Este manuscrito descreve o romance de configuração e funcionamento interno de um fotoacústico microscopia e sistema de dual-modalidade de tomografia computadorizada de coerência óptica para a imagem latente de choriorétiniennes não-invasivo, livre de rótulo de animais maiores, tais como coelhos.
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Artigo de método
Novela fotoacústico microscopia e tomografia de coerência óptica Imaging Dual-modalidade choriorétiniennes nos olhos de coelho vivo
Neste artigo
Resumo
Resumo
Imagem de ocular fotoacústico é um emergente oftálmica tecnologia que canaliza pode visualizar o tecido ocular, convertendo energia luminosa em ondas sonoras e está atualmente sob investigação intensiva de imagem. No entanto, a maioria relatou que trabalho até à data é focado sobre a imagem do segmento posterior dos olhos de pequenos animais, como ratos e camundongos, o que coloca desafios clínico tradução humana devido a tamanhos pequeno globo ocular. Este manuscrito descreve um romance fotoacústico microscopia (PAM) e o sistema de dual-modalidade de tomografia computadorizada (OCT) de coerência óptica para a imagem latente de segmento posterior dos olhos de animais maiores, tais como coelhos. A configuração do sistema, alinhamento de sistema, preparação de animais e dual-modalidade protocolos experimentais para vivo em, não invasivo, livre de rótulo choriorétiniennes imagem em coelhos são detalhados. A eficácia do método é demonstrada através de resultados experimentais representativos, incluindo a vasculatura da retina e da coroide, obtida pelo OCT e PAM. Este manuscrito fornece um guia prático para reproduzir os resultados de imagem em coelhos e avançando fotoacústico imagem ocular em animais maiores.
Introdução
Últimas décadas têm testemunhado o desenvolvimento explosivo do campo da biomédica fotoacústico imagem1,2,3,4,5,6,7 ,8. Baseia-se a conversão de energia da luz, em som, a imagem de fotoacústico emergentes pode Visualizar amostras biológicas em escalas de organelas, células, tecidos e órgãos para pequenos animais de corpo inteiro e pode revelar sua anatômica, funcional, molecular, genética, e informações....
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Protocolo
Os coelhos são que um departamento de agricultura dos Estados Unidos (USDA) coberto de espécies. Sua utilização na investigação biomédica precisa de seguir rigorosamente. Todos os experimentos de coelho foram realizados em conformidade com a instrução de ARVO (Associação para pesquisa em visão e Oftalmologia) para o uso de animais em oftalmologia e Vision Research, após a aprovação do protocolo de animais de laboratório pela Universidade Comité sobre utilização e cuidados a animais (UCUCA) da Universidade de Michigan (protocolo PRO00006486, PI Yannis Paulus).
1. configuração do sistema
- Fotoacústico microscopia (PAM)
- Uso do....
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Resultados
O sistema de duplo-modalidade de imagem e protocolo experimental foram testados com sucesso em laboratório dos autores usando quatro coelhos Nova Zelândia branco. A seguir apresenta alguns resultados representativos.
A Figura 1 mostra o diagrama esquemático do PAM e SD-OCT dual-modalidade de imagem sistema. Ele é composto dos seguintes módulos: fotoacústico luz fonte, atenuador variável do laser, co.......
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Discussão
Um filme de lágrima intacta e regular é essencial para imagens de alta qualidade do fundo. Filmes um desgaste irregular e se deteriorou significativamente podem degradar a imagem qualidade42. Para preservar a integridade do filme lacrimal e evitar corneal superficial punctate bulhosa, é essencial para lubrificar a córnea usando colírio muito frequentemente, aproximadamente a cada 2 min. Se houver qualquer preocupação em relação a opacidade do olho, use uma lâmpada de fenda e fluoresceína tiras par.......
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Divulgações
Os autores não têm nada para divulgar.
