Method Article

Um rato do modelo de fadiga Central usando um modificado método de plataforma múltipla

DOI:

10.3791/57362

August 14th, 2018

In This Article

Summary

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Aqui, apresentamos um protocolo para apresentar um modelo do rato de fadiga central usando o modificado método de plataforma múltipla (MMPM).

Abstract

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Neste artigo, apresentamos um modelo do rato de fadiga central usando o modificado método de plataforma múltipla (MMPM). A caixa de plataforma múltipla foi concebida como um tanque de água com plataformas estreitas na parte inferior. Os ratos do modelo foram colocados no tanque e ficou nas plataformas para 14 h (18:00-08:00) por dia por 21 dias consecutivos, com um grupo de controle em branco para contraste. No final da modelagem, ratos no grupo modelo mostraram uma aparência cansada óbvia. Para avaliar o modelo, realizamos vários testes comportamentais, incluindo o campo aberto (OFT), teste da elevada além de labirinto (EPM) e o teste de natação exaustiva (ES). Os resultados mostraram que essa ansiedade, comprometimento da cognição espacial, desempenho pobre do músculo e recusada atividade voluntária apresentado em ratos modelo confirmam o diagnóstico da fadiga central. Alterações de neurotransmissores a central também verificado o resultado. Em conclusão, o modelo simulado com êxito a fadiga central, e estudos futuros com o modelo podem ajudar a revelar o mecanismo patológico da doença.

Introduction

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A fadiga é um dos principais fatores que ameaçam a saúde humana1. Nas últimas décadas, várias pesquisas provaram que fadiga é acionada por perifericamente mas centralmente orientada e sempre acompanhado com distúrbios emocionais e cognitivos. Fisiologista italiano Mosso r. proposto pela primeira vez a palavra fadiga Central2. Geralmente é definida como a actividade voluntária limitada e comprometimento da cognição devido à disfunção da transmissão do impulso no sistema nervoso central (SNC)3. Comparado com fadiga muscular periférica, fadiga central enfatiza alterações no SNC, bem como as consequen....

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Protocol

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Todos os animais foram mantidos em conformidade com as diretrizes da legislação chinesa sobre o uso ético e cuidar de animais de laboratório.

1. pré-modelagem preparação

  1. Preparação do laboratório
    1. Execute a lâmpada de UV durante pelo menos 30 min antes do experimento.
    2. Controle a temperatura do laboratório a 25 ± 3 ° C e umidade relativa em torno de 30%.
    3. Ligue o laboratório luz às 06:00 e desligar às 18:00 para estabelecer um ciclo claro/escuro de 12 h/12 h.
  2. Construção de caixa de plataforma múltipla
    1. Construa um depósito de plástico ....

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Results

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Descrevemos um modelo do rato de fadiga central usando MMPM. 24 ratos Wistar são aleatoriamente divididos em grupo controle e o grupo modelo, com 12 ratos em cada grupo. O aparelho modelo é projetado como um tanque de água com plataformas estreitas na parte inferior (Figura 1). Ratos do modelo fique nas plataformas para 14 h por dia, incluindo o tempo de sono parcial, durante 21 dias (Figura 2).

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Discussion

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O MMPM é projetado originalmente por privação de sono9. Ratos são lançados em um tanque de água com plataformas fixadas na parte inferior. Impulsionado pelo medo instintivo de água, ratos permanecem em pé nas plataformas e ocorre sem dormir. O estudo mostra que diferentes horas de privação de sono levam a várias alterações no comportamento do rato e humor, incluindo reconhecimento de imparidade10en11e fadiga central. Alguns pesquisadores provam que p.......

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Disclosures

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Os autores não têm nada para divulgar.

Acknowledgements

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Este trabalho foi financiado pela Fundação de ciência Natural de Beijing (No.7162124) e Xin-ao Fundação para a Universidade de Beijing de medicina chinesa.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Personalização do tanque de água de privação de sono de plataforma múltipla, é fornecida pelo laboratório neuroimunológico da Universidade de Medicina Chinesa de Pequim110cm x 60cm x 40cm. Existem 15 pequenas plataformas de plástico na parte inferior. A pequena plataforma tem 6,5cm de diâmetro e 8cm de altura
Ratos WistarBeijing Weitong Lihua Experimental Animal Technology Companynúmero de licença SYXK (Pequim) 2016-0011Use 32 ratos Wistar machos saudáveis, 8 semanas de idade (200-210 g)
Cromatógrafo líquido de alto desempenho Agilent 1100LC A Agilent  G1379A, G1311A, G1313A, G1316A   G1379A, bomba cromatográfica tipo G1311A, amostrador automático G1313A, caixa de temperatura de coluna G1316A
Detector eletroquímico DECADE II SDC eletrododa empresa holandesa ANTEC, eletrodo de referência Ag/AgCl, estações de trabalho (Clarity CHS)
Balança eletrônica ACS-ZEASDesenvolvimento de tecnologia Phos, Pequim.O peso dos ratos de pesagem pode ser preciso para 0,1g.
caixa de campo aberto, é fornecida pelo laboratório neuroimunológico da Universidade de Medicina Chinesacaixa de madeira de campo aberto  100 cm por 100 cm x 40 cm, parede interna e fundo como cinza. A parte inferior é dividida em 25 quadrados de área igual, cada um com 20 cm x 20 cm, e as 16 grades ao longo da parede externa são as externas e as outras 9 grades são centrais. A câmera é montada acima do canteiro central.
Elevado Plus-mazeBeijing zhongshi dechuang technology development co. LTD.Os braços abertos e fechados da cruz são compostos por 30cm x 5cm x 15cm, e a área central é de 5cm x 5cm, com uma câmera montada acima do centro e 45cm de altura.
balde de natação de ratos.Equipamento de instrumento biológico Zhenhua co., LTD. Anhui, China.O volume do tambor de plástico é de 70 cm x 30 cm x 110 cm, que é usado para nadar em ratos.
TermômetroShiya instrument co., LTD., changzhou, China.Controle a temperatura da água
Bomba de água pequenaXincheng technology co., LTD., chengdu, China.Usado para tanque de água e comportamento de natação.
Software comportamental Ethovition3.0.Nuldus, HolandaAnálise de medição de vídeos de comportamento de ratos.
de carbono vítreo Centrífuga de refrigeração de alta velocidade Biofuge Stratos Instrumento de fraturamento ultrassônico HERAEUS VCX130 SONICS Personalização da de Pequim

References

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ishii, A., Tanaka, M., Yamano, E., Watanabe, Y. The neural substrates of physical fatigue sensation to evaluate ourselves: a magnetoencephalography study. Neuroscience. 261, 60-67 (2014).
  2. Dalsgaard, M. K., Secher, N. H.

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Central Fatigue ModelMultiple Platform MethodRat Model ConstructionOpen Field TestElevated Plus MazeExhaustive Swimming TestNeurotransmitter AnalysisSleep Deprivation ProtocolBehavioral AssessmentWater Tank Setup

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