Um método simples de secção seca para obter seção de resina de tamanho inteiro e suas aplicações

Jiajing Qiu; Yinhui Ren; Lingxiao Zhao; Biao Zhang; Cunxu Wei

doi:10.3791/61822

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Artigo de método

Um método simples de secção seca para obter seção de resina de tamanho inteiro e suas aplicações

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DOI:

10.3791/61822

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23 de janeiro de 2021

Jiajing Qiu^*¹^,² , Yinhui Ren^*¹^,² , Lingxiao Zhao¹^,² , Biao Zhang¹^,² , Cunxu Wei¹^,²

¹Key Laboratory of Crop Genetics and Physiology of Jiangsu Province/Jiangsu Key Laboratory of Crop Genomics and Molecular Breeding, Yangzhou University, ²Co-Innovation Center for Modern Production Technology of Grain Crops of Jiangsu Province/Joint International Research Laboratory of Agriculture & Agri-Product Safety of the Ministry of Education, Yangzhou University

^* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

Esta técnica permite a preparação rápida e simples da seção de resina de tamanho inteiro para a observação e análise de células, grânulos de amido e corpos proteicos em diferentes regiões da semente.

Resumo

A morfologia, o tamanho e a quantidade de células, grânulos de amido e corpos proteicos em sementes determinam o peso e a qualidade das sementes. São significativamente diferentes entre diferentes regiões de sementes. Para ver as morfologias das células, grânulos de amido e corpos proteicos de forma clara, e analisar quantitativamente seus parâmetros de morfologia com precisão, a seção do tamanho de sementes é necessária. Embora a seção de parafina de todo o tamanho de sementes possa investigar o acúmulo de materiais de armazenamento em sementes, é muito difícil analisar quantitativamente os parâmetros de morfologia das células e materiais de armazenamento devido à baixa resolução da seção espessa. A seção de resina fina tem alta resolução, mas o método de secção de resina de rotina não é adequado para preparar a seção em tamanho inteiro de sementes maduras com um grande volume e alto teor de amido. Neste estudo, apresentamos um método simples de secção seca para preparar a seção de resina de todo o tamanho das sementes. A técnica pode preparar as seções de tamanho integral transversal e longitudinal de sementes em desenvolvimento, maduras, germinadas e cozidas embutidas na resina branca LR, mesmo para sementes grandes com alto teor de amido. A seção de tamanho inteiro pode ser manchada com brilho fluorescente 28, iodo e R250 azul brilhante Coomassie para exibir especificamente a morfologia de células, grânulos de amido e corpos proteicos claramente, respectivamente. A imagem obtida também pode ser analisada quantitativamente para mostrar os parâmetros de morfologia das células, grânulos de amido e corpos proteicos em diferentes regiões de sementes.

Introdução

As sementes vegetais contêm materiais de armazenamento, como amido e proteína, e fornecem energia e nutrição para as pessoas. A forma, o tamanho e a quantidade de materiais de célula e armazenamento determinam o peso e a qualidade das sementes. As células e materiais de armazenamento em diferentes regiões de sementes possuem morfologias significativamente diferentes, especialmente para algumas culturas de cereais de alta amilolose com inibição da enzima de ramificação de amido IIb^1,²^,³. Por isso, é muito importante investigar as morfologias das células e materiais de armazena....