Este protocolo descreve um modelo suíno juvenil de alotransplante ortotópico de pulmão esquerdo projetado para uso com pesquisa de PSLF. O foco é feito em técnicas anestésicas e cirúrgicas, bem como etapas críticas e solução de problemas.
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Artigo de método
Este protocolo descreve um modelo suíno juvenil de alotransplante ortotópico de pulmão esquerdo projetado para uso com pesquisa de PSLF. O foco é feito em técnicas anestésicas e cirúrgicas, bem como etapas críticas e solução de problemas.
O transplante pulmonar é o tratamento padrão-ouro para doenças pulmonares em estágio terminal, com mais de 4.600 transplantes pulmonares realizados anualmente em todo o mundo. No entanto, o transplante pulmonar é limitado pela escassez de órgãos de doadores disponíveis. Como tal, há alta mortalidade na lista de espera. A perfusão pulmonar ex situ (PESS) aumentou as taxas de utilização de pulmões de doadores em alguns centros em 15%-20%. A ESLP tem sido aplicada como um método para avaliar e recondicionar pulmões de doadores marginais e tem demonstrado resultados aceitáveis a curto e longo prazo após o transplante de pulmões de doadores com critério estendido (DCE). Modelos de transplante de animais de grande porte (in vivo) são necessários para validar os resultados da pesquisa in vitro em andamento. As diferenças anatômicas e fisiológicas entre humanos e suínos representam desafios técnicos e anestésicos significativos. Um modelo de transplante facilmente reprodutível permitiria a validação in vivo das estratégias atuais de PELP e a avaliação pré-clínica de várias intervenções destinadas a melhorar a função pulmonar do doador. Este protocolo descreve um modelo porcino de alotransplante ortotópico de pulmão esquerdo. Isso inclui técnicas anestésicas e cirúrgicas, uma lista de verificação cirúrgica personalizada, solução de problemas, modificações e os benefícios e limitações da abordagem.
O transplante pulmonar é o principal tratamento a longo prazo para a doença pulmonar terminal. Mais de 4.600 transplantes pulmonares são realizados anualmenteno mundo 1. No entanto, o transplante pulmonar atualmente apresenta limitações significativas. Por um lado, a necessidade de órgãos continua a ofuscar os doadores disponíveis. Apesar das taxas de transplante pulmonar aumentarem a cada ano desde 2012 devido aos efeitos combinados de mais candidatos sendo listados para transplante, um aumento no número de doadores e melhor uso de órgãos recuperados, a mortalidade na lista de espera para transplante não diminuiu significativamente
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Todos os procedimentos foram realizados de acordo com as diretrizes do Conselho Canadense de Cuidados com Animais e o guia para cuidados e uso de animais de laboratório. Os protocolos foram aprovados pelo comitê institucional de cuidados com animais da Universidade de Alberta. Este protocolo foi aplicado em fêmeas juvenis de porcos Yorkshire entre 35-50 kg. Os porcos são espécimes livres de patógenos e de grau alimentício. Eles são comprados do Centro de Pesquisa e Tecnologia de Suínos em Edmonton, AB, Canadá (https://srtc.ualberta.ca). Todos os indivíduos envolvidos nos procedimentos de ESLP receberam treinamento adequado em biossegurança.
1....
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Todos os resultados estão no contexto de 4 h de reperfusão após 12 h de VPN-ESLP16. Durante o explante pulmonar, há vários desfechos clínicos a serem antecipados (Figura 3). Normalmente, o porco permanecerá hemodinamicamente estável após um explante pulmonar esquerdo bem-sucedido, mas pode exigir uma infusão de baixa dose de fenilefrina (intervalo de dose: 2-10 mg/h) devido a uma resposta vasodilatadora à cirurgia. A frequência cardíaca deve atingir aproximadamente 10.......
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Várias etapas cirúrgicas críticas estão envolvidas neste protocolo, e a solução de problemas é necessária para garantir o sucesso do transplante e da avaliação pulmonar. Os pulmões suínos juvenis são incrivelmente delicados em comparação com os pulmões humanos adultos, por isso o cirurgião cirúrgico deve ser cauteloso ao manusear pulmões suínos. Isso é especialmente verdadeiro após uma corrida de 12 horas de ESLP, pois o órgão terá assumido volume de líquido e estará suscetível a lesões por manipulação excessiva. Qualque.......
