Indução de Intestinal enxerto versus doença-- host e sua avaliação endoscópica-Mini em ratos ao vivo

Vera Buchele; Maike Büttner-Herold; Tina Vogler; Markus F. Neurath; Kai Hildner

doi:10.3791/58871

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Artigo de método

Indução de Intestinal enxerto versus doença-- host e sua avaliação endoscópica-Mini em ratos ao vivo

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DOI:

10.3791/58871

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11 de fevereiro de 2019

Vera Buchele¹^,³ , Maike Büttner-Herold² , Tina Vogler¹^,³ , Markus F. Neurath¹^,³ , Kai Hildner¹^,³

¹Department of Internal Medicine 1, University Erlangen-Nürnberg, University Hospital Erlangen, ²Institute of Pathology, Department of Nephropathology, University Hospital Erlangen, ³Deutsches Zentrum Immuntherapie (DZI), University Hospital Erlangen

Neste artigo

Resumo

Aqui, apresentamos um protocolo que descreve o transplante de células-tronco hematopoéticas alogênico e permite repetitivas avaliações miniendoscópica do cólon distal in situ para a presença, as características e gravidade da inflamação do cólon dentro ao vivo ratos sofrem intestinal enxerto versus doença-- host.

Resumo

Aguda enxerto doença contra o hospedeiro (GvHD) representa a complicação mais grave que pacientes submetidos anteriormente a cara (allo-HCT) de transplante de células-tronco hematopoéticas alogênico e frequentemente está associada com um resultado clínico ruim. Quando, por exemplo, GvHD manifestações da pele são geralmente responsivos às terapias imune-supressora estabelecidas e, portanto, não vai levar um curso fatal, a presença e a intensidade da GvHD intestinal, especialmente das partes meados-de-inferior do intestino, influenciar fortemente o resultado e geral sobrevida de pacientes com aguda DECH. opções terapêuticas são essencialmente limitados aos agentes imune-supressora clássicos rendendo apenas moderados efeitos atenuantes a doença. Portanto, conhecimento detalhado sobre a cascata imune do tecido-residente, alterações na microbiota intestinal, e a resposta do estroma anterior, em cima e depois do aparecimento de GvHD intestinal são urgentemente necessários para compreender os eventos e os mecanismos subjacentes a patogênese e desenvolver opções terapêuticas inovadoras. Modelos murino de GvHD são frequentemente empregados para identificar e avaliar funcionalmente moléculas e vias de condução presumidamente GvHD intestinal. No entanto, meios especificamente monitorar e avaliar a inflamação intestinal ao longo do tempo são essencialmente falta desde que escores estabelecidos para avaliar e corrigir GvHD aguda rotineiramente são compostos de vários parâmetros que melhor reflectem GvHD sistêmica manifestações. A avaliação detalhada da GvHD intestinal foi restringida aos estudos usando ratos sacrificados, excluindo, assim, essencialmente longitudinal (i.e., cinética) análises do compartimento do cólon sob uma determinada condição experimental (por exemplo, anticorpo mediada bloqueio de uma citocina proinflammatory) em camundongos ao vivo (i.e., na vivo). A avaliação in situ miniendoscópica do cólon distal dos ratos allo-HCT-tratada aqui descrito permite um) uma detalhada avaliação macroscópica dos diferentes aspectos da inflamação intestinal e b) a opção para coletar amostras de tecido para análises a jusante no vários pontos de tempo ao longo do período de observação. Em geral, a abordagem endoscópica-mini fornece um grande avanço na monitorização não invasiva pré-clínica e avaliação de GvHD intestinal.

Introdução

Malignidades hematopoiéticas directamente decorrentes do compartimento de células-tronco hematopoiéticas e descontrolada, progredindo rapidamente e distúrbios graves de imune-mediada são frequentemente indicações para executar allo-HCT¹^,². No entanto, apesar de contabilidade para a ocorrência da resposta enxerto-versus-tumor prognóstica benéfica, linfócitos do doador são frequentemente induzindo e promovendo um ataque imune-mediada indesejado de componentes de tecido saudável dentro do destinatário allo-HCT , um processo que é chamado de doença do enxerto - versus - hospedeiro³. Manifes....