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Artigo de método

Indução de insuficiência ventricular direita por constrição da artéria pulmonar e avaliação da função ventricular direita em camundongos

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DOI:

10.3791/59431

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13 de maio de 2019

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Neste artigo

Resumo

Aqui, nós fornecemos uma aproximação útil para estudar o mecanismo da falha ventricular direita. Uma aproximação mais conveniente e mais eficiente à constrição da artéria pulmonaa é estabelecida usando instrumentos cirúrgicos feitos inhouse. Além disso, são fornecidos métodos para avaliar a qualidade dessa abordagem por ecocardiografia e cateterismo.

Resumo

O mecanismo de insuficiência ventricular direita (RVF) requer esclarecimento devido à singularidade, alta morbidade, alta mortalidade e natureza refratária da RVF. Os modelos precedentes do rato que imitando a progressão de RVF foram descritos. Comparado com ratos, os ratos são mais acessíveis, econômicos e amplamente utilizados em experimentos com animais. Nós desenvolvemos uma aproximação da constrição da artéria pulmonaa (PAC) que seja compreendida de bandagem o tronco pulmonar nos ratos para induzir a hipertrofia ventricular direita (RV). Uma agulha cirúrgica especial da trava foi projetada que permita a separação mais fácil da aorta e do tronco pulmonar. Em nossos experimentos, o uso desta agulha de trava fabricada reduziu o risco de arteriorrhexis e melhorou a taxa de sucesso cirúrgico para 90%. Utilizamos diferentes diâmetros de agulhas de preenchimento para criar precisamente constrição quantitativa, o que pode induzir diferentes graus de hipertrofia do VD. Quantificamos o grau de constrição avaliando-se a velocidade do fluxo sanguíneo do PA, medida pela ecocardiografia transtorácica não invasiva. A função do RV foi avaliada precisamente pelo cateterismo direito do coração em 8 semanas após a cirurgia. Os instrumentos cirúrgicos feitos no inhouse foram compor de materiais comuns usando um processo simples que seja fácil de dominar. Portanto, a abordagem PAC descrita aqui é fácil de imitar usando instrumentos feitos no laboratório e pode ser amplamente utilizado em outros laboratórios. Este estudo apresenta uma abordagem PAC modificada que tem uma taxa de sucesso maior do que outros modelos e uma taxa de sobrevida pós-cirúrgica de 8 semanas de 97,8%. Esta aproximação do PAC fornece uma técnica útil para estudar o mecanismo de RVF e permitirá uma compreensão aumentada de RVF.

Introdução

A deficiência orgânica do RV (RVD), definida aqui como a evidência de uma estrutura ou de uma função anormal do RV, é associada com os resultados clínicos pobres. RVF, como o estágio da extremidade da função do RV, é uma síndrome clínica com sinais e sintomas da falha de coração que resultam do RVD progressivo1. Com diferenças na estrutura e função fisiológica, a insuficiência ventricular esquerda (ve) e a RVF apresentam diferentes mecanismos fisiopatológicos. Alguns mecanismos patofisiológicos independentes em RVF foram relatados, incluindo o superexpressão da sinalização2do receptor β2-adrenergic, da inflamação

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Protocolo

Todos os procedimentos foram realizados de acordo com as diretrizes institucionais de pesquisa animal, que estão em conformidade com o guia para o cuidado e uso de animais de laboratório publicados pelos institutos nacionais de saúde dos EUA (NIH publication n º 85-23, revisado em 1996). C57BL/6 camundongos machos (8-10 semanas de idade, pesando 20-25 g) foram fornecidos pelo centro animal da universidade médica do Sul. Após a chegada, os camundongos foram alojados um ciclo de 12/12 h escuro/luz, com comida e água suficientes.

1. preparação dos instrumentos cirúrgicos e fabricação das agulhas

  1. Prepare os instrumentos cirúrgicos est....

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Resultados

Neste estudo, os camundongos foram aleatoriamente atribuídos ao grupo PAC (n = 9) ou ao grupo de operação Sham (n = 10). A ecocardiografia foi executada em 1, 4, e 8 semanas após a cirurgia. Oito semanas após a cirurgia, após as últimas avaliações de ecocardiografia e cateterismo, os camundongos foram eutanasiados, e seus corações foram colhidos para avaliação morfológica e histológica.

A constrição do tronco p.......

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Discussão

Os aumentos patológicos nas pressões de enchimento do RV resultam em um deslocamento leftward do septo, que possa alterar a geometria21do LV. Essas alterações contribuem para a redução do débito cardíaco e da fração de ejeção do ve (FEVE), o que pode causar um distúrbio hemodinâmico do sistema circulatório22. Conseqüentemente, um modelo eficiente, estável, e econômico para estudar o mecanismo de RVF é valioso.

Nós desenvolvemos uma aproximação ma.......

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Divulgações

Os autores não têm nada a revelar.

Agradecimentos

Este trabalho foi apoiado por subsídios da Fundação Nacional de ciências naturais da China (81570464, 81770271; ao Dr. Liao) e os projetos de Planejamento Municipal de tecnologia científica de Guangzhou (201804020083) (ao Dr. Liao).

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Ventilador ALC-V8SSHANGHAI  ALCOTT  BIOTECNOLOGIA  COALC-V8SVentilação
assistida Mini Ventilador AnimalHaverdTipo 845Ventilação assistida
Sistema de ultrassom animal VEVO2100Visual Sonic  VEVO2100Ecocardiografia
Iluminador de luz friaOlympusILD-2Light
Almofada de calor - sistema cirúrgico termostático (ALC-HTP-S1)SHANGHAI  ALCOTT  BIOTECNOLOGIA  COALC-HTP-S1Aquecimento
IsofluranoRWD ciência da vidaR510-22Anestesia inalante
Matrx VIP 3000 Vaporizador de isofuranoMidmark CorporationVIP 3000
Sutura de seda trançada médica (6-0)Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co.6-0Sutura
de nylon médica da ligadura (5-0)Ningbo Medical Needle Co.Sutura5-0
(1.0 F)Instrumentos AD1.0FPara cateterismo cardíaco direito
Sal de sódio pentobarbitalMerck25MGAnestesia
PowerLab multidirecional Sistema de Registro FisiológicoInstrumentos AD4/35Registre o resultado do cateterismo cardíaco direito
Balança eletrônica de precisão InstrumentoDenverTB-114 Sensor depesagem
AgulhaSepare a aorta e o tronco pulmonar
Agulha de enchimento feita por si mesma Constrição
Intubação traqueal feita por conta própria Intubaçãotraqueal 
Equipamento de microcirurgia para pequenos animaisNapoxMA-65Instrumentos cirúrgicos
Transmissão GelGuang Gong pai250MLEcocardiografia
Creme de depilação VeetReckitt BenchiserRQ / B 33 Tipo 2Remover pêlos de
camundongos Esterilizador a vapor de pressão eletrotérmica automática verticalHefei Huatai Medical Equipment Co.de LX-B50Llimpa o
instrumento ótico verticalY-HX-4AYihuapara o cateterismo do coração direito
Cateter Millar de de trava feita por conta própria O automóvel de do microscópio da cirurgia animal pequeno dos instrumentos cirúrgicos

Referências

  1. Mehra, M. R., et al. Right heart failure: toward a common language. The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart Transplantation. 33, 123-126 (2014).
  2. Sun, F., et al.

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Reimpressões e permissões

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