Antigênicos lipossomas para a geração de anticorpos específicos de doença

Kyle J. Bednar; Lakeya Hardy; Johanna Smeekens; Dharmendra Raghuwanshi; Shiteng Duan; Mike D. Kulis; Matthew S. Macauley

doi:10.3791/58285

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Artigo de método

Antigênicos lipossomas para a geração de anticorpos específicos de doença

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DOI:

10.3791/58285

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25 de outubro de 2018

Kyle J. Bednar^*¹ , Lakeya Hardy^*²^,³ , Johanna Smeekens^*³^,⁴ , Dharmendra Raghuwanshi⁵ , Shiteng Duan⁶ , Mike D. Kulis³^,⁴ , Matthew S. Macauley⁵^,⁷

¹Janssen R&D, ²Department of Microbiology and Immunology, University of North Carolina, ³UNC Food Allergy Initiative, University of North Carolina, ⁴Department of Pediatrics, University of North Carolina, ⁵Department of Chemistry, University of Alberta, ⁶Department of Molecular Medicine, Scripps Research Institute, ⁷Department of Medical Microbiology and Immunology, University of Alberta

^* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

Descrito, é a preparação de nanopartículas lipossomas antigênicas e seu uso em estimulando células B ativação in vitro e em vivo. Respostas consistentes e robustas anticorpo levaram ao desenvolvimento de um novo modelo de alergia ao amendoim. O protocolo para a geração de lipossomas antigênicos pode ser estendido para antígenos diferentes e modelos de imunização.

Resumo

Respostas de anticorpos fornecer imunidade protetora crítica para uma grande variedade de agentes patogénicos. Ainda há um grande interesse na geração de anticorpos robustos para a vacinação, bem como entender como patogênico anticorpo respostas desenvolvem alergias e doenças auto-imunes. Gerar respostas robusto anticorpos antígeno-específicos não é sempre trivial. Em modelos do rato, muitas vezes requer várias rodadas de vacinas com adjuvante que leva a uma grande variabilidade nos níveis de anticorpos induzidos. Um exemplo é em modelos do rato de alergias do amendoim onde modelos mais robustos e reprodutíveis que minimizam o rato números e o uso de adjuvantes seria benéficos. Apresentado aqui é um modelo de mouse altamente reprodutível de anafilaxia alergia ao amendoim. Esse novo modelo baseia-se em dois fatores principais: (1) antígeno-específicas splenocytes enviaram são transferidos de um rato de amendoim-sensibilizados para um rato de destinatário ingênuo, normalizando o número de memória antígeno-específicas e T-células B através de um grande número de ratos; e (2) destinatários ratos são posteriormente impulsionou com um forte immunogen multivalentes na forma de nanopartículas lipossomas exibindo o alérgeno amendoim principal (Ara h 2). A grande vantagem deste modelo é sua reprodutibilidade, que em última análise, reduz o número de animais utilizados em cada estudo, minimizando o número de animais recebendo injeções múltiplas de adjuvante. A montagem modular destes lipossomas imunogênicas fornece adaptabilidade facile relativamente a outros modelos alérgicas ou auto-imune que envolvem anticorpos patogênicos.

Introdução

Alergia alimentar afeta 8% das crianças nos Estados Unidos e tem aumentado em prevalência nos últimos década¹. Alergia a amendoim afeta 1% das crianças e não é tipicamente Superdimensonada². Embora vários ensaios clínicos promissores estão em andamento para o tratamento de alergias alimentares, incluindo imunoterapia oral (OIT), imunoterapia sublingual (fenda) e imunoterapia epicutâneos (EPIT), existem actualmente sem estratégias de tratamento aprovado pela FDA para a dessensibilização alérgica a amendoim indivíduos³^,⁴^,⁵^,