mais do CRT do que aqueles com não-LBBB⁴, uma vez que um padrão LBBB faz com que uma maior magnitude de Dissincronia cardíaca devido à assimetria na liberdade de movimento de parede entre paredes septais e laterais . Entretanto, estudos recentes têm começado a explorar as mudanças na expressão gênica e remodelação molecular associado com CRT⁵. Que acompanha a remodelação reversa estruturais induzidas pela CRT, celular e molecular de reversão a um nível normal é de grande interesse⁶. Portanto, é essencial estabelecer um modelo ideal de CHF com LBBB isolado para estudar os benefícios de CRT.

Crônica, estimulação ventricular rápida foi usado para produzir CHF em um modelo canino. RV ritmo, sem dúvida, poderia produzir contração de LV atrasada como um modelo do padrão como LBBB contração. No entanto, este tipo de assincronia funcional com um sistema de condução intacta não pode emular LBBB anatômica e não é considerado um modelo adequado para estudar o desempenho do CRT, a essência do que é coordenar prejudicada ativação elétrica e contração do miocárdio. Rápido restabelecimento da contratilidade LV e recuperação parcial de dimensões LV após cessação da estimulação também foram relatados⁷.

Estudos experimentais têm induzido LBBB crônica por ablação de RF para estabelecer a contração ventricular assíncrono⁸. Uma combinação de redução em função de bomba global e regional trabalho mecânico inválido pode exacerbar CHF gerando ineficiência cardíaca, bem como a remodelação cardíaca no tecido, níveis celulares e moleculares. Em corações LBBB, carga de trabalho é mais baixa do septo e mais alto na parede lateral de LV. Como consequência, remodelação cardíaca é mais pronunciada na parede lateral⁹. O objetivo do presente estudo é: (i) para avançar um modelo HF estável e crônico com assincronismo mecânico interventricular e intraventricular através da estimulação de RV rápida em combinação com ablação LBB; (ii) para confirmar dyssynchronous HF em nosso modelo e benefícios CRT na coordenação de contração por bidimensional speckle tracking ecocardiografia e aVTI; e (iii) para explorar preliminarmente remodelamento reverso celular provocada pela CRT.

Protocolo

Quinze cães beagle macho (12 a 18 meses de idade, pesando em torno de 10,0-12,0 kg) foram adquiridos e submetidos a experiências. Todos os procedimentos foram realizados em conformidade com o guia para o cuidado e o uso de animais de laboratório publicado pelo nos institutos nacionais de saúde (publicação n º 85-23, 1996 revisada) e foram aprovados pelo Comitê de cuidado Animal em Zhongshan Hospital, Fudan Universidade. A Figura 1 mostra o fluxo de trabalho esquemático para todas as etapas do protocolo.

