Apresentamos um método cirúrgico para induzir hipertrofia ventricular direita e falha em ratos.
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Artigo de método
Um tronco pulmonar bandagem modelo de sobrecarga de pressão induzida por falha e Hipertrofia Ventricular direita
Neste artigo
Resumo
Resumo
Ventrículo direito (RV) falha, que induzido pela sobrecarga de pressão sustentada é dos principais contribuintes para a morbidade e mortalidade em várias doenças cardiopulmonares. Confiáveis e reprodutíveis de modelos animais de falha de RV são garantidos, portanto, a fim de investigar os mecanismos da doença e os efeitos dos potenciais estratégias terapêuticas. Bandagem do tronco pulmonar é um método comum para induzir hipertrofia isolada de RV, mas em geral, modelos descritos anteriormente não conseguiram criar um modelo estável de hipertrofia de RV e falha.
Apresentamos um modelo do rato de pressão sobrecarga induzida RV hipertrofia causada pelo tronco pulmonar bandagem (PTB) que permite que diferentes fenótipos de hipertrofia RV com e sem falha de RV. Nós usamos um modificado ligating aplicador de clips para comprimir um clipe de titânio em torno do tronco pulmonar com um diâmetro interno pré-estabelecidos. Utilizamos diâmetros diferentes clip para induzir diferentes estágios de progressão da doença de leve hipertrofia RV descompensada de RV.
Hipertrofia de RV consistentemente desenvolve em ratos submetidos ao procedimento PTB e dependendo do diâmetro do clipe de bandas aplicado, pode com precisão reproduzimos gravidades diferentes da doença variando de hipertrofia compensada a RV descompensada grave falha com manifestações extra-cardíaca.
O modelo PTB apresentado é um modelo válido e robusto de sobrecarga de pressão induzida por hipertrofia de RV e falha que tem várias vantagens para outros modelos de bandas incluindo alta reprodutibilidade e a possibilidade de induzir a falha de RV grave e descompensada.
Introdução
Ventrículo direito (RV) pode se adaptar a uma sobrecarga de pressão persistente. Em tempo, no entanto, mecanismos adaptativos falharem sustentar o débito cardíaco, dilata o RV e eventualmente falha o RV. Função de RV é o principal fator prognóstico de vários distúrbios cardiopulmonares, incluindo hipertensão arterial pulmonar (HAP), hipertensão pulmonar tromboembólica (CP) e várias formas de cardiopatia congênita com uma sobrecarga de pressão (ou volume) da caravana. Apesar do intenso tratamento, falha de RV continua a ser uma causa predominante de morte nestas condições.
Como consequência as propriedades únicas de1<....
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Protocolo
Todos os ratos foram tratados de acordo com diretrizes nacionais dinamarquês, descritas na lei dinamarquesa em experiências com animais e Portaria Ministerial em experiências com animais. Todos os experimentos foram aprovados pelo Conselho de revisão institucional ética e conduzidos de acordo com a legislação dinamarquesa para pesquisas com animais (número de autorização de 2012-15-2934-00384, Ministério da justiça dinamarquês).
1. ajuste de Ligating aplicador de clips
Nota: A bandagem do tronco pulmonar é realizada com um modificado aberto ligating aplicador de clips com uma mandíbula em ângulo. O....
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Resultados
Usando o procedimento descrito do PTB em estudos anteriores de nosso grupo12,13, induzimos hipertrofia RV (PTB suave) por bandas com um clipe de 1,0 mm, um grau moderado de falha de RV (PTB moderado) por bandas com um clipe de 0,6 mm e um grau severo de falha de RV (PTB grave) por bandas com um clipe de 0,5 mm. Os ratos submetidos a severas manifestações bandas desenvolvidas extra-cardíaca da falha de RV, incluindo insuficiência h.......
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Discussão
Nós descrevemos um método acessível e altamente reprodutível do tronco pulmonar de borda usando um aplicador de clip ligating modificados para comprimir um clipe de titânio em torno do tronco pulmonar. Ajustando o aplicador para comprimir a mola para diferentes diâmetros internos, fenótipos distintos de hipertrofia de RV e falha podem ser induzidos incluindo insuficiência severa da RV com manifestação extra-cardíaca de descompensação.
