Diferentes modelos de oclusão da artéria cerebral média (MCAo) são usados em pesquisas experimentais de derrame. Aqui, é descrito um modelo experimental de AVC de MCAo transitório através da artéria carótida externa (ECA), que visa imitar o AVC humano, no qual o trombo cerebrovascular é removido devido à lise espontânea de coágulo ou terapia.
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Artigo de método
Modelagem de AVC em Camundongos: Oclusão da Artéria Cerebral Média Transitória através da Artéria Carótida Externa
Neste artigo
Resumo
Resumo
O AVC é a terceira causa mais comum de mortalidade e a principal causa de incapacidade adulta adquirida nos países desenvolvidos. Até o momento, as opções terapêuticas são limitadas a uma pequena proporção de pacientes com AVC nas primeiras horas após o AVC. Novas estratégias terapêuticas estão sendo amplamente investigadas, especialmente para prolongar a janela de tempo terapêutico. Essas investigações atuais incluem o estudo de importantes vias fisiodicosiológicas após o AVC, como inflamação pós-acidente vascular cerebral, angiogênese, plasticidade neuronal e regeneração. Na última década, tem havido uma preocupação crescente com a baixa reprodutibilidade dos resultados experimentais e os achados científicos entre grupos de pesquisa independentes. Para superar a chamada "crise de replicação", são urgentemente necessários modelos padronizados detalhados para todos os procedimentos. Como um esforço dentro do consórcio de pesquisa "ImmunoStroke" (https://immunostroke.de/), propõe-se um modelo padronizado de camundongos de oclusão de artéria cerebral média transitória (MCAo). Este modelo permite a restauração completa do fluxo sanguíneo após a remoção do filamento, simulando a lise de coágulos terapêutico ou espontâneo que ocorre em grande proporção de derrames humanos. O procedimento cirúrgico deste modelo de avc "filamento" e ferramentas para sua análise funcional são demonstrados no vídeo que acompanha.
Introdução
O AVC é uma das causas mais comuns de morte e incapacidade em todo o mundo. Embora existam principalmente duas formas distintas de derrame, isquêmicas e hemorrágicas, 80-85% de todos os casos de acidente vascular cerebral são isquêmicos1. Atualmente, apenas dois tratamentos estão disponíveis para pacientes com AVC isquêmico: tratamento farmacológico com ativador de plasmininogen de tecido recombinante (rtPA) ou trombio mecânica. No entanto, devido à estreita janela de tempo terapêutico e aos critérios de exclusão múltipla, apenas um número seleto de pacientes pode se beneficiar dessas opções específicas de tratamento. Nas últimas duas décadas, ....
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Protocolo
Os experimentos relatados neste vídeo foram realizados seguindo as diretrizes nacionais para o uso de animais experimentais, e os protocolos foram aprovados pelos comitês governamentais alemães (Regierung von Oberbayern, Munique, Alemanha). Camundongos C57Bl/6J machos de dez semanas de idade foram usados e abrigados sob temperatura controlada (22 ± 2 °C), com um período de ciclo claro-escuro de 12 horas e acesso a alimentos e ad libitum de água.
1. Preparação do material e instrumentos
- Conecte a manta de calor para manter a temperatura da área de operação e a temperatura corporal do rato durante a anestesia a 37 °C. ....
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Resultados
O modelo descrito aqui é uma modificação do modelo de traçado de "filamento" comumente utilizado, que consiste em introduzir um filamento revestido de silício através do ECA para bloquear transitoriamente a origem da MCA (Figura 1). Após a remoção do filamento, apenas o fluxo sanguíneo no TCE é permanentemente cessado, permitindo a recanalização completa do CCA e do ICA. Isso permite uma reperfusão adequada do cérebro (Figura 2), semelhante à situação observada .......
