Artigo de método

Palatável dieta de estilo ocidental cafeteria como um método confiável para modelagem de dieta induzida obesidade em roedores

DOI:

10.3791/60262

⸱

1 de novembro de 2019

 ,  , 
1Department of Pharmacology, School of Medical Sciences, UNSW Sydney

* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

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Este protocolo descreve o uso de uma dieta altamente palatável, de estilo ocidental cafeteria para modelar excessos e obesidade em roedores. Aqui, fornecemos um esboço detalhado da seleção, preparação e medição de alimentos e explicamos fatores metodológicos que ajudam na geração de um fenótipo robusto e reproduzível.

Resumo

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A obesidade está aumentando rapidamente na incidência em países desenvolvidos e em desenvolvimento e é conhecida por induzir ou exacerbar muitas doenças. A carga de saúde da obesidade e suas condições de comórbida destacam a necessidade de uma melhor compreensão de sua patogênese, mas as restrições éticas limitam os estudos em humanos. Para este fim, modelos externamente válidos de obesidade em animais de laboratório são essenciais para a compreensão do excesso de peso e obesidade. Enquanto muitas espécies têm sido usadas para modelar a gama de mudanças que acompanham a obesidade em seres humanos, roedores são mais comumente usados. Nosso laboratório desenvolveu uma dieta de cafeteria de estilo ocidental que consistentemente leva a um ganho de peso considerável e marcadores de doença metabólica em roedores. A dieta expõe roedores a uma variedade de alimentos altamente palatáveis para induzir hiperfagia, modelando o ambiente alimentar ocidental moderno. Esta dieta induz rapidamente o ganho de peso e o acúmulo de gordura corporal em ratos, permitindo o estudo dos efeitos de excessos e obesidade. Enquanto a dieta cafeteria pode não fornecer o mesmo controle sobre o perfil de macronutrientes e micronutrientes como purificado dietas ricas em gordura ou alto teor de gordura, alto teor de açúcar, a dieta cafeteria normalmente induz um fenótipo metabólico mais grave do que o observado com purificado dietas e está mais de acordo com distúrbios metabólicos observados na população humana com sobrepeso e obesidade.

Introdução

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A obesidade e suas comorbidades relacionadas dão uma enorme contribuição para a carga de saúde global1 e respondem por 7% da carga da doença na Austrália2. Um dos principais fatores de risco para a obesidade é o consumo de dietas insalubres que são ricos em gordura saturada e carboidratos refinados, e pobre em fibras e micronutrientes3. Identificar alvos para intervenção terapêutica para obesidade requer modelos que possam avaliar sistematicamente os efeitos em múltiplos sistemas bioquímicos e fisiológicos. Nossa compreensão da etiologia da obesidade tem sido avançada substancialmente pelo trabalh....

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Protocolo

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O protocolo descrito aqui foi otimizado para uso em ratos. Embora tenhamos usado a dieta CAF com sucesso em camundongos17,18, moagem de alimentos moles pode introduzir mais erros reduzindo a confiabilidade da ingestão de alimentos medidas19. Este protocolo é aprovado pelo Animal Care and Ethics Committee da Universidade de Nova Gales do Sul e está em conformidade com as diretrizes australianas para o uso e cuidados de animais para fins científicos (8ª Edição) fornecidas pela Australian National Health e Conselho de Pesquisa Médica.

Nota: Muit....

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Resultados

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Como mostrado na Figura 2A, a alimentação dietética caf produz um aumento de 2,5 vezes na ingestão de energia em relação aos controles de ração, com base em dados de três coortes de ratos machos Sprague Dawley, que é consistente ao longo de 6 semanas. Outros estudos confirmaram que essa extensão da hiperfagia é sustentada ao longo de 10 experimentosde 21 e 16semanas 22 semanas. A curva de peso(Figura 2

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Discussão

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Ao expor ratos a uma variedade de alimentos altamente palatáveis ricos em gordura e açúcar, o protocolo de dieta CAF descrito aqui fornece um modelo confiável e robusto da chamada "dieta ocidental" consumida por muitas pessoas. A hiperfagia- avaliada como um aumento significativo na ingestão de energia em relação aos controles - é observada nos primeiros 24 h de exposição, com diferenças estatisticamente significativas de peso corporal observadas em semanas. Assim, a CAF é um modelo eficaz de obesidade induzida pela diet.......

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Divulgações

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Os autores não declaram interesses concorrentes ou divulgações.

Agradecimentos

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O trabalho foi apoiado por subvenções do projeto NHMRC (#568728, #150262, #1126929) à MJM.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
de plástico de 2-5 LPara preparar solução de sacarose a 10%, se aplicável
Recomenda-sea utilização de
CongeladorPara armazenar alimentos CAF
Ração para roedores de manutenção Gordon'sGordon's Specialty Stockfeeds (Austrália)Dieta de manutenção utilizada no nosso laboratório (14 kJ/g; 65% de hidratos de carbono, 13% de gordura e 22% de proteína, bem como energia)
Grandes caixasTodos os itens acima podem ser armazenados em recipientes para fácil acesso
ColherPara preparação de dieta CAF
MicroondasPara descongelamento de dieta CAF (quando necessário)
FacaPara preparação de dieta CAF
Toalhade papelImportante para limpar as superfícies de trabalho e a faca durante a preparação do CAF
RecipientesEstes são para pesar alimentos CAF em dias de medição
FunilPara preparar solução de sacarose a 10%, se aplicável
LuzComo a dieta CAF deve ser atualizada perto do início da fase escura todos os dias, uma luz vermelha ajudará ao trabalhar no escuro
Latas de atumPor apresentar alimentos CAF 'mais úmidos'. Recipientes de plástico também podem ser adequados
Pesar recipiente x 3Recipientes separados devem ser usados para pesar ratos, ração e garrafas e alimentos CAF
BalançaRecomenda-se sensibilidade a 0,1 g
AçúcarPara solução de sacarose a 10%, se aplicável
Garrafa plástico de armazenamento de plástico grande não serrilhada de plástico de plástico vermelha branco

Referências

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Swinburn, B. A., et al. The Global Syndemic of Obesity, Undernutrition, and Climate Change: The Lancet Commission report. Lancet. 393 (10173), 791-846 (2019).
  2. Australian Institute of Health and Welfare. Vol. Cat. no. PHE 215. , AIHW. Canberra. (2017).
  3. GBD Die....

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