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Artigo de método

Protocolo clínico de produzir tecido adiposo-derivado do estroma Vascular fração para a regeneração da cartilagem potenciais

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DOI:

10.3791/58363

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29 de setembro de 2018

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* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

Aqui, apresentamos um protocolo para produzir uma tecido adiposo-derivado do estroma vascular fração e sua aplicação para melhorar as funções de joelho Regenerando o tecido da cartilagem, como em pacientes humanos com osteoartrite.

Resumo

Osteoartrite (OA) é uma das mais comuns doenças debilitantes. Recentemente, várias tentativas foram feitas para melhorar as funções dos joelhos usando diferentes formas de células-tronco mesenquimais (MSCs). Na Coreia, concentrados de medula óssea e cordão hemoderivados células-tronco foram aprovadas pela Korean Food and Drug Administration (KFDA) para regeneração da cartilagem. Além disso, uma tecido adiposo-derivado do estroma vascular fração (SVF) foi autorizada pelo KFDA para injeções conjuntas em pacientes humanos. SVF autóloga derivadas de tecido adiposo contém matriz extracelular (ECM), além de células-tronco mesenquimais. ECM excreta várias citocinas que, juntamente com o ácido hialurónico (HA) e o plasma rico em plaquetas (PRP) ativado pelo cloreto de cálcio, podem ajudar o MSCs para regenerar a cartilagem e melhorar as funções do joelho. Neste artigo, apresentamos um protocolo para melhorar as funções do joelho Regenerando o tecido da cartilagem, como em pacientes humanos com OA. O resultado do protocolo foi primeiramente relatado em 2011, seguido por algumas publicações adicionais. O protocolo envolve lipoaspiração para obter lipoaspirates autólogo que são misturados com colagenase. Esta mistura de lipoaspirates-colagenase é então cortada e homogeneizada para remover grandes de tecido fibroso que pode entupir a agulha durante a injeção. Depois disso, a mistura é incubada para obter SVF derivadas de tecido adiposo. O resultante SVF derivadas de tecido adiposo, contendo tecido adiposo-derivado MSCs e restos de ECM, é injetado em joelhos de pacientes, combinados com HA e cloreto de cálcio ativado PRP. Incluem-se três casos de pacientes que foram tratados com nosso protocolo, resultando em melhora da amplitude de movimento, juntamente com provas de MRI de cartilagem hialina, como tecido, inchaço e dor no joelho.

Introdução

Células-tronco mesenquimais (MSCs) são conhecidas por terem a capacidade de regenerar a cartilagem1,2,3,4,5,6. Elas podem ser facilmente obtidas de várias fontes: sangue do cordão umbilical, medula óssea e tecido adiposo, entre muitos outros. Entre essas fontes, o tecido adiposo é a única fonte onde um número suficiente de MSCs pode ser obtido sem qualquer expansão da cultura para regenerar a cartilagem em ambientes clínicos7,

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Protocolo

A aprovação e o consentimento para relatar após relatos de casos dispensadas pelo Comité do Conselho de revisão institucional Myongji University (MJUIRB). Além disso, este protocolo clínico foi em conformidade com as diretrizes da declaração de Helsinque e regulamento do KFDA. Para os procedimentos, consentimento informado foram obtido de pacientes.

1. lipoaspiração

Nota: Execute com técnica estéril.

  1. Use os seguintes critérios de inclusão: (1) provas de MRI da fase 3 OA; (2) masculino ou feminino; (3) mais de 18 anos de idade; (4) suficiente tecido adiposo de (100-110 g) para lipoaspiração; (5) falta de....

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Resultados

Três pacientes (uma mulher de 87 anos, com estágio 3 OA, um homem de 68 anos, com estágio 3 OA, e uma mulher de 60 anos com estágio 3 OA) sem qualquer passado significativo histórico médico apresentado à clínica com dor persistente no joelho e desejado para o potencial tratamento de SVF autólogo derivadas de tecido adiposo. Todos os três pacientes tinham seu joelho examinado por um cirurgião ortopédico e ofereceram-se para ter a substituição total do joelho (TKR) e estavam relutantes em f.......

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Discussão

Em 2001, Zuk et al. células-tronco isoladas de tecido adiposo por quebrar a matriz de colágeno com colagenase6. Depois, o grupo mostrou que essas células-tronco isoladas de tecido adiposo pode transformar em cartilagem e outros tecidos da mesoderme, na origem, provando que essas células-tronco eram mesenquimais na origem.

Da mesma forma, o procedimento apresentado neste artigo é um protocolo modificado para aplicar o método semelhante para pacientes humanos. A .......

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Divulgações

Os autores não têm nada para divulgar.

Agradecimentos

O autor reconhece que o apoio da equipe do Mipro clínica médica e o desenho de figura por Mariana/David Lee. Este trabalho foi apoiado por bolsas de investigação do Bio & programa de desenvolvimento de tecnologia médica da NRF financiada pelo MSIT (número NRF-2017M3A9E4078014); e o nacional Research Foundation da Coreia (NRF) financiado pelo Ministério da ciência e TIC (números NRF-2017R1A2B4002315 e NRF-2016R1C1B2010308).

....

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Material
5% Betadine (iodopovidona) Fornecedor:Firson Co., Ltd.
2% de lidocaína Daehan Farmacêutica Co.
Solução tumescente Fornecedor:Myungmoon Pharm. Co., Ltd.N01BB01A solução foi composta por 500 mL de soro fisiológico, 40 mL de lidocaína a 2%, 20 mL de marcaína a 0,5% e 0,5 mL de epinefrina 1:1000.
Liberase TL e TM grau de pesquisa Roche Ciência Aplicada5401020001
D5LRDahan Pharm. Co., Ltd.645101072Dextrose 5% em solução de Ringer com lactato 
Solução anticoagulante citrato dextrose Fenwal, Inc.NDC:0942-0641A solução foi composta por ácido cítrico a 0,8%,
citrato de sódio a 0,22% e dextrose a 0,223%.
3% (p/v) de cloreto de cálcio Fornecedor:Choongwae Pharmaceutical Co.
0,5% (p/v) HA (ácido hialurônico)Dongkwang pharm. Co., Ltd.
0,25% RopivacaínaHuons Co., Ltd.670600150
Equipamento
3,0 mm Fornecedor verificado - WOOJU Medical Instruments Co.
Seringa Luer-Lock de 60 mLBD (Becton Dickinson) 
309653 Kit de Barril de CentrífugaFornecedor:CPL Co., Ltd.30-0827044
Homogeneizador de tecidos que contém lâminasCPL Co., Ltd.30-0827045
Misturador rotativo da incubadoraMedikan Co., LtdMS02060092
CentrífugaHanil Scientific Inc.CE1133
Ressonância MagnéticaPhilips Medical Systems Inc.18068
Sistema de imagem de ultrassomSamsung Medison co., LtdCT-LK-V10-ICM-09.05.2007
657400260670603480644902101645902030Cânula de ML30200

Referências

  1. Arnoczky, S. P. Building a meniscus. Biologic considerations. Clinical Orthopaedics and Related Research. (367 Suppl), S244-S253 (1999).
  2. Barry, F. P. Mesenchymal stem cell therapy in joint disease. Novartis Foundation Symposium. 249, 86-241 (2003).
  3. Usuelli,....

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Reimpressões e permissões

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