Coloração elástica em lâminas de parafina-Embedded de pT3N0M0 tecido de câncer gástrico

Resumo

Aqui, nós apresentamos um protocolo da mancha elástica para identificar fibras elásticas em tecidos pT3N0M0 do cancro gastric em seções formalin-fixadas, parafina-encaixadas. Subseqüentemente, nós descrevemos um método para determinar se as pilhas do tumor invadem além do lamina elástico.

Resumo

O lamina elástico, que é localizado geralmente na camada secundário-Mesothelial, adjacente às pilhas Mesothelial do peritônio, é anfifílico na coloração do hematoxilina e do eosina (H & e) mas pode ser visualizado com a mancha elástica. Um dos benefícios importantes da mancha elástica é que faz fácil determinar se as pilhas do tumor invadiram além do lamina elástico. Isto ajuda em examinar a extensão da invasão peritonealny da superfície, assim distinguindo os estágios de pT3 e de pT4 no cancro gastrintestinal. Neste estudo, nós apresentamos um protocolo para identificar fibras elásticas nas seções formalin-fixadas, parafina-encaixadas pT3N0M0 do tecido do cancro gastric. Nós preparamos seções de parafina de 5 μm fixadas em lâminas e, em seguida, todas as lâminas são desparaffinadas e rehidratados durante o procedimento de coloração. Posteriormente, todas as secções são oxidadas por permanganato de potássio, branqueada por ácido oxálico, manchada por coloração elástica, e contracorada por Van Gieson. Finalmente, examinamos o efeito da coloração; a lâmina elástica é manchada azul-preto e as fibras do colagénio são manchadas vermelhas, quando as pilhas cancerosas forem manchadas em máscaras de variação do amarelo. Também descrevemos detalhadamente os métodos utilizados para determinar a relação posicional entre as células cancerosas e a lâmina elástica. Este método é simples, de baixo custo, e amplamente aplicável na identificação da invasão de superfície peritoneal no cancro gastrintestinal por causa de sua seletividade proeminente para fibras elásticas e resultados autênticos.

Introdução

De acordo com o sistema de estadiamento do câncer de tumor, linfonodo e metástase (TNM), o prognóstico do câncer gástrico no estágio patológico pT4 é significativamente pior do que no pT3 (8º UICC/AJCC)¹. Com o câncer gástrico, a classificação do tumor primário (pT) geralmente depende da profundidade da invasão tumoral². O cancro gastric do pT3 do estágio patológico é definido como o cancro que invade através do própria dos muscularis em tecidos subserosal, visto que pT4 o cancro gastric é definido como o cancro que penetra à superfície do peritoneum visceral. A presença da invasividade da superfície peritoneal ....

Protocolo

Entre 1994 e 2005, as amostras de pacientes foram selecionadas por dois patologistas gastrintestinais experientes no hospital de câncer afiliado da escola de medicina de Xiangya, Universidade Central do Sul, de doentes que sofreram gastrectomia de Neoplasias do estômago, com um diagnóstico patológico postoperative do cancro gastric no estágio de pT3N0M0 (de acordo com o sétimo estadiamento de TNM). Este estudo foi aprovado pelo Comitê de ética em revisão.

1. seccionamento

1. Coloc o bloco da parafina em um suporte fixo do micrótomo do Sledge, que pode se mover para trás e para a frente através da lâmina. Ajuste o ângulo ideal entre o....

Resultados

Uma coloração elástica bem sucedida revela claramente A lâmina elástica e as células cancerosas em pT3 cancro gástrico. Figura 1 -campo de baixa potência, verificado microscopicamente após coloração da solução de elastina, antes da contratura de Van Gieson de acordo com o protocolo mencionado-mostra que a lâmina elástica está próxima das células mesotheliais serosais e é manchada de cor azul-preta na forma de filamentos, e ainda há uma certa distância entre a.......

Discussão

Este método proposto fornece uma abordagem precisa para identificar a lâmina elástica subserosal. O método pode ser usado para avaliar se as células tumorais invadiram a lâmina elástica em pT3N0M0 câncer gástrico¹². O lamina elástico é avermelhado em seções H & e-manchadas, que não poderiam facilmente ser distinguidos das fibras do colagénio, e outros métodos auxiliares existentes do diagnóstico, tais como a citologia e Immunohistochemistry, igualmente exercida o valor diagnóstico limitado. O acha.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Kit de coloração Elastin-Van Gieson	Baso	BA4083B	Usado para coloração de fibras elásticas, fibras de colágeno e miofibras
Meio de Montagem Permount TM	MXB Biotechnologies	DAB-0033	Usado para montagem
de Etanol	LMAI Bio	LM64-17-5	100%
Xileno	LMAI Bio

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