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Artigo de método

Modelo do rato de úlceras de pressão após lesão medular

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DOI:

10.3791/58188

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9 de março de 2019

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Neste artigo

Resumo

Aqui, descrevemos um método simples para induzir úlceras de pressão de pele clinicamente relevantes (PUs) em um modelo do rato da lesão medular (SCI). Este modelo pode ser usado em estudos pré-clínicos de tela para diferentes terapias para cura PUs em pacientes SCI.

Resumo

Úlceras de pressão (PUs) são comuns debilitantes complicações da lesão traumática da medula espinhal (SCI) e tendem a ocorrer em tecidos moles em torno de proeminências ósseas. Lá está, no entanto, pouco conhecido sobre o impacto da SCI na pele ferida cura no contexto de modelos animais em configurações experimentais controlados. Neste estudo, é apresentado um modelo simples, não-invasivo, reprodutível e clinicamente relevantes do mouse de PUs no contexto da SCI completa. Ratos machos adultos (Balb/c, 10 semanas de idade) foram raspados e depilados. Pós-depilação (24 h), os ratos foram submetidos a laminectomia seguida por transecção completa da medula espinhal (vértebras de T9-T10). Logo após, uma prega de pele na parte de trás dos ratos foi levantada e imprensada entre dois discos magnéticos no lugar para próxima 12h, criando assim uma área isquêmica que desenvolveu um PU nos dias seguintes. As áreas feridas demonstraram edema do tecido e desaparecimento epidérmico pelo aplicativo de pós-ímã dia 3. PUs espontaneamente desenvolvido e curado. Cura foi, no entanto, mais lento nos ratos SCI comparado para controlar ratos não-SCI quando a ferida foi criada abaixo do nível do Sci. por outro lado, não há diferença na cura foi vista entre SCI e controle não-SCI os ratos quando a ferida foi criada acima do nível do Sci. Este modelo é uma ferramenta potencialmente útil para estudar a dinâmica de desenvolvimento do plutônio de pele e cicatrização depois SCI, bem como para testar abordagens terapêuticas que podem ajudar a curar essas feridas.

Introdução

Úlceras de pressão (PUs) são grandes complicações secundárias de traumático SCI1. PUs são lesões localizadas da pele e/ou tecidos subjacentes que geralmente ocorrem sobre proeminências ósseas, onde o peso corporal está concentrado, enquanto o paciente está sentado ou deitado1. A pele, gordura e músculo são expostos a uma pressão constante que leva ao desenvolvimento de isquemia localizada, inflamação do tecido, danos mecânicos e necrose2,3.

O desenvolvimento de PUs é afetado por vários fatores locais, incluindo a magnitude da pressão e....

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Protocolo

Todo animal manipulação e procedimentos cirúrgicos foram realizados em conformidade com um protocolo aprovado pelo Comitê de uso e Rutgers University institucional Cuidado Animal. Os ratos foram alimentados com dieta padrão e água ad libitum.

1. preparação dos instrumentos cirúrgicos e não-cirúrgico

  1. Esterilize os instrumentos cirúrgicos e não-cirúrgico em autoclave.
  2. Limpar a mesa de operações cirúrgica com 70% de etanol e aqueça uma almofada de aquecimento para 37 ° C.
  3. Coloque a almofada de aquecimento na mesa de operações e cubra-o com panos de campo cirúrgicos estéreis.
    Nota: Em todos os p....

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Resultados

Este protocolo cria um PU no cenário do Sci. completa brevemente (conforme ilustrado na Figura 1), todos os mouses com ou sem SCI completa tolerado os ímãs muito bem, que permaneceu em sua posição original para o pleno 12 h (figuras 1C, 1D, 1f, 1 h ). Todos os ratos desenvolveram duas feridas circulares, separadas por uma ponte de tecido normal (Figura 1e, 1G, 1i). A resposta inicial ferindo foi semelhante em cam.......

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Discussão

O protocolo neste estudo descreve um novo modelo experimental de PUs para avaliar o impacto da SCI na cicatrização de feridas. A pele PUs foram induzidas através de um aplicativo de 12 h de dois ímãs de disco de diâmetro de 12 mm em uma prega de pele dorsal, conjunto acima ou abaixo do site da SCI. Os dados mostram que a SCI retarda cicatrização de feridas de pele em camundongos. Importante, essas observações foram feitas especificamente em feridas de pele abaixo do nível da inervação do SCI, como feridas feitas acima do.......

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Divulgações

Os autores não têm nada para divulgar.

Agradecimentos

Este trabalho foi financiado parcialmente pela Comissão da investigação da medula espinhal (CSCR15IRG010), o departamento de defesa dos EUA (SC160029) e o Yale departamento de cirurgia Sesma Research Grant Program New Jersey. Agradecemos a Sean o ' Leary do W.M. Keck centro de Neurociências colaborativo, Rutgers para assistência técnica.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
MagnetsMaster Magnetcs, Inc., Castle Rock, COCD14C3800 G Força magnética
Ratos dieta padrãoPMI Nutrition International, Brentwood, MOAlimento Padrão
Pellet IsofluranoHENRY SCHEIN Saúde Animal SKU 029405
ImageJNIH, Bethesda, MDSoftware de Análise de
Imagem BETADINE Surgical ScrubHENRY SCHEIN Animal Health 
Pomada Oftálmica HENRY SCHEIN Saúde Animal SKU 008897
NAIR-Loção Removedora de PelosIgreja & Dwight Co., Inc. Princeton, NJ
ELOXIJECT (meloxicam) InjeçãoHENRY SCHEIN Saúde Animal SKU 0497555 mg/mL, 10 mL
Cefazolin SódicaHENRY SCHEIN Saúde Animal SKU 054846frasco de 1 g, 10 mL
Buprenorfina-SR ZooPharm, Windsor, CO--
0.9% Injeção de Cloreto de Sódio USPBRAUN, Irvine, CAS8004-5384
10% Formalina Tamponada Neutra VWR, Radnor, PA16004-130
BALB/C Rato MachoCharles River Lab., Wilmington, MA28
Aplicador Estéril com Ponta de AlgodãoPuritano, Guilford, MESKU#: 25-806
Michel Suture ClipsFine Science Tools (USA) Inc., Foster City, CA12040-01
Sutura Cirúrgica, U.S.P.Henry Schein Saúde Animal 101-2636

Referências

  1. Rappl, L. M. Physiological changes in tissues denervated by spinal cord injury tissues and possible effects on wound healing. International Wound Journal. 5 (3), 435-444 (2008).
  2. Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. Animal models in....

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Reimpressões e permissões

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