Apesar de simples, o protocolo contém alguns passos crítico.......
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Divulgações
Os autores não têm nada a divulgar
Agradecimentos
Este trabalho foi apoiado pelo Conselho dinamarquês de investigação independente [11e108410], o dinamarquês Heart Foundation [12e04-R90-A3852 e 12e04-R90-A3907] e a Novo Nordisk Foundation [NNF16OC0023244].
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| 17 G IV Cânula Venflon | Becton Dickinson, US | 393228 | Distal 2 mm da agulha foram cortados |
| 1 seringa de 1 mL + agulha 26 G | Becton Dickinson, US | 303172 & 303800 | |
| 4-0 sutura multifilamentar absorvível | Covidien, US | GL-46-MG | Polysorb, violeta, 5x18 " |
| 4-0 ligadura multifilamentar | Covidien, US | LL-221 | Polysorb, violeta, 98 " |
| Buprenorfina | Indivior UK Limited | Aquisição local, Temgesic 0,3 mg / mL | |
| Carprofeno | ScanVet, DK | 27693 | Norodyl 50 mg / mL |
| Cloraxidina | Faaborg Pharma, DK | Aquisição local | |
| Empreiteiro | Aesculap, Alemanha | BV010R | Blunt, auto-retenção, 70 mm |
| Gancho de orelha | Lawton, Alemanha | 66-0261 | Pequeno, 14 cm, ponta modificada para um ângulo de 85° |
| Gel para os olhos | Decra, UK | Lubrithal, Pinça de aquisição local | |
| , Tecido delicado | Lawton, Alemanha | 09-0020 | |
| Fórceps, Dissecando | Lawton, Alemanha | 09-0013 | 1 regular, 1 com ponta modificada para um ângulo de 100° |
| Sistema de Anestesia a Gás | Penlon Limited, Reino Unido | SD0217SL | Vaporizador Delta Sigma |
| Aparador de cabelo | Oster | 76998-320-051 | |
| Aplicador de clipe de ligação aberto Horizon | Teleflex, US | 137085 | Modificado com mecanismo de parada ajustável |
| Horizon Titanium Clips | Teleflex, US | 001200 | Câmara de |
| indução | N/A | ||
| Tesoura de íris | Lawton, Alemanha | 05-1450 | |
| Tesoura de íris | Aesculap, Alemanha | BC060R | |
| Ventilador mecânico | Ugo Basile, Itália | 7025 | |
| Microscissor | Lawton, Alemanha | 63-1406 | |
| Microscópio | Carl Zeiss, Alemanha | 303294-9903 | |
| Porta-agulha | Lawton, Alemanha | 08-0011 | TITEGRIP |
| Pean | Lawton, Alemanha | 06-0100 | Halsted-Mosquito, direto |
| Pro-Optha | Lohmann & Rauscher, Alemanha | 16515 | Tampão |
| Salina 9 mg/mL | Fresenius Kabi, DK | 209319 | |
| Sevoflurane | AbbVie, US | Sevorane, Aquisição local | |
| Gancho cirúrgico | Lawton, Alemanha | 51-0665 | Cushing, 19 cm, ponta modificada para um ângulo de 90&graus; |
| Fita Cirúrgica | 3M, Controlador | Micropore | 1530-0 |
| Microdiálise CMA; Suécia | 8003760 | CMA 450 | |
| Máquina de pesagem | VWR, EUA | ||
| Desmamados de ratos Wistar | Janvier Labs, França | RjHan:WI, 100-120 g |
Referências
- Kaufman, B. D., et al. Genomic profiling of left and right ventricular hypertrophy in congenital heart disease. Journal of Cardiac Failure. 14 (9), 760-767 (2008).
- Zungu-Edmondson, M., Suzuki, Y. J. Diffe....
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Reimpressões e permissões