1. pré-cirurgia preparação e coleta de dados de base

1. Raspe o cabelo de um membro posterior para punção venosa. Estabelece um acesso venoso através do ramo lateral da veia safena pequeno de cães beagle experimental usando um cateter venoso (22g, 0,9 mm × 25 mm). Injete lentamente pentobarbital de sódio (30 mg/kg) através do cateter venoso para induzir anestesia, o que é confirmada por perda do reflexo da pestana. Dar pentobarbital de sódio adicional na dosagem de 10 mg/kg em caso de recuperação de anestesia durante a cirurgia.
2. Proteger os membros para a mesa de operação com corda grossa e manter o animal em posição supina.
3. Corte o cabelo das extremidades dos membros e no peito. Cole os eletrodos de chumbo de membro para extremidades dos membros e os eletrodos precordiais chumbo em seis locais designados na parede torácica. Registro de eletrocardiograma (ECG) de base.
4. Avaliação ecocardiográfica
   1. Cole os eletrodos de chumbo do ecocardiográficos para os membros do animal.
   2. Realizar um exame ecocardiográfico padrão. Dos quatro apical convencional de câmara (A4C) e dois apicais visualizações (A2C) de câmara, obter o volume final diastólico de LV (LVEDV), LV volume final-sistólica (LVESV) e fração de ejeção de LV (FEVE) calculado usando o método de Simpson o biplano.
   3. Avalie a tensão longitudinal LV por speckle bidimensional imagem de rastreamento. Execute speckle rastreando o A4C, A2C e vista apical longo eixo (APLAX).
   4. Obter as curvas de tensão longitudinal das três acima vistas apicais aos níveis basais, meados-ventricular e apicais em cada parede (A4C: septo e parede lateral; A2C: parede anterior e parede inferior; APLAX: parede de septo anterior e posterior). O software automaticamente irá integrar estes dados para produzir um mapa de olho de boi de 17 segmentos, incluindo 6 segmentos a nível basal (septo, parede lateral, parede anterior, parede inferior, borde anterior do septo e parede posterior), 6 segmentos para o médio-ventricular nível (septo, parede lateral, parede anterior, parede inferior, borde anterior do septo e parede posterior), 4 segmentos a nível apical (septo, parede lateral, parede anterior, parede inferior) e um tampão apical.
   5. Tempo para a tensão de pico (TTP) é definido como o intervalo de tempo desde o início do complexo QRS para o ponto mais baixo da curva de tensão, que indica a tensão longitudinal máxima. Calcule o desvio padrão de 17-segmento TTP (PSD) para avaliar o sincronismo mecânico de LV.
   6. Grave as velocidades de fluxo Doppler transaortic na exibição de cinco câmara apical. Medir e média da aVTI em 3-4 batidas consecutivas.
5. Intubação orotraqueal e ventilação mecânica
   1. Suavemente, puxe a língua para fora e manter a extensão da língua em preparação para intubação orotraqueal. Posicione o animal em uma posição de "cheirar".
   2. Avance lentamente a lâmina curvada do laringoscópio até a ponta da lâmina posicionada entre a base da língua e a epiglote. Levante o laringoscópio para cima para expor as cordas vocais. Inserir um tubo endotraqueal na boca e passar o tubo além das cordas vocais. Fixe o tubo para a cabeça do animal usando fita adesiva.
   3. Auscultate ambos os pulmões para confirmar a colocação correcta do tubo endotraqueal, como evidenciado pela respiração bilateral e simétrica durante a ventilação de pressão positiva.
   4. Conecte a extremidade exterior do tubo endotraqueal para um respirador de volume de um ciclo. Iniciar e manter a ventilação mecânica auxiliar com ar ambiente. Definir a frequência de respiração em 8 - 20 vezes por minuto com um volume corrente de 8 a 15 mL/kg. Defina os parâmetros de acordo com a SpO₂ medida pelo oxímetro de pulso.

