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Artigo de método

Normotérmica Ex Situ coração perfusão na modalidade de trabalho: avaliação da função cardíaca e metabolismo

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DOI:

10.3791/58430

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12 de janeiro de 2019

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Neste artigo

Resumo

Normotérmica ex situ coração perfusão (ESHP), preserva o coração em um estado semi fisiológico, batendo. Quando executada em um modo de funcionamento, ESHP fornece a oportunidade de realizar avaliações sofisticadas de doador viabilidade de função e de órgão do coração. Aqui, descrevemos nosso método para a avaliação de desempenho do miocárdio durante ESHP.

Resumo

O método padrão atual de preservação de órgão (armazenamento frio, CS), expõe o coração a um período de isquemia fria que limita o tempo de conservação segura e aumenta o risco de resultados adversos de pós-transplante. Além disso, a natureza estática do CS não permite para avaliação de órgão ou intervenção durante o intervalo de preservação. Normotérmica ex situ coração perfusão (ESHP) é um método novo para preservação do coração doado que minimiza a isquemia fria fornecendo perfusato oxigenado, ricos em nutrientes para o coração. ESHP foi mostrado para ser não-inferior a CS na preservação de doador padrão-critérios corações e também facilitou o transplante clínico dos corações doados após a determinação circulatória da morte. Atualmente, o dispositivo de ESHP clínica disponível apenas perfuses o coração em um estado descarregado, não trabalham, limitando as avaliações de desempenho do miocárdio. Por outro lado, ESHP na modalidade de trabalho oferece a oportunidade para avaliação detalhada do desempenho cardíaco pela avaliação de parâmetros funcionais e metabólicas em condições fisiológicas. Além disso, mais cedo os estudos experimentais têm sugerido que ESHP na modalidade de trabalho pode resultar em melhor preservação funcional. Aqui, descrevemos o protocolo para ex situ perfusão do coração em um modelo de grandes mamíferos (suínos), que é reprodutível para coração tamanhos e modelos diferentes de animais. O programa de software no aparelho ESHP permite controle automatizado e em tempo real da velocidade da bomba para manter a desejada pressão atrial esquerda e da aorta e avalia uma variedade de parâmetros funcionais e eletrofisiológicos com necessidade mínima de supervisão/manipulação.

Introdução

Relevância clínica

Enquanto a maioria dos aspectos do transplante cardíaco têm evoluído significativamente desde o primeiro coração transplante em 1967, armazenamento frio (CS) continua a ser o padrão para o doador coração preservação1. CS expõe o órgão para um período de isquemia fria que limita o intervalo de segurança preservação (4 – 6 horas) e aumenta o risco de disfunção de prótese primária2,3,4. Devido à natureza estática de CS, avaliações de função ou intervenções terapêuticas não são possíveis no tempo entre a colheita....

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Protocolo

Todos os procedimentos neste manuscrito foram realizados em conformidade com as diretrizes do Conselho canadense de cuidado Animal e o guia para o cuidado e uso de animais de laboratório. Os protocolos foram aprovados pelo Comitê institucional de cuidado animal da Universidade de Alberta. Este protocolo foi aplicado em porcos de Yorkshire fêmeas juvenis entre 35 a 50 kg. Todos os indivíduos envolvidos em procedimentos ESHP tinham recebido formação adequada de biossegurança.

1. pré-cirúrgicas preparações

  1. Coloque a câmara de órgão corretamente no carrinho aparelho e instalar a membrana de suporte de silicone no interior da câmara de....

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Resultados

No início da perfusão (no modo de não-trabalho), o coração vai retomar normalmente um ritmo sinusal quando a temperatura do sistema e do perfusato se aproxima normotermia. Quando entrar no modo de funcionamento, como as pressões de LA aproximam-se os valores desejados, ejeção sobre o traçado de pressão Ao deve ser observada e o fluxo de LA (um reflexo do débito cardíaco) deve aumentar gradualmente. Em um modelo de porco Yorkshire (35 – 50 kg) e um peso inicial de coração de 180 – 220 gram.......

