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Artigo de método

Modelo murino de estenose venosa central usando fístula Aortocaval com estenose de saída

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DOI:

10.3791/59540

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11 de julho de 2019

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Neste artigo

Resumo

Uma fístula aortocaval foi criada puncionando a aorta infra-renal murino através de ambas as paredes na veia inferior oca e foi seguida pela criação de um stenosis em seu saída através da ligadura parcial da veia inferior oca. Este modelo reprodutível pode ser usado para estudar a estenose venosa central.

Resumo

O stenosis venoso central é uma entidade importante que contribui à falha arteriovenosa da fístula (AVF). Um modelo murino de AVF foi modificado para criar uma ligadura parcial da veia cava inferior (IVC) na saída da fístula, imitando o stenosis venoso central. Os aspectos técnicos deste modelo são introduzidos. A aorta e o IVC são expostos, seguindo uma incisão abdominal. A aorta infra-renal e o IVC são dissecados para o aperto proximal, e a aorta longe do ponto de origem é expor para a punctura. O IVC no ponto médio entre a veia renal esquerda e a bifurcação aórtica é dissecado com cuidado para coloc um 8-0 sutura o IVC. Após o aperto da aorta e da VCI, uma fav é criada perfurando a aorta infra-renal através de ambas as paredes para o IVC com uma agulha de 25 G, seguida de ligando um cateter intra-venoso (IV) de 22 G e IVC juntos. O cateter é então removido, criando uma estenose venosa reprodutível sem oclusão. A aorta e o IVC são apalpe após ter confirmado o hemostasis preliminar. Este modelo novo do stenosis da veia central é fácil de executar, reprodutível, e facilitará estudos na falha de AVF.

Introdução

As fístulas arteriovenosas (fav) são os acessos mais comuns para hemodiálise, com patência superior e infecção reduzida em comparação com outros acessos, como enxertos ou cateteres venosos centrais. No entanto, até 60% das AVF não amadurecem1,2,3; uma revisão sistemática recente relatou que as taxas preliminares do patência em 1 ano eram somente 60%4. A estenose ao longo do fluxo venoso causa predominantemente falência da maturação da fav5,6. Existem certos locais característicos propensos a es....

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Protocolo

Todos os experimentos foram realizados com a aprovação do Comitê institucional de cuidados e uso de animais da Universidade de Yale (IACUC).

1. anestesia e procedimentos pré-operatórios

  1. Esterilizar todos os instrumentos cirúrgicos e materiais por autoclavagem. Ligue o dispositivo de suporte térmico para ter a certeza de que está quente (40 – 42 ° c).
  2. Coloc um rato velho de 9-11-Week C57Bl/6 em uma câmara acrílica da indução e anestesiá-la com o isoflurano vaporizado de 2,5% e o oxigênio de 0,8 L/min. A indução anestésica demora cerca de 3 min.
  3. Retire o rato da câmara. Confirme um plano profundo da anestesia por....

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Resultados

Os ratos machos submeteram-se à operação mencionada acima para criar um AVF e um stenosis de IVC. Os ratos do controle submeteram-se somente à laparotomia e à dissecção dos tecidos que cercam o IVC, por exemplo, um procedimento Sham, ou somente a criação de um stenosis de IVC sem criação simultânea de um AVF.

O IVC foi observado com ultrassonografia Doppler no 7º dia após o procedimento cirúrgico (Figura 2

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Discussão

O modelo murino AVF tem sido utilizado para estudar os mecanismos básicos e eventos moleculares que levam à maturação da fav13,14. Neste estudo, nós modificamos um modelo murino estabelecido de AVF para criar um modelo murino novo da fístula do aortocaval com um stenosis de IVC no intervalo da saída da fístula. Nosso modelo da ligadura é similar a diversos modelos murino previamente descritos que usam a ligadura vascular. Um modelo murino de trombose venosa profu.......

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Divulgações

Os autores não têm nada a revelar.

Agradecimentos

Este trabalho foi apoiado pelo Instituto Nacional de saúde dos EUA (NIH) Grant R01-HL128406; o departamento de Estados Unidos da Veterans Affairs laboratório biomédico pesquisa e desenvolvimento programa mérito Review Award I01-BX002336; bem como com os recursos e o uso de instalações no VA Connecticut Healthcare System, West Haven, CT.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Cabeça de varredura de 20-60 MhzVisualSonics Inc.RMV-704
8-0 Micro Sutura Estéril, 6mm (140 µ), 3/8 Círculo, Agulha de Ponta TAPAROSuturaT06A08N14-13suturas de monofilamento de poliamida
Câmara de Indução, 2 Litros
3.75"W x 9.00"D x 3.75"H
VetEquip941444
Isoflo, Isoflurano líquidoZoetis26675-46-7
Camundongos, C57BL/6JThe Jackson Laboratório664
Pet Bed Microondas Almofada de AquecimentoSnuggle Safe6250
Agulha PrecisionGlide 25GBD305122
Surflo Cateter IV 22GTerumoSR-OX2225CA0,85 mm de diâmetro externo
Braçadeira vascularRoboz Instrumento CirúrgicoRS-5424
Vevo770 Sistemade Imagem de Alta ResoluçãoVisualSonics Inc.770

Referências

  1. Dember, L. M., et al. Effect of clopidogrel on early failure of arteriovenous fistulas for hemodialysis: a randomized controlled trial. JAMA. 299 (18), 2164-2171 (2008).
  2. Dixon, B. S. Why don't fistulas mature? Kidney International. 70....

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Reimpressões e permissões

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