2. Epicárdica LV implante de eletrodos de estimulação

1. Ligue os fios de chumbo de desfibrilador/monitor cardíaco para os eletrodos de pele, que estão conectados para os membros. Pre-medicar o animal com Levofloxacina 0,3 g por via intravenosa guttae.
2. Após raspar os cabelos do pescoço e peito, esterilizar a região torácica anterior e região cervical esquerda com Iodofor e pavimentar os lençóis estéreis.
3. Toracotomia
   1. Execute a músculo poupadores toracotomia em uma posição de decúbito lateral direito. Após a administração de fentanil por uma infusão contínua de taxa (0,01 mg/kg/hr) por via intravenosa, faça uma incisão na pele transversalmente da linha paraesternal esquerdo no quarto espaço intercostal.
   2. Após dissecção romba de 3 camadas de músculo torácica (peitoral maior, peitoral menor, intercostais), abra a cavidade pleural esquerda do quarto espaço intercostal (entre as 4^th e 5^th costelas) por dissecação afiada. Coloque um retractor de costela no espaço intercostal. Pacote de gaze estéril, imergido em 0,9% NaCl em torno dos lobos do pulmão para proteger os pulmões e para manter um campo de visão claro.
   3. Cuidadosamente incisão no pericárdio lateral que utilizando o eletrocautério. Abrir o pericárdio para expor totalmente a parede lateral de LV com ficar suturas (0-sutura).
4. LV, implante de eletrodos de estimulação
   1. Suture o LV unipolar estimulação eletrodo para o miocárdio na parede lateral LV com um ponto usando uma sutura de 4-0. Faça um nó suave na sutura para evitar lacerar os tecidos do miocárdio.
   2. Conecte o pino de metal terminal de chumbo a estimulação com um cabo de ponte para testar parâmetros de chumbo. Depois de chumbo satisfatório parâmetros são obtidos com o limiar de estimulação < 2.0 V em ms 0,48 e impedância de chumbo < 2.000 Ω, ligeiramente puxar a liderança de eletrodo para garantir uma fixação firme.
5. Remover as suturas de estadia e examine cuidadosamente a área de cirurgia para eliminar o sangramento ativo.
6. Feche o pericárdio com dois pontos, usando 2-0/T suturas. Retire a gaze recheada e o afastador de costela.
7. Use dois pericostal suturas (0-sutura) para aproximar a 4^th e 5^th costelas. Feche a fáscia intercostal com vários pontos usando sutura 2-0/T. Infle os pulmões adequadamente, usando um balão auxiliar através de intubação orotraqueal antes a última sutura. Olhe através do intercostais para confirmar a normal expansão dos pulmões.
8. Reposicione as camadas de músculo no lugar com sem suturas. A liderança de marca-passo penetra o pericárdio, intercostal fáscia e músculo camadas sucessivamente pela lacuna entre knots de cirurgia.
9. Faça uma incisão na pele da região cervical esquerda e dissecar o tecido subcutâneo até atingir a fáscia profunda usando uma pinça curvada. Construa um túnel subcutâneo acima o facia profunda da área precordial à região cervical esquerda com uma pinça reta.
10. Puxe o pino terminal do chumbo através do túnel para região cervical esquerda, usando uma pinça reta. Cobrir o pino terminal com uma luva de isolamento, que é ligado usando sutura 2-0/T. Sutura do chumbo ao redor da manga para a fáscia e localmente incorporar o chumbo no lado esquerdo do pescoço.
11. Feche o tecido subcutâneo e pele de ambas as incisões cervicais e torácicas usando 0-suturas.
12. Parar a indução da anestesia, quando o animal está tomando respirações espontâneas, desconecte o ventilador do tubo endotraqueal. Depois que o animal se recupera da anestesia, remova a intubação traqueal e cateter venoso. Manter o animal sob observação até recuperação completa.
13. Injete por via intramuscular 800.000 U de penicilina a cada 12 h por 2 semanas após a operação.