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Discussão

Perfusão de sucesso é definido de acordo com os objectivos do estudo; no entanto, isto deve incluir ESHP ininterrupto para a quantidade desejada de tempo e a coleção completa dos dados sobre a função cardíaca durante a perfusão. Para este efeito, a poucos passos críticos no protocolo devem ser seguidos.

O coração é um órgão com oxigênio alto e demandas de energia e minimizar o tempo de isquemia antes canulação e perfusão é um princípio importante que deve ser seguido. O processo de aquisição, .......

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Divulgações

FHD detém patentes sobre métodos e ex situ tecnologia de perfusão de órgão. FHD e Jo são fundadores e principais accionistas da Tevosol, Inc.

Agradecimentos

Este trabalho foi apoiado por concessões do canadense nacional transplante programa de pesquisa. SH é o destinatário de uma faculdade de medicina e odontologia Motyl Studentship pós-graduação em Ciências cardíaca. A FHD é um beneficiário de uma subvenção de projetos de pesquisa colaborativa (CHRP) em auxílio do nacional de Ciências e engenharia Research Council e institutos canadenses de pesquisa em saúde.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Tesoura de dissecação Debakey-MetzenbaumTesoura de
MAYOPinça de Pilling460420
THUMB465165
Pinça de tecido vascular reto Debakey Pilling351808
CUSHING Gutschdressing fórcepsPilling466200
Porta-agulhas JOHNSONPilling510312
porta-agulhas DERFPilling443120
Serra esternalStryker6207
Afastador esternalPilling341162
Braçadeira de tubulação VorsePilling351377
MORRIS grampo ascendente para aortaPilling353617
Conjunto de laço cirúrgico (torniquete) MedtronicCVR79013
2-0 SILK preto 12" x 18" fiosETHICONA185H
3-0 PROLENE azul 18" PS-2 corteETHICON8687H
Acionamento da bomba Biomedicus (modificado)Medtronic540Modificado para permitir o controle eletrônico remoto da velocidade da bomba
Bomba BiomedicusMaquetBPX-80
Oxidador de membrana D 905GRUPO SORIN50513
Módulo de fluxo de tubulação   SensorTs410
PXLTransdutorME9PXL-BL37SF
Edwards
3/8" x 3/32" xX 6'TubulaçãoMedtronic3506
1/4" x 1/16" x 8'Medtronic3108
Aquecido/Refrigerado Circulador de Banho AnalisadorTX-150
ABL 800 FLEXRadiômetro989-963
Cânula de cardioplegia DLP (cânula de raiz aórtica)Medtronics20613994495406
5F Ventriculr cathter de rabo de cavalo retoCORDIS534550S
5F AVANTI+ Introdutor de bainhaCORDIS504605A
Fio guia Esmeralda AmplatzCORDIS502571A
Marca-passo de câmara duplaMedtronic5388
DesfibriladorCodeMasterM1722B
Bomba de infusãoBaxterAS50
Dispositivo de eletrocautério cirúrgicoKls MartinME411
Misturador de gásSECHRIST3500 CP-G
Tanque de oxigênio médicopraxair2014408
tanque de dióxido de Cabonpraxair5823115
Albumina de soro bovinoMP biomedicals218057791
dissecação 342202 de fluxo de braçadeira Transonic de pressão TruWave Transonic Tubulação de interceptação VSYPX272 de interceptação de Gases Sanguíneos Grant

Referências

  1. Ardehali, A., et al. Ex-vivo perfusion of donor hearts for human heart transplantation (PROCEED II): a prospective, open-label, multicentre, randomised non-inferiority trial. Lancet. 385 (9987), 2577-2584 (2015).
  2. Collins, M. J., Moainie, S. L., Griffith, B. P., Poston, R. S.

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Reimpressões e permissões

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