Mudanças de temperatura incremental para reprodução e desova máxima em Astyanax mexicanus

Summary

Este artigo descreve as condições básicas de laboratório e protocolos para um regime de temperatura incremental para estimular a desova máxima no tetra mexicano Astyanax mexicanus, que é um modelo emergente para estudos de desenvolvimento e evolutivos.

Abstract

O tetra mexicano, Astyanax mexicanus,é um sistema modelo emergente para estudos em desenvolvimento e evolução. A existência de morfas de superfície de olhos (peixes superficiais) e cavernas cegas (peixes-caverna) nesta espécie apresenta uma oportunidade para interrogar os mecanismos subjacentes à evolução morfológica e comportamental. Os peixes das cavernas desenvolveram novos traços construtivos e regressivos. As mudanças construtivas incluem aumentos nas papilas gustativas e mandíbulas, órgãos sensoriais de linha lateral e gordura corporal. As mudanças regressivas incluem perda ou redução de olhos. pigmentação de melanina, comportamento de escolaridade, agressão e sono. Para interrogar experimentalmente essas mudanças, é crucial obter um grande número de embriões gerados. Desde que os peixes originais da superfície de A. mexicanus e peixes das cavernas foram coletados no Texas e no México na década de 1990, seus descendentes têm sido rotineiramente estimulados a procriar e desovar um grande número de embriões bimestriamente no laboratório Jeffery. Embora a reprodução seja controlada pela abundância e qualidade dos alimentos, ciclos claro-escuros e temperatura, descobrimos que as mudanças de temperatura incrementais desempenham um papel fundamental no estímulo à desova máxima. O aumento gradual da temperatura de 72 °F para 78 °F nos primeiros três dias de uma semana de reprodução fornece dois ou três dias consecutivos de desova com números máximos de embriões de alta qualidade, que é seguido por uma diminuição gradual da temperatura de 78 °F para 72 °F durante os últimos três dias da semana de desova. Os procedimentos mostrados neste vídeo descrevem o fluxo de trabalho antes e durante uma semana de reprodução laboratorial para desova estimulada pela temperatura incremental.

Introduction

O teleost Astyanax mexicanus tem uma forma de habitação superficial (peixes superficiais) e muitas diferentes cavernas cegas (peixes das cavernas)^{formam 1,2}. Os peixes das cavernas evoluíram na escuridão perpétua e sob limitações alimentares, resultando no aparecimento de novos traços construtivos e regressivos³. Os traços construtivos incluem aumentos no gosto e tamanho da mandíbula, órgãos sensoriais da linha lateral e reservas de gordura. Os traços regressivos incluem a perda ou redução da pigmentação de melanina, olhos e comportamentos, como sono, escolaridade e agressão. U....

Protocol

Este procedimento foi aprovado pelas diretrizes de Cuidados Institucionais de Animais da Universidade de Maryland, College Park (Atualmente IACUC 469 #R-NOV-18-59; Projeto 1241065-1).

Figura 1. Calendários durante uma semana de reprodução e uma semana sem reprodução. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

1. Segunda-feira

Results

Nós geralmente criamos e desoríamos os descendentes de peixes superficiais originalmente coletados em Nacimiento del Rio Choy em San Luis Potosi, México (peixe superficial rio Choy) e San Solomon Springs em Balmorhea State Park, Texas (peixes de superfície do Texas) e peixes-caverna derivados de Cueva de El Pachón (peixe da caverna Pachón) em Tamaulipas, México, e Cueva de los Sabinos (los Sabinos peixe das cavernas) e Sotano de la Tinaja (peixe da caverna Tinaja) em San Luis Potosi México.

Ao.......

Discussion

Astyanax mexicanus é um novo modelo biológico que gera com frequência e pode ser criado facilmente no laboratório^1,2. Como estamos interessados nos mecanismos de desenvolvimento que estão por trás de mudanças evolutivas em peixes das cavernas A. mexicanus, a produção e o uso de embriões é vital para nossos objetivos de pesquisa. O objetivo principal de manter um estoque adulto de peixes é a produção de embriões e frituras jovens para uso em expe.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Blackworms	Eastern Aquatics, Lancaster, PA	Nenhum
Redes de reprodução	feitos sob medida
	AquaCave Lake Forest, IL.	Nenhum
kit de teste colorimétrico	Petco	SKU:11916	API Kit de teste de pH de água doce
Flocos de gema de ovo	Pentair, Minneapolis, MN	Nenhum
Fingerbowls	Carolina Biological Supply	741004	pratos de cultura, 4,5 pol, 250 mL
Redes portáteis	Qualquer incubadora de pet shop
para embriões	Fisher Scientific	51-029-321HPM	405 L
Sais marinhos oceânicos instantâneos	Spectrum Brands, Blacksburg, VA	Nenhum
Azul de Metileno	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO	M9140
Pipetas Pasteur	Fisher Scientific	13-678-20	5.75 pol.
Solução de imersão líquida	Qualquer Pet Store
Nutrafin Cycle	Amazon	Nenhum	Impulso bacteriano
Geladeira para alimentação ao vivo	Qualquer fonte
Estereomicroscópio	Qualquer fonte
Termômetro	Qualquer fonte
Tetra Tropical Crisps	Spectrum Brands, Blacksburg, VA	Nenhum