3. RA e RV implante de eletrodos de estimulação

1. Implante de RA e RV eletrodos de estimulação 2 semanas após o implante de eletrodos de LV, quando o animal se recupera da toracotomia. Efectuar a operação na sala de cirurgia de cateterismo cardíaco, equipada com um aparelho de fluoroscopia.
2. Induzi a anestesia como no passo 1.1. Proteger os membros para a mesa de operação e manter o animal em posição supina. Pre-medicar o animal com Levofloxacina 0,3 g por via intravenosa guttae.
3. Corte o cabelo das extremidades dos membros. Ligue os fios de chumbo de monitor de ECG para os eletrodos de pele e colar os eletrodos de pele para extremidades dos membros. Ligue o monitor de ECG e selecione chumbo II para monitorização intra processuais.
4. Após raspar os cabelos do pescoço, esterilizar a região cervical esquerda com Iodofor e armar a folha estéril. Administrar o fentanil por uma infusão contínua de taxa (0,01 mg/kg/hr) por via intravenosa, durante todo o processo.
5. Abordagem venosa
   1. Faça uma pequena incisão vertical perto ferimento no lado esquerdo da área cervical anterior. Usando a dissecção romba, separado da fáscia para expor a veia jugular externa esquerda. Separe a veia de tecidos conjuntivos cuidadosamente com uma pinça mosquito.
   2. Suavemente puxe a veia utilizando uma pinça curvada e passe duas suturas de 2-0/T abaixo da veia. Amarrar a sutura distal.
   3. Levante a sutura distal suavemente e corte um pequeno buraco no meio das duas suturas com uma tesoura de íris. Usando uma picareta de veia, inserir passiva RA J-dado forma de chumbo e chumbo de RV ativo na veia jugular externa esquerda.
6. Implantação de chumbo de RV
   1. Uma vez que a liderança de RV tem sido avançada para o átrio direito baixo ou veia cava inferior sob fluoroscopia, retire o estilete reta do cabo de RV. Uma forma de J na parte distal do estilete e inseri-lo novamente através do chumbo o RV.
   2. Com a ajuda do estilete curvo, introduza a liderança através da válvula tricúspide e para o trato de saída. Retire lentamente tanto o chumbo e o estilete, permitindo que a ponta de chumbo para prolapso em direção ao ápice do RV.
   3. Substitua o estilete curvado por uma reta. Avança a pista em direção ao ápice.
   4. Teste os parâmetros de chumbo com o estilete retirado sobre no meio do caminho. Parâmetros satisfatórios incluem um limiar de estimulação < 1.0 V a amplitude da onda R 0,48 ms > 5,0 mV e impedância de chumbo < 2.000 Ω. Uma vez que são obtidos parâmetros elétricos aceitáveis, estender a hélice ativa, retire o estilete e re-medir os parâmetros.
7. Implantação de chumbo de RA
   1. Mantendo a liderança de RA, voltada para o átrio anterior alto, recue lentamente o estilete em linha reta, permitindo a retração do chumbo em forma de J pré-formados com sua ponta entrando o apêndice. Um movimento característico oscilatórias do eléctrodo com atividade atrial pode ser observado.
   2. Parâmetros satisfatórios incluem um limiar de estimulação < 1.0 v a amplitude da onda P ms 0,48 > 2,0 mV e impedância de chumbo < 2.000 Ω. Da mesma forma, quando são obtidos dos parâmetros aceitáveis, ajustar a folga de chumbo e retire o estilete.
8. Depois de verificar sobre a estabilidade de ambas as pistas, aperte a sutura proximal para o venotomy. Amarre as duas pistas para a fáscia profunda subjacente com dois ou três suturas de 2-0/T ao redor as mangas de sutura. Verifique novamente os parâmetros elétricos e posição de ambas as pistas sob fluoroscopia após a sutura.
9. Fazer um bolso do gerador de pulso perto da entrada venosa e em um avião apenas acima da camada fascial e abaixo da gordura subcutânea. Crie o bolso usando dissecção romba com uma pinça curvada. Deve ser grande o suficiente para acomodar o gerador e ligações redundantes.
10. Limpe e seque os pinos de chumbo. Cobrir o pino terminal o chumbo atrial com uma manga de isolamento e suturar o chumbo no chão do bolso. Inserir um gerador de pulso de marcapasso ventricular liderança e aperte-o com o pino do conector distal passado os conjunto de parafusos do gerador.
11. Coloque o gerador no bolso com os contatos redundantes sob o dispositivo de bobinamento. Amarre o gerador até a fáscia com uma sutura 2-0/T através do furo de fixação no cabeçalho do gerador. Realize o exame fluoroscópico de todo o sistema.
12. Após verificar hemostasia, feche o bolso e fáscia superficial em camadas usando o 2-0/T suturas. Finalmente, aproximar as bordas de pele com 0-suturas e programar o marcapasso para um modo OVO usando uma varinha de telemetria.
13. Para os animais do grupo farsa, implante os contatos LV, RV e RA de forma semelhante, mas com nenhuma inserção de gerador.

