O método padrão atual de preservação de órgão (armazenamento frio, CS), expõe o coração a um período de isquemia fria que limita o tempo de conservação segura e aumenta o risco de resultados adversos de pós-transplante. Além disso, a natureza estática do CS não permite para avaliação de órgão ou intervenção durante o intervalo de preservação. Normotérmica ex situ coração perfusão (ESHP) é um método novo para preservação do coração doado que minimiza a isquemia fria fornecendo perfusato oxigenado, ricos em nutrientes para o coração. ESHP foi mostrado para ser não-inferior a CS na preservação de doador padrão-critérios corações e também facilitou o transplante clínico dos corações doados após a determinação circulatória da morte. Atualmente, o dispositivo de ESHP clínica disponível apenas perfuses o coração em um estado descarregado, não trabalham, limitando as avaliações de desempenho do miocárdio. Por outro lado, ESHP na modalidade de trabalho oferece a oportunidade para avaliação detalhada do desempenho cardíaco pela avaliação de parâmetros funcionais e metabólicas em condições fisiológicas. Além disso, mais cedo os estudos experimentais têm sugerido que ESHP na modalidade de trabalho pode resultar em melhor preservação funcional. Aqui, descrevemos o protocolo para ex situ perfusão do coração em um modelo de grandes mamíferos (suínos), que é reprodutível para coração tamanhos e modelos diferentes de animais. O programa de software no aparelho ESHP permite controle automatizado e em tempo real da velocidade da bomba para manter a desejada pressão atrial esquerda e da aorta e avalia uma variedade de parâmetros funcionais e eletrofisiológicos com necessidade mínima de supervisão/manipulação.