A avaliação do desenvolvimento do tecido no calo de fratura durante a cicatrização de osso endocondral é essencial para monitorar o processo de cicatrização. Aqui, nós relatamos o uso de uma ressonância magnética (MRI)-fixador externo compatível para o fêmur do mouse para permitir MRI varreduras durante a regeneração óssea em ratos.
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Artigo de método
Na Vivo Avaliação do desenvolvimento de calo de fratura durante a consolidação óssea em ratos usando um dispositivo de osteossíntese compatível com MRI para o fêmur de Mouse
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Neste artigo
Resumo
Resumo
Endocondral fratura cura é um processo complexo que envolve o desenvolvimento de tecido fibroso, cartilaginoso e ósseo no calo de fratura. A quantidade de tecidos diferentes em calo ósseo fornece informações importantes sobre a fratura cura progresso. Disponível na vivo técnicas para monitorar longitudinalmente o desenvolvimento de tecido de calo em estudos pré-clínicos consolidação da fratura, utilizando pequenos animais incluem radiografia digital e imagem latente de µCT. No entanto, ambas as técnicas só são capazes de distinguir entre o tecido mineralizado e não-mineralizado. Por conseguinte, é impossível discriminar cartilagem de tecido fibroso. Em contraste, ressonância magnética (MRI) visualiza estruturas anatômicas com base no seu teor de água e, portanto, pode ser capaz de identificar canaliza o tecido mole e cartilagem no calo de fratura. Aqui, nós relatamos o uso do fixador externo compatível com o MRI para o fêmur do mouse para permitir ressonâncias durante a regeneração óssea em ratos. Os experimentos demonstraram que o fixador externo e um dispositivo de fixação feito por permitam ressonâncias repetitivas, possibilitando assim a análise longitudinal do desenvolvimento do tecido de calo de fratura.
Introdução
Consolidação da fratura secundária é a forma mais comum de consolidação óssea. É um processo complexo, imitando a aspectos específicos da32,1,do ossificação endocondral ontogenic. O hematoma de fratura precoce consiste predominantemente de células do sistema imunológico, granulação e tecido fibroso. Tensão de oxigênio de baixa e altas tensões biomecânicas dificultam a diferenciação osteoblástica na gap da fratura, mas promovem a diferenciação de células progenitoras em condrócitos4,5,6
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Protocolo
animal todos os experimentos cumprimento de regulamentos internacionais para o cuidado e o uso de animais de laboratório e foram aprovados pelas autoridades reguladoras regionais (n. º 1250, Regierungspräsidium Tübingen, Alemanha). Todos os ratos foram mantidos em grupos de dois a cinco animais por gaiola a luz 14-h, 10 h a escuro ritmo circadiano com água e alimentos fornecidos ad libitum.
1. preparação do Material cirúrgico e pré-tratamento dos ratos
- esterilize tudo cirúrgico material. Use uma temperatura de autoclave de 120-135 ° C por 20-30 min do tempo de esterilização.
- Compra C57BL/6 ratos ou camundongos....
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Resultados
Em primeiro lugar, o sucesso do procedimento cirúrgico pode ser confirmado pela análise das varreduras de MRI (ver exemplo na Figura 2). Todos os quatro pinos deverá situar-se no meio da diáfise femoral. O tamanho da lacuna a osteotomia deve ser entre 0.3-0.5 mm. Se o tamanho da lacuna osteotomia varia muito desses valores, o mouse deve ser excluído uma análise mais aprofundada.
Em segundo lugar, a .......
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Discussão
Modificações e solução de problemas:
O principal objetivo deste estudo foi descrever um protocolo para o uso de fixador externo compatível com o MRI para osteotomia do fêmur no mouse com a capacidade de monitorar o desenvolvimento de tecido calo longitudinalmente durante o processo de consolidação da fratura endocondral. O projeto de um dispositivo de montagem sob medida para a inserção do fixador externo assegurado uma posição padronizada durante as varreduras repetidas. Segm.......
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Divulgações
O autor Romano Matthys é um empregado da RISystem AG Davos, Suíça, que produz os implantes e instrumentos específicos utilizados neste artigo do implante. Todos os outros autores têm sem interesses financeiros concorrentes.