4. LBB ablação

1. Realizar a ablação por cateter sob a orientação de fluoroscopia imediatamente depois de RV e RA levar a implantação. Raspe o cabelo do peito, costas e região inguinal direita. Mantenha o animal na posição supina.
2. Preparar um gravador eletrofisiológico de multi-canal para simultânea eletrograma intracardíaca e superfície de gravação, com configurações de filtro de 30-400 kHz (bipolar) ou 0.05-500 kHz (unipolar) e uma amplificação do sinal de 5.000 vezes. Anexe o eléctrodo de retorno sem fio para as costas e os eletrodos de 12 derivações padrão para os membros e no peito. Conecte todas as pistas para o gravador eletrofisiológico e gravar a eletrograma a uma velocidade de varredura de 100 mm/s.
3. Abordagem venosa e arterial
   1. Após a desinfecção de rotina e drapeados na região inguinal direita, faça uma pequena incisão vertical através da pele. Usando a dissecção romba, separado da fáscia para identificar a veia femoral direita e a artéria femoral.
   2. Suavemente, puxe a veia femoral e coloque duas suturas de estadia (2-0/T sutura) sob a veia. Amarrar a veia na extremidade distal. Realize a mesma manobra na artéria femoral.
   3. Ligeiramente, pegar a veia femoral e introduzir uma agulha de micropunção proximalmente na veia entre as duas suturas. Segure a agulha e introduza uma ponta flexível (disquete J-dado forma) fio-guia através da agulha.
   4. Quando foi passado bastante fio-guia na veia, retirar a agulha e avançar um dilatador e bainha combinação (6-Fr) sobre o fio-guia na veia femoral. Retire o fio-guia e o dilatador com a bainha restante para introdução do cateter. Amarre uma sutura solta em torno da veia proximal para o venotomy com a bainha venosa no lugar.
   5. Da mesma forma, inserir uma bainha 7-Fr na artéria femoral. Entrega um bolus de 100 U/kg diluída em solução salina heparina dentro da bainha arterial para evitar a coagulação.
4. Mapeamento do lado direito de seu potencial de pacote
   1. Avança um 6-Fr steerable transvenosos cateter na veia femoral através da bainha venosa. Conecte a extremidade do cateter ao gravador eletrofisiológico multi-canal através do módulo de entrada do cateter por cabos.
   2. Passe o cateter na aurícula direita e através da válvula tricúspide até é claramente no ventrículo direito. Em uma anterior direita (RAO) 30° fluoroscopia visualização oblíqua, retire o cateter através do orifício da válvula tricúspide até um potencial atrial aparece e torna-se maior. Um torque no sentido horário leve ajuda a manter os eletrodos em contato com o septo. Quando os potenciais atrial e ventriculares são aproximadamente iguais em tamanho, uma deflexão bifásica ou trifásico aparece entre eles, representando o lado direito seu pacote potencial.
5. Ablação e mapeamento de potencial (LBP) esquerdo ramo
   1. Introduza um cateter de ablação steerable 7-Fr 4 mm-ponta na artéria femoral através da bainha arterial. Conecte a extremidade do cateter de ablação para o gerador de RF e eletrofisiológico gravador multicanal por cabos.
   2. Passe o cateter arterial retrogradely através da válvula aórtica e avanço para o LV em uma visão de 30° Rodrigues. Desvie a ponta do cateter em direção ao septo interventricular. Mantenha o eletrodo em contato com o septo.
   3. Numa esquerda anterior oblíqua (LAO) 45° fluoroscopia vista, retire lentamente o cateter ao longo do septo até a esquerda face que seu potencial de pacote é registrado entre eletrograma atrial e ventricular, logo abaixo da válvula aórtica. Então lentamente avance o cateter ao longo do septo e manipular a ponta para identificar uma discreta LBP, que é gravado sob a aórtica válvula, tipicamente de 1-1,5 cm inferior para o lado esquerdo dele bundle gravação local.
   4. Quando o intervalo de potencial-para-ventricular eletrograma é menor do que o intervalo HV e um A cerca de 10 ms / relação do eletrograma V de < 01:10 é observado, o LBP é identificado. Geralmente o LBP para o intervalo mais antigo do eletrograma ventricular (LBP-V) é menor que 20 ms, o que pode minimizar o risco de bloqueio A-V completo.
   5. Depois de uma posição de LBP satisfatória é alcançada, iniciar a ablação por cateter com um gerador de RF, fornecimento de energia de onda senoidal modulada 500 kHz (faixa de potência W 30-40). Ajuste a potência para atingir uma temperatura de 60 ° C na interface eletrodo-tecido-alvo. Se a temperatura não suba acima de 50 ° C, no prazo de 15 s, descontinuar o fornecimento de energia, ajustar a ponta do cateter e começar de novo.
   6. Monitore a impedância continuamente durante a aplicação de energia. Uma gota de impedância maior que 6-8 Ω durante o fornecimento de energia é considerada um sinal de contato de bom tecido e aquecimento adequado.
   7. LBBB típico é definida por: um prolongamento da duração do QRS; QRS positivo em pistas I, II, V5, V6 com entalhado onda R e negativa em aVR pistas, V1; e uma perda do eletrograma LBP. Se não há alteração na morfologia do QRS após 10 s, parar a entrega de energia e ajuste o cateter para encontrar um novo alvo LBP. Quando uma morfologia típica de LBBB QRS aparece no eletrograma superfície, continue a aplicação de energia por 60-90 s ou até um aumento súbito da impedância.
   8. Pare a entrega de energia imediatamente em caso de bloqueio atrioventricular de completo (3 grau de^rd ) ou fibrilação ventricular (VF). Implemente a desfibrilação elétrica rapidamente sempre que VF ocorre.
   9. Quando uma morfologia LBBB QRS é alcançada, observe a eletrograma superfície por um período de estabilização de 30 min. Se aparecer uma morfologia QRS normal, repita o procedimento de ablação acima mencionados.
6. Concluído o procedimento de ablação por cateter, Remova ambos os cateteres. Remova a bainha venosa e arterial e faça nós firmes rapidamente sobre as suturas proximais para prevenir a hemorragia.
7. Após um exame cuidadoso para evitar sangramento ativo, feche a fáscia em camadas usando o 2-0/T suturas. Finalmente feche a pele com suturas-0.
8. Desconecte todos os eletrodos do animal e monitorar o animal frequentemente até a completa recuperação da anestesia. Injete por via intramuscular 800.000 U de penicilina a cada 12 h durante 1 semana após a operação.
9. Ablação do LBB não é executada pelo grupo farsa.