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A DHF detém patentes sobre a tecnologia e métodos de perfusão de órgãos ex situ . DHF e JN são fundadores e principais acionistas da Tevosol, Inc.
Esta pesquisa é financiada em nome da Fundação Hospital Universitário.
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| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| ABL 800 FLEX Analisador de Gases Sanguíneos | Radiômetro | 989-963 | |
| Filtro Eletrostático Adulto-Pediátrico HME - Pequeno | Covidien | 352/5877 | |
| Allison Lung | Retractor Pilling | 341679 | |
| Filtro Arterial | SORIN GROUP | 01706/03 | |
| Backhaus Towel Clamp | Pilling | 454300 | |
| Albumina de Soro | Bovino MP biomedicals | 218057791 | |
| Biomedicus Bomba | Maquet | BPX-80 | |
| Broncoscópio | |||
| Abraçadeiras de Cabo - ndash; Branco 12" | HUASU International | HS4830001 | |
| Cloreto de Cálcio | Fisher Scientific | C69-500G | |
| Cooley Retrator Esternal | Pilling | 341162 | |
| CUSHING Gutschdressing Fórceps | Pilling | 466200 | |
| Debakey-Metzenbaum Dissecação | Pilling | 342202 | |
| Tesoura | Pilling | 342202 | |
| DeBakey Vascular Periférico Braçadeira | Pilling | 353535 | |
| Debakey Tecido Vascular Reto Fórceps | Pilling | 351808 | |
| D-glicose | Sigma-Aldrich | G5767-500G | |
| Tubo Endotraqueal de Gota | |||
| Bomba de Infusão BIO-PROBE | TX 40 | ||
| Baxter | AS50 | ||
| Inspire 7 M Oxigenador de Membrana de Fibra Oca | GRUPO SORIN K190690 | ||
| Conector de Tubulação de Interceptação 3/8" x 1/2" | Tubulação de Interceptação Medtronic | 6013 | |
| 1/4" x 1/16" x 8'Tubulação | Medtronic | 3108 | |
| 3/8" x 3/32" x 6'Medtronic | 3506 | ||
| Laringoscópio | N/A | N/A | Feito sob medida com lâmina de 10 polegadas |
| Metzenbaum Tesoura de Dissecação | Pilling | 460420 | |
| Tanque de Dióxido de Carbono Médico | Praxair | 5823115 | |
| Tanque de Oxigênio Médico | Praxair | 2014408 | |
| Tanque de Nitrogênio Médico | Praxair | NI MK | |
| Mosquito | Clamp Pilling | 181816 | |
| Harken Auricle Clamp | |||
| Organ Chamber | Tevosol | ||
| PlasmaLyte A | Baxter | TB2544 | |
| Poole Tubo de Sucção | Pilling | 162212 | |
| Fosfato de Potássio | Fischer Scientific | P285-500G | |
| PERFADEX Plus | XVIVO | 19811 | |
| Satinsky Clamp | Pilling | 354002 | |
| Scale | TANITA | KD4063611 | |
| Membrana de Suporte de Silício | Tevosol | ||
| Bicarbonato de Sódio | Sigma-Aldrich | 792519-1KG | |
| Cloreto de Sódio 0,9% | Baxter | JB1324 | |
| Sorin XTRA Cell Saver | SORIN GROUP | 75221 | |
| Serra esternal | Stryker | 6207 | |
| Transdutor de pressão Kls Martin | ME411 | ||
| Cateter venoso central de dois lúmens | |||
| Pilling | 351377 | ||
| Willauer-Deaver Retractor | Pilling | 341720 | |
| Yankauer Tubo de Sucção | Pilling | 162300 | |
| 0 ETHIBOND Verde 1X36" Endo Loop 0 | ETHICON | D8573 | |
| 0 PDS II CP-1 2x27" | ETHICON | Z467H | |
| 1 VICRYL MO-4 1x18" | ETHICON | J702D | |
| 2-0 SILK Preto 12" x 18" Fios | ETHICON | SA77G | |
| 4-0 PROLENE Azul TF 1x24" | ETHICON | 8204H | |
| 6-0 PROLENE Azul BV 2x30" | Agulha | ||
| calibre 21 |
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