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Artigo de método

Uma abordagem cirúrgica revisada para induzir hidrops endoglicêsticos na Cobaia

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DOI:

10.3791/60597

4 de junho de 2020

Neste artigo

Resumo

Este artigo demonstra uma abordagem extradural para obliterar o saco endoglifático da cobaia e ferir o ducto endoglicêtico com uma picareta fina, a fim de induzir hidrops endolímfaticos experimentais.

Resumo

Hidrops endoglicêmicos é um alargamento da mídia scala que é mais frequentemente associado à doença de Meniere, embora o mecanismo fisiophysiológico permaneça incerto. Para estudar adequadamente os atributos dos hidrops endoglifáticos, como as origens da perda auditiva de baixa frequência, é necessário um modelo confiável. A cobaia é um bom modelo porque ouve nas regiões de baixa frequência que são putativamente afetadas por hidrops endoglifáticos. Pesquisas anteriores demonstraram que hidrops endoglimáticos podem ser induzidos cirurgicamente através de abordagens intradural ou extradural que envolvem perfuração no ducto endoglifático e sac. No entanto, se era possível criar um modelo de hidrops endoglifático usando uma abordagem extradural que evitasse perfurações perigosas no ducto endoglifático e no saco era desconhecido. O objetivo deste estudo foi demonstrar uma abordagem extradural revisada para induzir hidrops endoglifáticos experimentais aos 30 dias pós-operatórios, obliterando o sac endoglifático e ferindo o ducto endoglimático com uma picareta fina. O tamanho da amostra consistia de sete cobaias. Foram feitas medições funcionais de audição e posteriormente colhidas ossos temporais para análise histológica. A abordagem teve uma taxa de sucesso de 86% na obtenção de hidrops endoglifáticos. O risco de vazamento de fluido cefalorraquidiano era mínimo. Não ocorreram óbitos ou lesões perioperatórias no canal semicircular posterior. O método apresentado demonstra uma maneira segura e confiável de induzir hidrops endoglifáticos em um ponto de tempo relativamente rápido de 30 dias. As implicações clínicas são que o método apresentado fornece um modelo confiável para explorar ainda mais as origens da perda auditiva de baixa frequência que podem ser associadas a hidrops endolímfas.

Introdução

Hidrops endoglicêmicos é um alargamento da mídia scala. A presença de hidrops endoglifáticos pode ser medida utilizando-se a área transversal da mídia scala. Acredita-se que hidrops endoglifáticos clínicos podem estar associados à perda auditiva sensorial de baixa frequência, como a vista na doença de Meniere. Mas a origem da perda auditiva ainda não está clara. Para estudar adequadamente as origens da perda auditiva de baixa frequência associada aos hidrops endoglifáticos, é necessário um modelo confiável.

Em 1965, Kimura e Schuknecht descreveram como induzir hidrops endolímfaticos na cobaia usando uma abordagem intradural

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Protocolo

Todos os procedimentos listados imediatamente abaixo na seção Protocolo foram conduzidos conforme descrito nos protocolos aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Universidade de Washington em St. Louis.

1. Indução anestésico e monitoramento de sinais vitais

NOTA: Este estudo utilizou cobaias pigmentadas de CEPA NIH obtidas de uma colônia de reprodução interna.

  1. Use cobaias de ambos os sexos, pesando pelo menos 350 g.
  2. Coloque o cobaia em uma isolette de aquecimento neonatal e dê uma mistura de cetamina/xilazina intraperitoneal (50 mg/kg de cetamina e ....

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Resultados

O método apresentado utilizou uma abordagem extradural para obliterar o sac endoglifático e ferir o ducto endolímfa com uma picareta fina em sete cobaias composta por dois machos e cinco fêmeas. A duração média da cirurgia foi de 2 horas, da incisão ao fechamento. O tempo total da broca variou de 5 a 10 minutos. Até 4 horas era necessário para que a cobaia emergisse totalmente da anestesia. Não houve mortes intraoperatórias ou pós-operatórias na amostra. Não houve ferimentos no canal semi.......

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Discussão

O método extradural apresentado teve uma taxa de sucesso de 86% na obtenção de hidrops endoglifáticos histologicamente confirmados e perda auditiva de baixa frequência. O método alcançou de forma confiável evidências histológicas de hidrops endoglifáticos até o dia 30 pós-operatório, consistente com estudos anteriores que utilizaram uma abordagem intradural2. A significância do método em relação aos métodos existentes é que não é necessário um vazamento de CSF, removendo assim uma variável potenci.......