5. estimulação para HF indução rápida

1. Quando o animal se recupera da operação, registro a superfície ECG novamente para confirmar a presença permanente de LBBB 1 semana depois. Em seguida, programa o marcapasso de um modo VVI em 260 batidas por minuto (bpm) usando uma varinha de telemetria.
2. Induzir a anestesia (etapa 1.1) e programar o marcapasso para modo de OVO após 4 semanas de ritmo rápido.
3. Realize ecocardiografia para avaliar FEVE (com referência a etapa 1.4). Se a FEVE diminui abaixo de 35%, prepare o animal para o desempenho de CRT. Se a FEVE é ainda superior a 35%, submeta o animal a RV rápida estimulação novamente pela reprogramação do marcapasso para modo VVI a 260 bpm.
4. Realize ecocardiografia cada 2 semanas até que a FEVE abaixo de 35%. Uma vez que a realização do objectivo de FEVE, terminar rápido ritmo de RV e preparar a estratégia de CRT.
5. Animais do grupo farsa não são submetidos ao ritmo rápido.

6 desempenho de terapia de ressincronização cardíaca

1. Divida os animais com HF no grupo controle e grupo CRT aleatoriamente. Para o grupo de controle de HF, deixe o animal sobreviver outro 8 semanas sem qualquer intervenção. Para o grupo de CRT, começa desempenho CRT através de estimulação biventricular.
2. Após a indução da anestesia (etapa 1.1), manter o animal em posição supina, fixando os membros para uma mesa de operação. Pre-medicar o animal com Levofloxacina 0,3 g por via intravenosa guttae. Raspar os pelos do pescoço, esterilizar a região cervical esquerda e cubra a folha estéril.
3. Após a administração de fentanil por uma infusão contínua de taxa (0,01 mg/kg/hr) por via intravenosa, fazer uma pequena incisão vertical imediatamente ao lado do ferimento anterior no lado esquerdo do pescoço. Usando a dissecção romba, separe a fáscia para isolar o gerador de pulso e ritmo conduz (incluindo os fios, LV, RV e RA) com nenhum ferimento.
4. Solte o pino terminal de chumbo de RV do cabeçalho do gerador, desapertando os parafusos. Corte as suturas apertadas o LV e RA pistas com cuidado e Destampe o faston. Limpe os pinos de todas as pistas por imersão em etanol e usando gaze seca sucessivamente.
5. Insira corretamente a LV, RV e RA leva o cabeçalho de um gerador de pulso de CRT e aperte os parafusos. Amplie o bolso usando dissecção romba para estar apto para o gerador de novo. Coloque o gerador no bolso e amarrar o gerador para baixo ao assoalho de bolso com uma sutura 2-0/T.
6. Olha o bolso para hemostasia. Feche o bolso e fáscia superficial em camadas usando o 2-0/T suturas. Em seguida, feche a pele com suturas-0.
7. Programa o pacemaker, um modo DDD com atraso de atrioventricular (AV) definido como um valor de 70 ms e interventricular atraso (VV) de 0 ms. examinar o animal frequentemente até a recuperação da anestesia. Injete 800.000 U de penicilina por via intramuscular a cada 12 h por 1 semana.
8. Após 8 semanas de desempenho CRT, execute novamente a Ecocardiografia transtorácica em animais de todos os grupos (como na etapa 1.4).

