As respostas comportamentais defensivas dependem da intensidade da ameaça, proximidade e contexto de exposição. Com base nesses fatores, desenvolvemos um paradigma de condicionamento clássico que provoca transições claras entre congelamento condicionado e comportamento de voo dentro de indivíduos. Esse modelo é crucial para a compreensão das patologias envolvidas em ansiedade, pânico e transtornos de estresse pós-traumático.
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Artigo de método
Um novo paradigma de condicionamento do medo pavloviano para estudar o congelamento e o comportamento de voo
Neste artigo
Resumo
Resumo
Comportamentos relacionados ao medo e à ansiedade contribuem significativamente para a sobrevivência de um organismo. No entanto, respostas defensivas exageradas à ameaça percebida são características de vários transtornos de ansiedade, que são a forma mais prevalente de doença mental nos Estados Unidos. A descoberta dos mecanismos neurobiológicos responsáveis pelos comportamentos defensivos ajudará no desenvolvimento de novas intervenções terapêuticas. O condicionamento do medo pavloviano é um paradigma laboratorial amplamente utilizado para estudar o aprendizado e a memória relacionados ao medo. Uma grande limitação dos paradigmas tradicionais de condicionamento do medo pavloviano é que o congelamento é o único comportamento defensivo monitorado. Recentemente desenvolvemos um paradigma de condicionamento do medo pavloviano modificado que nos permite estudar tanto o congelamento condicionado quanto o comportamento de fuga (também conhecido como fuga) dentro de indivíduos individuais. Este modelo emprega choques de pé de maior intensidade e maior número de pares entre o estímulo condicionado e o estímulo incondicionado. Além disso, esse paradigma de voo condicionado utiliza a apresentação serial de estímulos auditivos de tom puro e ruído branco como estímulo condicionado. Seguindo o condicionamento nesse paradigma, os ratos exibem comportamento de congelamento em resposta ao estímulo de tom e respostas de voo durante o ruído branco. Esse modelo de condicionamento pode ser aplicado ao estudo de transições rápidas e flexíveis entre as respostas comportamentais necessárias para a sobrevivência.
Introdução
O medo é uma resposta adaptativa evolutivamente conservada a uma ameaça imediata1,2. Embora os organismos possuam respostas defensivas inatas a uma ameaça, associações aprendidas são cruciais para obter respostas defensivas apropriadas a estímulos preditivos de perigo3. A desregulação nos circuitos cerebrais que controlam as respostas defensivas provavelmente contribuirá para reações mal adaptativas associadas a múltiplos transtornos de ansiedade debilitantes, como transtorno de estresse pós-traumático (TEPT), transtorno de pânico4e fobias específicas
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Protocolo
As seguintes etapas/procedimentos foram conduzidos de acordo com as diretrizes institucionais após aprovação do Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Universidade de Tulane.
1. Preparação de ratos
- Use camundongos adultos do sexo masculino e/ou feminino com idade entre 3 e 5 meses. No presente estudo, utilizamos camundongos C57BL/6J machos obtidos do Laboratório Jackson, mas qualquer cepa de rato de um fornecedor respeitável pode ser usada.
- Pelo menos uma semana antes do experimento, abriga todos os ratos individualmente em um ciclo claro/escuro de 12:12 h ao longo do estudo. Forneça aos ratos acesso a ....
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Resultados
Conforme descrito no diagrama(Figura 1A),a sessão começa com pré-exposição (Dia 1), seguida pelo condicionamento do medo (Dias 2 e 3), e depois extinção ou recuperação (dia 4).
As apresentações do SCS na sessão de pré-exposição (Dia 1) não provocaram voo ou resposta de congelamento nos camundongos(Figura 2A-2B). A análise comportamental durante o condicionamento (Dias 2 e 3) revelou que o componente de tom do SCS aume.......
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Discussão
Os parâmetros de som e choque descritos são elementos importantes deste protocolo. É fundamental, portanto, testar a amplitude de choque e o nível de pressão sonora antes de iniciar os experimentos. Estudos de condicionamento do medo normalmente usam níveis de pressão sonora de 70-80 dB e intensidade de choque de 0,1-1 mA18; assim, os parâmetros descritos estão dentro dos limites dos paradigmas tradicionais de condicionamento do medo. Em um experimento de controle anterior de CS (sem choque de pé).......
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Divulgações
Os autores não têm nada a revelar.
Agradecimentos
Este trabalho foi apoiado pelo Conselho de Regentes da Louisiana através do Fundo de Apoio ao Conselho de Regentes (LEQSF(2018-21)-RD-A-17) e pelo Instituto Nacional de Saúde Mental dos Institutos Nacionais de Saúde sob o prêmio número R01MH122561. O conteúdo é de responsabilidade exclusiva dos autores e não representa necessariamente as opiniões oficiais dos Institutos Nacionais de Saúde.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Contexto | Cilindro de plexiglass 30 X 30 cm | ||
| Caixa de condicionamento do medo | Med Associates, Inc. | VFC-008 | 25 X 30 X 35 cm dimensões |
| Gerador de áudio | Associados Médicos, Inc. | ANL-926 | |
| Shocker | Med Associates Inc. | ENV-414S | Alto-falante de grade de aço inoxidável |
| Med | Associates, Inc. | ENV-224AM | Adequado para tom puro e ruído branco |
| Camundongos C57/BL6J | Jackson laboratory, EUA | 664 | Envelhecido 3-5 meses |
| Software Cineplex (Editor/estúdio) | Plexon | CinePlex Studio v3.8.0 | Para rastreamento de vídeo e análise de pontuação comportamental |
| Software MedPC V | Med Associates, Inc. | SOF-736 | |
| Neuroexplorer | Plexon | Usado para extrair os dados de congelamento pontuados no PlexonEditor | |
| GraphPad Prism 8 | GraphPad Software, Inc. | Versão 8 | Software de análise estatística |
Referências
- Gross, C. T., Canteras, N. S. The many paths to fear. Nature Reviews Neuroscience. 13 (9), 651-658 (2012).
- LeDoux, J. Rethinking the Emotional Brain. Neuron. , (2012).
- Maren, S.
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Reimpressões e permissões
