Um protocolo para a terapia de décadas transcraniana em ratos

Resumo

Décadas de terapia é uma inovadora modalidade não-invasiva para o tratamento de uma ampla variedade de desordens neurológicas e psiquiátricas e também pode melhorar a função cerebral saudável. Este protocolo inclui um guia passo a passo para executar décadas de cérebro em ratos pela entrega de luz transcraniana, que pode ser adaptada para uso em outros roedores de laboratório.

Resumo

Transcraniana décadas é uma abordagem terapêutica não invasiva inovadora potencial para melhorar bioenergética do cérebro, a atividade cerebral em uma ampla variedade de desordens neurológicas e psiquiátricas e realce da memória em declínio cognitivo relacionados com a idade e doenças neurodegenerativas. Descreveremos um protocolo do laboratório para a terapia de décadas transcraniana (PBMT) em ratos. Envelhecido camundongos BALB/c (18 meses de idade) são tratados com um 660 nm laser transcranially, uma vez ao dia por 2 semanas. Dados de transmitância do laser mostram que aproximadamente 1% da luz incidente sobre o couro cabeludo vermelho atinge uma profundidade de 1 mm da superfície cortical, penetrando o hipocampo dorsal. Os resultados do tratamento são avaliados por dois métodos: um Barnes labirinto teste, que é um hipocampo-dependente espacial aprendizagem e memória tarefa avaliação, e medição de níveis de ATP hipocampo, que é usado como um índice de Bioenergética. Os resultados da tarefa de Barnes mostram um aumento da memória espacial em ratos envelhecidos do laser-tratado quando comparado com a idade-controles. Análise bioquímica após tratamento com laser indica aumento dos níveis de ATP hippocampal. Podemos postular que a melhoria do desempenho da memória é potencialmente devido a uma melhoria no metabolismo de energia hippocampal induzida pelo tratamento a laser vermelho. As observações em camundongos poderiam ser estendidas a outros modelos animais, desde que este protocolo potencialmente poderia ser adaptado para outras espécies frequentemente usados em neurociência translacional, tais como o coelho, gato, cachorro ou macaco. Transcraniana décadas é uma modalidade segura e econômica, que pode ser uma promissora abordagem terapêutica no comprometimento cognitivo relacionados com a idade.

Introdução

PBMT, ou terapia de luz laser de baixo nível (LLLT), é um termo geral que refere-se a métodos terapêuticos baseados a estimulação de tecidos biológicos pela energia luminosa do laser ou diodos emissores de luz (LEDs). Quase todos os tratamentos de PBMT são aplicados com vermelho a luz infravermelha (NIR) em comprimentos de onda de 600 a 1100 nm, uma potência variando de 1 a 500 mW e uma fluência que variam de < 1 a > 20 J/cm² (veja Chung et al.¹).

Transcranial PBMT é um método de entrega de luz não-invasiva que é conduzido por irradiação da cabeça usando um externo fonte de luz (laser ou LEDs)

Protocolo

Todos os procedimentos foram realizados em conformidade com o guia para o cuidado e o uso de animais de laboratório do National Institutes of Health (NIH; Publicação n º 85-23, revista em 1985) e aprovado pelo Comitê de ética regionais de Ciências da Universidade de Tabriz Medical.

Atenção: Este protocolo inclui a aplicação de instrumentos de laser classe 3B e exigirá uma formação adequada e aderência às diretrizes de segurança. Lasers de classe 3B podem danificar gravemente os olhos e podem aquecer a pele. Lasers de classe 3B não são considerados um risco de queimaduras. Óculos de proteção de olho é obrigatório em todos os momentos quando ....

Resultados

Análises estatísticas

A análise estatística dos dados obtidos a partir das sessões de treinamento de Barnes foi analisada pela ANOVA de duas vias; os outros testes comportamentais e análise dos níveis de ATP hippocampal entre os grupos foram realizados por One-Way ANOVA, seguido pelo teste post hoc de Tukey. Todos os dados são expressos como média ± o erro padrão da média (SEM), com exceção dos dados de transmis.......

Discussão

Descreveremos um protocolo para a realização de um procedimento PBMT transcraniana em camundongos. Este protocolo destina-se especificamente aos laboratórios de neurociência que realizam pesquisas de décadas focadas em roedores. No entanto, este protocolo pode ser adaptado para outros animais de laboratório que são frequentemente usados no campo da neurociência, tais como o coelho, gato, cachorro ou macaco.

Atualmente, há um interesse crescente na investigação transcraniana PBMT com vermelho/N.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
	Cetamina Alfasan	#1608234-01
Xylazine	Alfasan	#1608238-01
Agarose	Sigma	#A4679
Supercola	Quickstar
Vibratome	Campden Instruments	#MA752-707
Vela de vidro óptico	Marca	#7102
Power medidor	Thor labs	#PM100D
detector de fotodiodo	Thor labs	#S121C
Caliper	Pittsburgh
GaAlAs laser	Thor Photomedicine
Etho Vision	Noldus
Centrifuge	Froilabo	#SW14R
Earmuffs	Blue Eagle
Câmera digital	Visionlite	#VCS2-E742H
Amplificador Sterio	Sony
Ethanol	Hamonteb	#665.128321
Barnes maze	Kit de
	Sigma	#MAK190
Elisa reader	Awareness	#Stat Fax 2100

ensaio ATP feito pela Costom