7. sacrificar animais e análise histológica

1. Proteger os membros do animal para a mesa de operação sob anestesia geral. Injete 100 mg/kg de pentobarbital intravenosa para executar o sacrifício de animais. Certifique-se de morte de animais por ausência de batimentos cardíacos e o movimento de respiração.
2. Faça uma incisão na pele da região cervical esquerda. Com uma combinação de dissecação romba e afiada, livre o gerador e os contatos. Desconecte todas as pistas do gerador, desapertando os parafusos.
3. Livre os fios do tecido subcutâneo gradualmente e rastreá-los até o ponto de entrada venosa. Identificar as mangas de sutura e cortar todas as suturas de retenção. Retrai a hélice de fixação ativa do chumbo RV para facilitar a remoção.
4. Fazer uma incisão transversa no quarto espaço intercostal da linha esternal à linha médio-clavicular esquerda. Livre o chumbo LV da fáscia precordial, ao longo do túnel subcutâneo, até a região cervical esquerda, com uma pinça reta.
5. Após a dissecção romba da musculatura torácica, abra a cavidade pleural esquerda. Coloque um retractor de costela no espaço intercostal. Abra completamente o pericárdio.
6. Corte a sutura sobre o eletrodo de chumbo LV epicárdico. Separe o elétrodo do coração cortando um pequeno pedaço de tecido do miocárdio quebra automática em torno do eletrodo.
7. Abri as cavidades direitas junto com o septo. Separe os eléctrodos RA e RV do miocárdio usando dissecação afiada e contundente. Geralmente as pontas de eletrodo são encapsuladas por tecidos fibrosos e miocárdico. Corte os tecidos circunvizinhos do coração se necessário.
8. Passe um estilete reto até a ponta de cada fio condutor através do pino terminal. Extrair os contatos de RV e RA a entrada venosa e remover o chumbo de LV do túnel subcutâneo. Se os condutores não livrou-se devido a aderências fibrosas, retirar as aderências fibrosas ao longo os contatos com dissecção romba.
9. Puxe delicadamente o coração e clip através do tecido do coração perto da aorta para o coração do imposto especial de consumo. Coloque o coração em uma tigela esterilizada e enxágue várias vezes com soro fisiológico. Fatie o miocárdio transmural da parede lateral LV para análise histológica.
10. Reparar tecidos miocárdico com formalina tamponada, em seguida, desidratar e incorporar em parafina. Após o corte em seções grossas de 5 µm, deparaffinize as amostras e mancha com hematoxilina e eosina (HE) e Masson tricromo.
11. Medir os diâmetros celulares de secções longitudinais manchados com. Express CVF como porcentagem de área manchada de colágeno, dividida pela área total do tecido nas seções manchadas de corante tricromo de Masson. Selecione e conta com cinco campos de alta potência (400 x) aleatoriamente para cada seção. Tirar fotografias digitais e analisar usando um sistema de análise de imagem digital de alta resolução.

Resultados

Ablação do LBB bem sucedido:

A Figura 2 representa uma típica eletrograma de superfície e intracardíaca no decurso de ablação por cateter. A LBP-V medido é 18,8 ±2.8 ms, que era mais curtos que o intervalo de linha de base H-V cerca de 10 ms (28,8 ±2.6 ms, p < 0,01). A duração do QRS prolongada de 59,2 ±6.8 ms para 94,2 ±8.6 ms (p < 0,01) após ablação LBB. A perda do eletrograma...

