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Artigo de método

Transplante ortotópico de pulmão esquerdo em modelo suíno juvenil para PESL

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DOI:

10.3791/62979

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14 de fevereiro de 2022

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Neste artigo

Resumo

Este protocolo descreve um modelo suíno juvenil de alotransplante ortotópico de pulmão esquerdo projetado para uso com pesquisa de PSLF. O foco é feito em técnicas anestésicas e cirúrgicas, bem como etapas críticas e solução de problemas.

Resumo

O transplante pulmonar é o tratamento padrão-ouro para doenças pulmonares em estágio terminal, com mais de 4.600 transplantes pulmonares realizados anualmente em todo o mundo. No entanto, o transplante pulmonar é limitado pela escassez de órgãos de doadores disponíveis. Como tal, há alta mortalidade na lista de espera. A perfusão pulmonar ex situ (PESS) aumentou as taxas de utilização de pulmões de doadores em alguns centros em 15%-20%. A ESLP tem sido aplicada como um método para avaliar e recondicionar pulmões de doadores marginais e tem demonstrado resultados aceitáveis a curto e longo prazo após o transplante de pulmões de doadores com critério estendido (DCE). Modelos de transplante de animais de grande porte (in vivo) são necessários para validar os resultados da pesquisa in vitro em andamento. As diferenças anatômicas e fisiológicas entre humanos e suínos representam desafios técnicos e anestésicos significativos. Um modelo de transplante facilmente reprodutível permitiria a validação in vivo das estratégias atuais de PELP e a avaliação pré-clínica de várias intervenções destinadas a melhorar a função pulmonar do doador. Este protocolo descreve um modelo porcino de alotransplante ortotópico de pulmão esquerdo. Isso inclui técnicas anestésicas e cirúrgicas, uma lista de verificação cirúrgica personalizada, solução de problemas, modificações e os benefícios e limitações da abordagem.

Introdução

O transplante pulmonar é o principal tratamento a longo prazo para a doença pulmonar terminal. Mais de 4.600 transplantes pulmonares são realizados anualmenteno mundo 1. No entanto, o transplante pulmonar atualmente apresenta limitações significativas. Por um lado, a necessidade de órgãos continua a ofuscar os doadores disponíveis. Apesar das taxas de transplante pulmonar aumentarem a cada ano desde 2012 devido aos efeitos combinados de mais candidatos sendo listados para transplante, um aumento no número de doadores e melhor uso de órgãos recuperados, a mortalidade na lista de espera para transplante não diminuiu significativamente

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Protocolo

Todos os procedimentos foram realizados de acordo com as diretrizes do Conselho Canadense de Cuidados com Animais e o guia para cuidados e uso de animais de laboratório. Os protocolos foram aprovados pelo comitê institucional de cuidados com animais da Universidade de Alberta. Este protocolo foi aplicado em fêmeas juvenis de porcos Yorkshire entre 35-50 kg. Os porcos são espécimes livres de patógenos e de grau alimentício. Eles são comprados do Centro de Pesquisa e Tecnologia de Suínos em Edmonton, AB, Canadá (https://srtc.ualberta.ca). Todos os indivíduos envolvidos nos procedimentos de ESLP receberam treinamento adequado em biossegurança.

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Resultados

Todos os resultados estão no contexto de 4 h de reperfusão após 12 h de VPN-ESLP16. Durante o explante pulmonar, há vários desfechos clínicos a serem antecipados (Figura 3). Normalmente, o porco permanecerá hemodinamicamente estável após um explante pulmonar esquerdo bem-sucedido, mas pode exigir uma infusão de baixa dose de fenilefrina (intervalo de dose: 2-10 mg/h) devido a uma resposta vasodilatadora à cirurgia. A frequência cardíaca deve atingir aproximadamente 10.......

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Discussão

Várias etapas cirúrgicas críticas estão envolvidas neste protocolo, e a solução de problemas é necessária para garantir o sucesso do transplante e da avaliação pulmonar. Os pulmões suínos juvenis são incrivelmente delicados em comparação com os pulmões humanos adultos, por isso o cirurgião cirúrgico deve ser cauteloso ao manusear pulmões suínos. Isso é especialmente verdadeiro após uma corrida de 12 horas de ESLP, pois o órgão terá assumido volume de líquido e estará suscetível a lesões por manipulação excessiva. Qualque.......