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Divulgações

Os autores não têm nada a revelar.

Agradecimentos

Agradecemos a Shannon M. Lefler pela ajuda com os números e a Tabela de Materiais. A pesquisa relatada nesta publicação contou com o apoio do Instituto Nacional de Surdez e Outros Transtornos da Comunicação dos Institutos Nacionais de Saúde, por meio da bolsa de formação "Desenvolvimento de Clínico/Pesquisadores em Ent Acadêmico", prêmio número T32DC000022 (C.V.V.) e R01 DC014997 (J.T.L). O conteúdo é de responsabilidade exclusiva dos autores e não representa necessariamente as opiniões oficiais dos Institutos Nacionais de Saúde.

....

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Seringa de 12 mLLobo Henke-Sass5100-X00V0
Seringa de 1 mL e 3 mLBD Precisão (Encomendado da Fischer Sci)14-826-87 15859152
Agulha de calibre borboleta 27,5Conjunto de Infusão Alada Terumo Surflo, Terumo Corporation, Japão) (Encomendado da McKesson)448407
Sutura 4-0McKesson1034507
Esponjas de gaze 4 x 4Dukal (Formulário ordenado McKesson)374454
Seringa de 60 mLFisher Sci22-031-375
Broca otológica AnspachAnspachSC2100
AtipamezoleZoetis107204-6
AutoclaveFisher sci15-103-0508
Sacolas de autoclaveMcKesson524881
Separador de baionetaOlympusAL 130564
Bupivicaineauro Medics Pharma555150-169-10
Drapeado estéril transparente3M1020
Bolinhas de algodãoFisherbrand (encomendado da Fisher Sci)22-456-885
cotonetesMcKesson508716
Ráboras diamantadas #3, #2, #1 e #0,5 mmAnspachQD8-3SD; QD8-2SD; QD8-1SD; QD8-05SD
Absorvente de fraldasMcKesson945330
Lâmina descartável 15Swann-Morton0305
enrofloxacinaHospira0409-4888-01
epinefrinaMcKesson63739-0456
Pomada para os olhosProdutos Dechra Vet17033-211-38
Elevador mais livreGrace Medical215100FX
GelfoamPfizer (Pedido da McKesson)82830
Aparadores de cabeloOster Power Pro Sem Fio (pedido na Amazon)078400-020-000
Esfoliação de iodoPurdue Pharma (pedido da mcKesson)521243
Tesoura de írisOlympusCL-542114
KetaminaHenry Schein Saúde Animal55853
Anilhões lactadosB. Braun Medical (pedido da McKesson)186662
faca lanceta de RosenGrace Medical151100FXreferida como curette no texto
lubrificanteMilex (encomendado da Cooper Surgical)MX5030
fita de máscara3M (encomendado na Fisher Sci19047259
Bacia retangular metálicaAmazonB07NQDBC6T
Suporte para agulhasOlympusCR 213015-ENT
agulhas: calibre 27, calibre 18BD Precisão (Encomendado da Fischer Sci)14-826-48 14-826-5D
Isollete de aquecimento neonatalSistemas de Suporte de Vida Aéreo731-1800
Microscópio operadorCarl ZeissOPMI pico
Cilindro de oxigênioAirGasOX USP200
Saturação de pulsoCapnoTrue (Pedido da Medacx)M-3090112001
Sonda retal com manta térmicaAparato de HarvardSonda: PY2 50-7217 Cobertor de Aquecimento: PY2 50-7214
Suporte vermelho para o corpoLaboratório LichtenhanN/AProduto interno
Ângulo retoOlympusBV-230337
Agulha de RosenOlympusAM-130566personalizado, é o instrumento que uso para rasgar o saco
Tubos de borracha para administração O2Fisher Sci14-171-104
Filme plásticoFisher SciNC9617977
Suporte de cabeça estereotáxicoOficina de Máquinas de Instrumentos WUSTLN/AProduto interno
Cortinas estéreisSaúde Cardinal7553
tubo de sucção por BarãoGrace Medical034903FX 034905FX#3 e #5 Sucção
Pinças teciduais Adson BrownGrace Medical325112FX
Retrator WeitlanderMedicina Olympus GraceBL200011 100313FX
xilazinaAkorn59399-110-20

Referências

  1. Kimura, R. S., Schuknecht, H. F. Membranous Hydrops in the Inner Ear of the Guinea Pig after Obliteration of the Endolymphatic Sac. Pract oto-rhino-laryng. 27, 343-354 (1965).
  2. Salt, A. N., DeMott, J.

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Reimpressões e permissões

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