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Acumulação e Distribuição de Microplásticos Fluorescentes nos Estágios Iniciais da Vida dos Zebrafish

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DOI:

10.3791/62117

4 de julho de 2021

Neste artigo

Resumo

Os embriões/larvas de zebrafish desenvolvem-se externamente e são opticamente transparentes. A bioacúscula de microplásticos em peixes em estágios iniciais da vida é prontamente avaliada com microesferas fluorescentes rotuladas.

Resumo

Como um novo tipo de poluente ambiental, o microplástico tem sido amplamente encontrado no ambiente aquático e representa uma alta ameaça aos organismos aquáticos. A bioacúsculação de microplásticos desempenha um papel fundamental em seus efeitos tóxicos; no entanto, como uma particulada, suas bioacúsculas são diferentes de muitos outros poluentes. Descrito aqui é um método viável para determinar visualmente o acúmulo e distribuição de microplásticos em embriões de zebrafish ou larvas usando microplásticos fluorescentes. Os embriões são expostos a diferentes concentrações (0,1, 1 e 10 mg/L) de microplásticos fluorescentes com diâmetro de 500 nm para 120 h. É mostrado nos resultados que os microplásticos podem bioacúsolar em embriões/larvas de zebrafish de forma dependente da concentração. Antes de eclodir, a fluorescência forte é encontrada ao redor do acorde embrionário; enquanto em larvas de zebrafish, o saco de gema, pericárdio e trato gastrointestinal são os principais locais acumulados de microplásticos. Os resultados demonstram a absorção e internalização de microplásticos em zebrafish em estágios iniciais da vida, o que fornecerá base para uma melhor compreensão do impacto dos microplásticos nos animais aquáticos.

Introdução

Desde a primeira sintetização na década de 1900, os plásticos são amplamente utilizados em diversos campos, resultando em rápido crescimento da produção global1. Em 2018, aproximadamente 360 milhões de toneladas de plásticos foram produzidas em todo o mundo2. Os plásticos no ambiente natural se degradarão a partículas finas devido aos processos químicos, físicos ou biológicos3. Geralmente, partículas plásticas finas <5 mm de tamanho são definidas como microplásticos4. Os microplásticos também são projetados para aplicações específicas, como microesferas de produtos cosmétic....

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Protocolo

Os zebrafish adultos são originários do Centro de Recursos de Zebrafish da China (Wuhan, China). Os experimentos foram realizados em conformidade com o guia nacional "Guia Animal Laboratorial para Revisão Ética do Bem-Estar Animal (GB/T35892-2018).

1. Coleção de embriões

  1. Mantenha os peixes em tanques de vidro de 20 L com sistema de água da torneira filtrado por carvão (pH 7.0 ± 0,2) a uma temperatura constante (28 ± 0,5 °C) em um fotoperperióduodo de 14:10 h de luz: escuro.
  2. Alimente os peixes duas vezes por dia com Artemia nauplii. Recomenda-se que o alimento seja dado no máximo 3% de peso de peixe por dia e dev....

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Resultados

A distribuição e o acúmulo de microplásticos fluorescentes são mostrados na Figura 1 e Tabela 1. Nenhuma fluorescência visível é observada no grupo não exposto (controle). No entanto, um acúmulo de fluorescência é encontrado em torno do chorão após exposição a diferentes concentrações de microplásticos (24 hpf). A fluorescência verde também é detectada em larvas, e os níveis de fluorescência parecem aumentar de forma dependente da concentração e do tempo. O saco de gema, o p.......

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Discussão

De acordo com a diretriz sobre a proteção de animais utilizados para fins científicos, como a Diretiva da UE 2010/63/UE, a permissão de ética animal não é obrigatória para um experimento com estágios iniciais de zebrafish até o estágio de ser capaz de alimentação independente (5 dias após a fertilização)17. No entanto, a melhor prática de bem-estar é importante para otimizar o uso de zebrafish, e, por exemplo, os métodos humanos de anestesia e eutanásia devem ser preocupantes. O metanossefinato et.......

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Divulgações

O autor declara não haver interesses concorrentes ou financeiros.

Agradecimentos

Este trabalho foi financiado pela Fundação Nacional de Ciência Natural da China (21777145, 22076170), e pelo Programa de Estudiosos de Changjiang e Equipe de Pesquisa Inovadora na Universidade (IRT_17R97).

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Microscópio fluorescenteNikon, JapãoEclipse Ti-S
Grânulos de poliestireno marcados com fluorescência verdePhosphorex, EUA2103A
TricaineSigma-Aldrich, EUAA5040

Referências

  1. SAPEA (Science Advice for Policy by European Academies). A Scientific Perspective on Microplastics in Nature and Society. , SAPEA. Berlin. (2019).
  2. Plastics Europe. Plastics-the facts 2019. , Plastics Europe. Brussels. (2019).
  3. Andrady, A. L.

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Reimpressões e permissões

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Etiquetas

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