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Discussão
O presente protocolo descreve um modelo experimental de avc baseado no acordo de consenso de um consórcio alemão de pesquisa multicêntrico ("ImmunoStroke") para estabelecer um modelo de MCAo transitório padronizado. O modelo transitório de MCAo estabelecido pela introdução de um filamento revestido de silício através do ECA até a origem do MCA é um dos modelos de traçado mais utilizados para alcançar a reperfusão arterial após um período de oclusão delimitado. Portanto, este procedimento pode ser considerado um modelo de.......
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Divulgações
Os autores não têm interesses concorrentes para divulgar.
Agradecimentos
Agradecemos a todos os nossos parceiros de colaboração do ImmunoStroke Consortia (FOR 2879, das células imunes à recuperação do AVC) por sugestões e discussões. Este trabalho foi financiado pela Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG, German Research Foundation) sob a Estratégia de Excelência da Alemanha no âmbito do Cluster de Munique para Neurologia de Sistemas (EXC 2145 SyNergy - ID 390857198) e sob as bolsas LI-2534/6-1, LI-2534/7-1 e LL-112/1-1.1.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| 45° rampa | H& S Kunststofftechnik | altura: 18 cm | |
| 5/0 ameaça | Pearsalls | 10C103000 | |
| Seringa | Braun | ||
| Ácido Acético | Sigma Ciências da Vida | 695092 | |
| Sistema de anestesia para isoflurano | Drager | ||
| Bepanthen pomada | Bayer | ||
| C57Bl/6J camundongos | Charles Braçadeira de | 000664 | |
| FST | 12500-12 | ||
| Clipe | FST | 18055-04 | |
| Suporte de clipe | FST | 18057-14 | |
| Cotons | NOBA Verbondmitel Danz | 974116 | |
| Cresyl violet | Sigma Life Science | C5042-10G | |
| Cryostat | Thermo Scientific CryoStarNX70 | ||
| Etanol 70% | CLN Chemikalien Laborbedorf | 521005 | |
| Etanol 96% | CLN Chemikalien Laborbedorf | 522078 | |
| Etanol 99% | CLN Chemikalien Laborbedorf | ETO-5000-99-1 | |
| Filamentos | Doccol | 602112PK5Re | |
| Pinça angular fina | 45 FST | 11251-35 | |
| Pinça fina | FST | 11252-23 | |
| Tesoura Fina | FST | 14094-11 | |
| Cola | Orechseln | BSI-112 | |
| Endurecedor Cola | Drechseln & Mehr | BSI-151 | |
| Manta de aquecimento | FHC DC Controlador | ||
| Isoflurano | Abbot | B506 | |
| Isopentano | Fluka | 59070 | |
| Cetamina | Inresa Arzneimittel GmbH | ||
| Laser Doppler | Perimed | PF 5010 LDPM, Sistema de Perifluxo 5000 | |
| Sonda Laser Doppler | Perimed | 91-00123 | |
| Tamponamento de fosfato pH salino: 7.4 | Apotheke Innestadt Uni München | P32799 | |
| Câmara de recuperação | Mediheat | ||
| Roti-Histokit meio de montagem | Roth | 6638.1 | |
| Solução salina | Braun | 131321 | |
| Bisturi | Feather | 02.001.30.011 | |
| Filamentos revestidos de silicone | Doccol | 602112PK5Re | |
| Stereomicroscópio | Leica | M80 | |
| Superfrost Plus Slides | Thermo Scientific | J1800AMNZ | |
| Vannas Spring Scissors | FST | 15000-00 | |
| Xylacine | Albrecht |
Referências
- Donnan, G. A., Fisher, M., Macleod, M., Davis, S. M. Stroke. Lancet. 371 (9624), 1612-1623 (2008).
- O'Collins, V. E., et al. 1,026 experimental treatments in acute stroke. Annals of Neurology. 59 (3), 467-477 (2006).
- Tureyen, K., Vemuganti, R., Sailor, K. A., Dempsey, R. J.
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Reimpressões e permissões