Agradecimentos
Agradecemos Sevil Essig, Stefanie Schroth, Verena Fischer, Katja Prystaz, Yvonne Hägele e Anne Subgang excelente suporte técnico. Agradecemos também a Fundação de pesquisa alemã (CRC1149, INST40/499-1) e a Alemanha AO Trauma Foundation para financiamento deste estudo.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Tubo de anestesia | FMI, Seeheim, Alemanha | ZUA-82-ANA-TUB-Máquina de anestesia para ratos | |
| FMI, Seeheim, Alemanha | ZUA-82-GME-MA | ||
| Fórceps de artéria | Aesculap, Tuttlingen, Alemanha | BH104R | |
| Autoclave | Systec, Wettenberg, Alemanha | DX-150 | |
| Embalagem em autoclave | Stericlin, Feuchtwangen, Alemanha | 2301-04/06/10/12/16 | |
| Avizo software | FEI, Burlington, EUA-Versão | 8.0.1 | |
| BioSpec 117/16 sistema de ressonância magnética | Bruker Biospin, Ettlingen, Alemanha | 117/16 | |
| Aesculap, Tuttlingen, Alemanha | BH 021R | ||
| Bisturi de aço carbono nº 11/15 | Aesculap, Tuttlingen, Alemanha | BA211/215 | |
| Pino de montagem de cerâmica 0,45 mm | RISystem, Davos, Suíça | HS691490 | |
| Clindamicina (300 mg / 2ml) | Ratiopharm, Ulm, | Alemanha-Pinça | |
| de curativo 115 mm | Aesculap, Tuttlingen, Alemanha | BD210R | |
| 130 mm | Aesculap, Tuttlingen, Alemanha | Broca revestida com BD025R | |
| 0,45 mm | RISystem, Davos, Suíça | HS820420 | |
| Porta-agulhas Durogrip 125 mm | Aesculap, Tuttlingen, Alemanha | BM024R | |
| Foliodrape | Hartmann, Heidenheim, Alemanha | 2513026 | |
| Frekaderm | Fresenius, Bad Homburg, Alemanha | 4928211 | |
| Gigli viu 0,44 mm | RISystem, Davos, Suíça | RIS.590.110.25 | |
| Furadeira manual | RISystem, Davos, Suíça | RIS.390.130-01 | |
| Placa de aquecimento | FMI, Seeheim, Alemanha | Luvas IOW-3704 | |
| Hygonorm | Hygi, Telgte, Alemanha | 2706 | |
| Isoflurano | Abbot, Londres, Reino Unido | Forene | |
| Micro fórceps 155 mm | Aesculap, Tuttlingen, Alemanha | BD343R | |
| Micro tesoura 120 mm | Aesculap, Tuttlingen, Alemanha | FD013R | |
| Mouse FixEx L 0.7 mm | RISystem, Davos, Suíça | RIS.611.300-10 | |
| Estojo de agulhas para brocas | Aesculap, Tuttlingen, Alemanha | BL911R | |
| Porta-agulhas | Aesculap, Tuttlingen, Alemanha | BB078R | |
| Octenisept | Schü lke, Norderstedt, Alemanha | 121403 | |
| software Osirix | Pixmeo SARL, Bernex, | Suíça-Versão 4.0 | |
| Oxigênio, grau médico | MTI, Ulm, Alemanha-Resolon | ||
| 5/0 | Resorba, Nü rnberg, Alemanha | 88143 | |
| Solução salina 0.9% | Braun, Melsungen, Alemanha | 3570350 | |
| Cabo de bisturi 125 mm | Aesculap, Tuttlingen, Alemanha | BB073R | |
| Tesoura 150 mm | Aesculap, Tuttlingen, Alemanha | BC006R | |
| Seladora para embalagem em autoclave | Hawo GmbH, Obrigheim, Alemanha | HM500 | |
| Sterican 27 G | Braun, Melsungen, Alemanha | 4657705 | |
| Lâminas cirúrgicas estéreis nº 11/15 | Aesculap, Tuttlingen, Alemanha | BB511/515 | |
| Luvas cirúrgicas | Hartmann, Heidenheim, Alemanha | Peha-micron 9425712 | |
| Luz cirúrgica | Maquet SA, Ardon, França | Linha azul 80 | |
| Seringas 5 ml | Braun, Melsungen, Alemanha | Pinça de tecido Injekt 4606051V | |
| 80 mm | Aesculap, Tuttlingen, Alemanha | OC091R | |
| Tramadol 25 mg/l | Grü nenthal, Aachen, Alemanha | 100mg/ml | |
| Vasofix Safety | Braun, Melsungen, Alemanha | 4268113S-01 | |
| Vicryl 5-0 | Ethicon, Norderstedt, Alemanha | V30371 | |
| Pomada para os olhos visdisica | Bausch & Lomb, Berlim, Alemanha | 3099559 |
Referências
- Claes, L., Recknagel, S., Ignatius, A. Fracture healing under healthy and inflammatory conditions. Nat Rev Rheumatol. 8 (3), 133-143 (2012).
- Einhorn, T. A. The cell and molecular biology of fracture healing. Clin Orthop Relat Res. (355), Suppl S7-S21 (1998).
- Einhorn, T. A....
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Reimpressões e permissões
