Um otimizado Evans Blue protocolo para avaliar vazamento Vascular no Mouse

Marilee J. Wick; Julie W. Harral; Zoe L. Loomis; Edward C. Dempsey

doi:10.3791/57037

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Artigo de método

Um otimizado Evans Blue protocolo para avaliar vazamento Vascular no Mouse

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DOI:

10.3791/57037

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12 de setembro de 2018

Marilee J. Wick¹^,² , Julie W. Harral¹^,² , Zoe L. Loomis¹^,² , Edward C. Dempsey¹^,²^,³

¹Cardiovascular Pulmonary Research Laboratory, University of Colorado Denver, ²Division of Pulmonary Sciences and Critical Care Medicine, University of Colorado Denver, ³Denver VA Medical Center

Neste artigo

Resumo

Neste artigo, um protocolo simples, econômico e otimizado é descrito que usa o método de corante azul de Evans para avaliar o extravasamento de plasma nos órgãos de ratos FVBN que pode ser adaptada para uso em outras cepas, espécies e outros órgãos ou tecidos.

Resumo

Vazamento vascular ou extravasamento de plasma, tem um número de causas e pode ser uma grave consequência ou sintoma de uma resposta inflamatória. Neste estudo, finalmente, pode levar a novos conhecimentos sobre as causas ou novas formas de inibir ou tratar o extravasamento de plasma. É importante que os pesquisadores tenham as ferramentas apropriadas, incluindo os melhores métodos disponíveis, para estudar o extravasamento de plasma. Neste artigo, descrevemos um protocolo, usando o método do corante azul de Evans, para avaliar o extravasamento de plasma nos órgãos de ratos FVBN. Este protocolo é intencionalmente simples, para tão grande um grau possível, mas fornece dados de alta qualidade. Corante de azul de Evans foi escolhido principalmente porque é fácil para o laboratório de médio a usar. Usamos este protocolo para fornecer provas e suporte para a hipótese de que a enzima neprilysin que proteja a vasculatura contra extravasamento de plasma. No entanto, este protocolo pode ser usado experimentalmente e facilmente adaptado para uso em outras cepas de ratos ou em outras espécies, em muitos diferentes órgãos ou tecidos, para estudos, que pode envolver outros fatores que são importantes para a compreensão, prevenção ou tratamento de extravasamento de plasma. Este protocolo foi extensivamente otimizado e modificado de protocolos existentes e combina confiabilidade, facilidade de uso, economia e disponibilidade geral de materiais e equipamentos, fazendo com que este protocolo superior pelo laboratório média para uso em quantificando o extravasamento de plasma de órgãos.

Introdução

Vazamento vascular nos órgãos refere-se ao extravasamento, ou vazamento de plasma sanguíneo através de aberturas produzido no endotélio de pós capilares vênulas nos órgãos. Este extravasamento de plasma ou aumento da permeabilidade vascular, que pode decorrer de algum tipo de reacção inflamatória, pode ter graves consequências. Assim, é importante que este fenômeno, suas causas, moduladores e consequências, são estudadas e entendidas, e da mesma forma, que os investigadores têm boas ferramentas e protocolos com os quais a estudá-los. As lacunas endoteliais podem ser produzidas através de uma série de estímulos, mas geralmente são produzidas pela ação de neurotransmiss....