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Divulgações

A DHF detém patentes sobre a tecnologia e métodos de perfusão de órgãos ex situ . DHF e JN são fundadores e principais acionistas da Tevosol, Inc.

Agradecimentos

Esta pesquisa é financiada em nome da Fundação Hospital Universitário.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
ABL 800 FLEX Analisador de Gases SanguíneosRadiômetro989-963
Filtro Eletrostático Adulto-Pediátrico HME - PequenoCovidien352/5877
Allison LungRetractor Pilling341679
Filtro ArterialSORIN GROUP01706/03
Backhaus Towel ClampPilling454300
Albumina de SoroBovino MP biomedicals218057791
Biomedicus BombaMaquetBPX-80
Broncoscópio
Abraçadeiras de Cabo - ndash; Branco 12"HUASU InternationalHS4830001
Cloreto de CálcioFisher ScientificC69-500G
Cooley Retrator EsternalPilling341162
CUSHING Gutschdressing FórcepsPilling466200
Debakey-Metzenbaum DissecaçãoPilling342202
TesouraPilling342202
DeBakey Vascular Periférico BraçadeiraPilling353535
Debakey Tecido Vascular Reto FórcepsPilling351808
D-glicoseSigma-AldrichG5767-500G
Tubo Endotraqueal de Gota
Bomba de Infusão BIO-PROBETX 40
BaxterAS50
Inspire 7 M Oxigenador de Membrana de Fibra OcaGRUPO SORIN K190690
Conector de Tubulação de Interceptação 3/8" x 1/2"Tubulação de Interceptação Medtronic6013
1/4" x 1/16" x 8'TubulaçãoMedtronic3108
3/8" x 3/32" x 6'Medtronic3506
LaringoscópioN/AN/AFeito sob medida com lâmina de 10 polegadas
Metzenbaum Tesoura de DissecaçãoPilling460420
Tanque de Dióxido de Carbono MédicoPraxair5823115
Tanque de Oxigênio MédicoPraxair2014408
Tanque de Nitrogênio MédicoPraxairNI MK
MosquitoClamp Pilling181816
Harken Auricle Clamp
Organ ChamberTevosol
PlasmaLyte ABaxterTB2544
Poole Tubo de SucçãoPilling162212
Fosfato de PotássioFischer ScientificP285-500G
PERFADEX PlusXVIVO19811
Satinsky ClampPilling354002
ScaleTANITAKD4063611
Membrana de Suporte de SilícioTevosol
Bicarbonato de SódioSigma-Aldrich792519-1KG
Cloreto de Sódio 0,9%BaxterJB1324
Sorin XTRA Cell SaverSORIN GROUP75221
Serra esternalStryker6207
Transdutor de pressão Kls MartinME411
Cateter venoso central de dois lúmens
Pilling351377
Willauer-Deaver RetractorPilling341720
Yankauer Tubo de SucçãoPilling162300
0 ETHIBOND Verde 1X36" Endo Loop 0ETHICOND8573
0 PDS II CP-1 2x27"ETHICONZ467H
1 VICRYL MO-4 1x18"ETHICONJ702D
2-0 SILK Preto 12" x 18" FiosETHICONSA77G
4-0 PROLENE Azul TF 1x24"ETHICON8204H
6-0 PROLENE Azul BV 2x30"Agulha
calibre 21
9,0mm CUFD Mallinckrodt 9590E Transdutor de Fluxo de Interceptação Dispositivo de eletrocautério cirúrgico TruWave Edwards VSYPX272 7fr X2 Arrowg+ard CS-12702-E Braçadeira de tubulação Vorse ETHICON M8776

Referências

  1. Chambers, D. C., et al. The international thoracic organ transplant registry of the international society for heart and lung transplantation: Thirty-fifth adult lung and heart-lung transplant report-2018; focus theme: Multi....

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