Agradecimentos
Este trabalho foi financiado com o apoio generoso de 4K12EY022299 o National Eye Institute (YMP), luta para a GIA16002 do FFS de fundação pesquisa de Retinal visão-International (YMP), irrestrito apoio departamental da investigação para evitar cegueira e o Universidade de Michigan no departamento de Oftalmologia e Ciências visuais. Este trabalho utilizou o núcleo centro para visão investigação financiada pela P30 EY007003 do Instituto Nacional do olho.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Sistema de imagem de dupla modalidade | |||
| OPO laser | Ekspla (Vilnius, Lituânia) | NT-242 | |
| Atenuador de feixe | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, EUA) | AHWP10M-600 | |
| Platina de rotação motorizada | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, EUA) | PRM1/MZ8 | |
| Controlador | de platina de rotação motorizadaThorlabs, Inc. (Newton, NJ, EUA) | TDC001 | |
| Lente de focagem | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, EUA) | AC254-250-B | |
| Pinhole | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, EUA) | P50S | |
| Lente de colimação | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, EUA) | AC127-030-B | |
| Fotodiodo | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, EUA) | PDA36A | |
| Obturador a laser | Vincent Associates Inc. (Toronto, Canadá) | LS6S2T0 | |
| Driver de obturador a laser | Vincent Associates Inc. (Toronto, Canadá) | VCM-D1 | |
| Espelho dicróico | Semrock, Inc. (Rochester, NY, EUA) | Di03-R785-t3-25× 36 | |
| Lente de varredura | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, EUA) | OCT-LK3-BB | |
| Lente oftálmica | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, EUA) | AC080-010-B-ML | |
| Transdutor ultrassônico | Optosonic Inc. (Arcadia, CA, EUA) | Amplificador personalizado | |
| L3 Narda-MITEQ (Hauppauge, NY, EUA) | AU-1647 | ||
| passa-banda | (Brooklyn, NY, EUA) | BLP-30+ | |
| Digitizer | DynamicSignals LLC (Lockport, IL, EUA) | PX1500-4 | |
| Eletrônica de sincronização | National Instruments Corporation (Austin, TX, EUA) | USB-6353 | |
| Módulo OCT | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, EUA) | Ganimedes-II-HR | |
| Vidro de compensação de dispersão | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, EUA) | LSM03DC | |
| Iluminação Luz LED | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, EUA) | MCWHF2 | |
| Medidor de energia | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, EUA) | S121C | |
| Interface do medidor de energia | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, EUA) | PM100USB | |
| Ferramenta de medição de altura | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, EUA) | BHM1 | |
| Câmera de fundo | de olho Topcon Corporation (Tóquio, Japão) | TRC 50EX | |
| Matlab | MathWorks (Natick, MA, EUA) | 2017a | |
| Osciloscópio | Teledyne LeCroy (Chestnut Ridge, NY, EUA) | WaveJet 354T | |
| Experimento com animais | |||
| Manta circulante de água | Stryker Corporation (Kalamazoo, MI, EUA) | Cloridrato de cetamina TP-700 | |
| injeção | Par pharmaceutical, Inc. (Woodcliff Lake, NJ, EUA) | Código NDC 42023-115-10 | |
| Cloridrato de xilazina | VetOne (Boise, ID, EUA) | Código NDC 13985-704-10 | |
| Tropicamida oftálmica | Akorn Pharmaceuticals Inc. (Lake Forest, IL, EUA) | Código NDC 17478-102-12 | |
| Cloridrato de fenilefrina oftálmico | Paragon BioTeck, Inc. (Portland, OR, EUA) | Código NDC 42702-102-15 | |
| Lubrificante ocular | Hub Pharmaceuticals LLC (Rancho Cucamonga, CA, EUA) | Código NDC 17238-610-15 | |
| Lava-olhos | Altaire Pharmaceuticals, Inc. (Aquebogue, NY, EUA) | Código NDC 59390-175-18 | |
| Solução oftálmica de cloridrato de tetracaína | Bausch & Lomb, Inc. (Rochester, NY, EUA) | Código NDC 24208-920-64 | |
| Solução oftálmica sódica de flurbiprofeno | Bausch & Lomb, Inc. (Rochester, NY, EUA) | Código NDC 24208-314-25 | |
| Sulfatos de Neomicina e Polimixina B e Pomada Oftálmica de Dexametasona | Bausch & Lomb, Inc. (Rochester, NY, EUA) | Código NDC 24208-795-35 | |
| Injeção de meloxicam | Henry Schein Inc. (Queens, NY, EUA) | Código NDC 11695-6925-1 |
Referências
- Wang, L. V., Hu, S. Photoacoustic tomography: in vivo imaging from organelles to organs. Science. 335 (6075), 1458-1462 (2012).
- Beard, P. Biomedical photoacoustic imaging. Interface Focus. , rsfs20110028 (2011).
- Taruttis, A., Ntziachristos, V.
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Reimpressões e permissões