Discussão

Cardiomiopatia dilatada constitui das principais causas de CHF, que é caracterizada por dilatação ventricular, disfunção sistólica com FEVE reduzida e anormalidades do enchimento diastólico¹¹. Desde mediados por taquicardia crônica HF é uma condição clínica reconhecida, ritmo rápido do átrio ou ventrículo pelo menos 3 a 4 semanas serve como um modelo animal frequentemente usado para induzir CHF¹¹. Alterações hemodinâmicas ocorrem logo que 24h após estimulação rápida, com a ...

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Sistema de cateter iv fechado (0,9mm&vezes; 25mm)	Becton Dickinson Medical	5264442	Usado como agulha de retenção venosa
Pentobarbital de sódio	Sigma-Aldrich Company	130205	Para anestesia
Pet clipper	Wuhan Shernbao pet supplies Co., Ltd.	PGC-660	para o cabelo que raspa
o instrumento eletrônico médico fotoelétrico Co. de Shanghai	eletrocardiógrafo	ECG-6511	Para gravação de eletrocardiograma
Ecocardiógrafo	GE-Vingmed Ultrasound Company	VIVID E9	Para avaliação ecocardiográfica
Software	EchoPAC GE healthcare	Version201	Análise offline
Laringoscópio	Shanghai Medical Instrument Co., Ltd		Intubação orotraqueal
Tubo endotraqueal	SIMS Portex Inc, Reino Unido	274093	Intubação orotraqueal
Respirador ciclado de volume	Newport Corporation	C100	Ventilação artificial
HeartStart XL Desfibrilador/Monitor	Philips Medical Systems	M4735A	Monitor de eletrocardiograma durante a operação
Tintura de brometo de benzalcônio	Shanghai Yunjia Pharmaceutical Co., Ltd.	H31022694	Usado para desinfecção da pele
Retrator de costela	Shanghai Medical Instrument Co., Ltd.		Para toracotomia
4-0 sutura	Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., LTD.	24L1005	Sutura do eletrodo epicárdico LV
2-0 / T sutura	Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., LTD.	11M0505	Sutura de eletrodos de estimulação, fáscia, vasos, etc.
0-sutura	Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., LTD.	11P0501	Sutura da pele
penicilina em pó	North China Pharmaceutical Co., Ltd.
Máquina de raios-X DSA	Philips	Allura Xper FD10	Raio-X para fluoroscopia
Eletrodo de estimulação LV	Medtronic, Inc.	LBT 4965
Eletrodo de estimulação RV	St. Jude Medical	Tendril 1888
Eletrodo de estimulação RA	St. Jude Medical	IsoFlex 1642T
Gerador de pulso de marcapasso	Medtronic, Inc.	Enpulse E2DR01	Para estimulação rápida RV
Gerador de pulso CRT	. Jude Medical	Anthem PM 3212	Para desempenho CRT
Gravador eletrofisiológico multicanal	GE Medical Systems	2003232-004	Para eletrograma de superfície e intracardíaco
Módulo de entrada de cateter	GE Medical Systems	301-00202-08	Interruptores de vários pólos para estimulação ou gravação
Gerador de radiofrequência	Johnson-Johnson Company	ST-4460	Para fornecimento de corrente de RF
Eletrodo de retorno sem fio	Covidien	E7509	Para formação de circuito de corrente
Bainha Cordis 6-Fr	Johnson-Johnson Company	504-606X	Acesso para cateter de mapeamento
Bainha Cordis 7-Fr	Johnson-Johnson Company	504-607X	Acesso para cateter de mapeamento e ablação
Cateter quadripolar de 6 Fr	Cateter de mapeamento	F6QRA005RT da Johnson-Johnson Company
Cateter de ablação orientável de 7 Fr com ponta de 4 mm	St. Jude Medical	402823	Cateter de mapeamento e ablação
Prucka Cardio-Lab® 2000	GE Medical Systems	6.9.00.000	Pacote de software para registro de eletrogramas
Heparina	Haitong Pharmaceutical Co., Ltd	160505	Anticoagulante durante a ablação por cateter
Sistema de análise de imagem digital	Leica Microsystems	Qwin V3	Para análise histológica