Analisando a aprendizagem espacial e comportamento pró-social nos ratos usando o labirinto de Barnes e paradigmas de donzela em apuros

Summary

Este protocolo mede aprendizagem espacial e memória usando o labirinto de Barnes. Um novo paradigma de donzela em apuros é usado para avaliar a atividade locomotora e comportamento pró-social em camundongos.

Abstract

O labirinto de Barnes é uma medida confiável de aprendizado espacial e memória que não necessita de restrição alimentar ou a exposição a estímulos extremamente estressantes. O labirinto de Barnes também pode avaliar outros comportamentos do mouse, como motivação geral para escapar da plataforma do labirinto e comportamento exploratório. O labirinto de Barnes pode medir se uma mutação genética ou ambiental variável pode impactar a aquisição e retenção de memória espacial, bem como fornecer informações sobre a estratégia de pesquisa utilizada pelos ratos. Aqui usamos o labirinto Barnes para detectar um défice de memória em ratos adultos após um evento de exposição de etanol no desenvolvimento único. O paradigma de donzela em apuros recém descrito expõe um rato masculino para um rato fêmea preso em uma câmara no campo aberto do centro da arena. Ele fornece uma oportunidade para o rato socialmente responder a fêmea presa e exibem comportamento pró-social. O paradigma de donzela em apuros também pode ser usado para examinar o comportamento do mouse em uma atividade de locomoção novela arena e medida. Tanto o labirinto de Barnes e os protocolos de donzela em perigo exigem investimento financeiro mínimo e quase todos os aspectos dos testes podem ser construídos a partir de fontes comuns de laboratório. Essas ferramentas flexíveis e acessíveis também podem ser usadas para detectar mudanças de comportamento ao longo do desenvolvimento.

Introduction

O propósito do presente protocolo é medir a aprendizagem espacial e memória em camundongos usando o labirinto de Barnes, bem como capacidade de resposta social e locomoção utilizando o paradigma de donzela em perigo. Comumente usado testes de aprendizagem e memória espaciais para roedores incluem o labirinto radial do braço, que mede a capacidade de um mouse para encontrar comida escondida em um braço de um aparelho multi-raiadas, e o labirinto de água Morris, que coloca um rato em uma banheira grande ou poça de água e avalia o tempo que demora para encontrar uma plataforma escondida debaixo d'água. Normalmente, a formação para esses paradigmas abrange vários ensaios ....

Protocol

Todos os métodos descritos aqui foram aprovados pelo cuidado institucional do Animal e uso Comité (IACUC) de Hampden-Sydney College ou Randolph-Macon College (onde alguns trabalho anteriormente foi realizado).

1. básica habitação dos ratos

1. Os ratos em gaiolas de plástico com fundo sólido e os lados e uma camada de roupa de cama macia e aninhamento de material como papel retalhamento da casa. Use o fundamento que é composto de espigas de milho ralado ou aparas de madeira e certifique-se de que o fundamento é alterado regularmente para saneamento.
2. Fornecer acesso a comida e água ad libitum. O topo da gaiola plásti....

Results

O labirinto de Barnes

Para ilustrar como o labirinto de Barnes pode ser usado, investigamos se uma única exposição precoce de etanol causou uma diferença na aprendizagem ao longo do desenvolvimento do mouse. Camundongos C57Bl6/J também foram injetados com uma solução de etanol de 2,5 g/kg (n = 8) ou com solução salina (n = 6) duas vezes, duas horas de diferença, no 6º dia pós-natal. Estamos treinados os.......

Discussion

O labirinto de Barnes e os experimentos de donzela em perigo são formas relativamente fácil, rápidas e baratas para avaliar aprendizagem espacial, atividade locomotora e comportamento pró-social em camundongos. Outras vantagens incluem a ausência de estressores ostensivos, dor ou restrição alimentar para o animal. Como a maioria dos paradigmas de aprendizagem/memória, uma desvantagem do labirinto Barnes é o número de ensaios requeridos pelos animais saber onde se encontra o buraco de alvo e entrar.

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Donzela-em-Perigo
Tubo cônico de 50 mL	Fisher Scientific	14-432-22	Qualquer marca de tubo cônico de 50 mL funcionará
Elásticos	Marca Sprano	n/a	Tamanho 62, usado para manter as tampas presas ao martelo de madeira compensada
	Grainger	6R252	Qualquer martelo padrão funcionará
prego (tamanho 8D)	Grainger	4NFE3	Unhas de tamanho semelhante devem funcionar tão bem
de plástico opaca e sem topo	AcmePlastics	CUT-TO-SIZE-ACRYLIC-CAST-BLACK-SHEET-2025	Plástico opaco, cortado no tamanho (30 cm C x 19 cm L x 3-6 cm A). Pode ser adicionado um degrau para garantir que não haja mais do que uma profundidade de entrada de 3,5 cm para o mouse.
câmera de vídeo (smartphone)	N/A	N/A	Qualquer smartphone equipado com câmera funcionará
luvas resistentes a mordidas	Kent Scientific	GLVDYN02	Qualquer marca que ofereça proteção adequada
folha de transparência	Grampos	954145	Qualquer marca de folha de plástico transparente funcionará, usada para pontuação
Barnes Maze
Petri Placas	Corning	353025	Pintadas com spray e usadas como coberturas para buracos de labirinto Barnes
Contraplacado (3/4 pol.)	LP Building Products	22487	Para construir Barnes maze
Tinta Spray	Krylon	1274937	Usada para pintar tampas de placa de Petri de preto, tinta branca usada para pintar
compensado Gancho de copo (5/8 pol.)	Ace Hardware	5360615	2 usado em ambos os lados das superfícies dos furos ventrais; Elástico envolve ganchos para segurar a tampa plana
Poster Board	Creatology	n/a	Usado nas bordas do labirinto como dicas extras
Lâmpadas	Phillips	n/a	Lâmpada de 100W, usada durante os testes
Elásticos	Marca Sprano	n/a	Tamanho 62, usado para manter as tampas presas ao compensado
Noisemaker ultrassônico	Victor mini PestChaser	M753SN	Usado como aversivo estímulos