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Artigo de método

Medições de esfíncter uretral Cystometric e externo em ratos acordados com cateter implantado e eletrodos permitindo medições repetidas

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DOI:

10.3791/56506

30 de janeiro de 2018

Neste artigo

Resumo

Este protocolo descreve primeiramente o procedimento cirúrgico da implantação permanente de um cateter de bexiga urinária combinado com eletrodos de esfíncter uretral externo e segundo, a medição da função da bexiga urinária e externo uretral sphincter em animais acordados implantados.

Resumo

Função do trato urinário inferior é avaliada principalmente por meio da análise de função da bexiga cystometric em roedores. Cystometries convencionais geralmente são executadas como terminal análise sob anestesia de uretano. É sabido que drogas anestésicas podem influenciar a função da bexiga. Portanto, o objetivo desta técnica é realizar medições de cystometric da bexiga e do esfíncter uretral externo em ratos acordados levemente comedidos. Para este fim, um cateter na bexiga é implantado para a cúpula da bexiga. Posteriormente, dois eletrodos são implantados bilateral para o esfíncter uretral externo e um eléctrodo de terra é suturado para um músculo esquelético não-responsivos. O cateter da bexiga e os três eletrodos são finalmente um túnel subcutâneo para a região do pescoço e apostos em um chicote de fios. Com esta técnica, o trato urinário inferior pode ser medido em vários pontos de tempo no mesmo animal para avaliar a função do trato urinário inferior. A principal aplicação desta técnica é o seguimento de simultânea da bexiga urinária e a função do esfíncter uretral externo em ratos saudáveis acordados e após a indução de uma doença ou lesão. Além disso, o posterior acompanhamento de trato urinário inferior pode ser realizada durante a avaliação da doença/lesão e para monitorar a eficácia do tratamento.

Introdução

Para análise de armazenamento urinário e função e disfunção da micção, a maioria dos estudos utilizaram-se modelos de roedores. Através da ativação sequencial de reflexos, micção é produzida. A coordenação destes reflexos é essencial para anulação eficiente1. Técnicas de gravação Cystometric fornecem ferramentas valiosas para analisar a função da bexiga urinária sob seu controle neural1.

Cystometries mais convencionais em ratos são feitas como uma análise única e final em anestesia, principalmente uretano2e concentrar-se exclusivamente na bexiga urinária. No entanto, em....

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Protocolo

Todos os procedimentos descritos aqui foram aprovados pelo Comitê de ética governamental austríaco para pesquisas com animais (Bundesministerium für Wissenschaft, pesquisa und Wirtschaft, WF / V /3b) e estavam em conformidade com a associação de avaliação de laboratório Animais cuidados diretrizes para uso de animais. Ratos usados para esta abordagem foram ratos Lewis de sexo femininos, 12 semanas de idade. Use instrumentos esterilizados em todo o protocolo.

1. material preparação

  1. Fabricação do cateter
    1. Corte o cateter (polietileno tubos PE-50) de comprimento adequado (20 a 25 cm) para ajustar o tamanho ....

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Resultados

Um esquema mostrando o processo de cystometric acordado medições é apresentado na Figura 1 e a anatomia interna para implantação do cateter da bexiga é mostrada na Figura 2. Cirurgia leva aproximadamente 2 h. analgesia pós-operatória de antibióticos, conforme descrito no protocolo, dor e infecções durante cinco dias após a cirurgia. Não há sinais de dor foram notados posteriormente. Duas vezes por dia inspeção cuidadosa do abdôme.......

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Discussão

Este protocolo descreve o procedimento cirúrgico de um cateter permanente e implantação de eléctrodos do esfíncter uretral e a cystometric técnica de gravação em ratos acordados, levemente comedidos, incluindo tanto a análise simultânea da bexiga urinária e esfíncter uretral externo.

Passos críticos durante a cirurgia são a implantação do cuidado do cateter da bexiga, evitando fugas e extensiva manipulação. Além disso, uma implantação precisa dos eletrodos bilaterais para o esfíncter uretral e.......

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Divulgações

Os autores não têm nada para divulgar.

Agradecimentos

Os autores não têm qualquer reconhecimentos.

....

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Tubo de polietileno PE 50Becton Dickinson427411Cateter
Prolene 6-0 (BV-1, 9,3 mm, 3/8c)EthiconEH7403HSutura
Fio de aço revestido de teflonFio CoonerAS631Material do eletrodo
Fio de prata 0,250 mmWorld Precision InstrumentsAGW1030Material do eletrodo
Rotilabo - Tubo de PVCCarl Roth97241Chicote
Vicryl rapide 4-0 (P-3, 13 mm, 3/8c)EthiconV4940HSutura
Conexão Rápida ChicoteSAI Infusion TechnologiesQCH-23CWChili
Tec 17894Solda
eletrodo Fio de solda Pb60 Sn40StannolLD0029Fluxo de solda
eletrodo agente 157Castolin Eutectin157 0150Solda de eletrodo
Conn Cabeçalho não envolto HDR 3 POS, 2,54 mm Solda ST Thru-Hole BoxPreci-dip801-87-050-10-001101Solda de eletrodo
Conn Socket Strip SKT 50 POS 2,54 mm, Solda ST Thru-Hole BoxPreci-dip890-18-003-10-001101Solda de eletrodo
Pacote de Cistometria de Rato (contém bomba, balança, transdutor de pressão, hardware para análise cistométrica)Catamount Research and Development Inc.CAT-CYT-R
Amplificador diferencial com headstage ativoInstrumentos ADDP-311Amplificador EMG
Limitador Tamanho médio para ratos 200-300 gemka TechnologiesHLD-RM
Uro Dyn SoftwareZü rico embaseados em MTA
(Strain Lewis) 12 semanas de idadeCharles River, Sulzfeld, Alemanhaanimais
de fios único dede ratos fêmeas da Universidade

Referências

  1. Andersson, K. E., Soler, R., Fullhase, C. Rodent models for urodynamic investigation. Neurourol Urodyn. 30, 636-646 (2011).
  2. Schneider, M. P., et al. A novel urodynamic model for lower urinary tract assessment in awake rats. BJU Int. 115, Suppl 6. 8-15 (2015).
  3. ....

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Reimpressões e permissões

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