Artigo de método

Transplante de pele murinos

DOI:

10.3791/634

⸱

16 de janeiro de 2008

 , 
1Department of Physiology and Biophysics, University of California, Irvine (UCI)

Neste artigo

Resumo

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Transplante alogênico de pele é um modelo padrão para ensaio de anfitrião respostas das células T aos antígenos MHC-díspares doador. Este vídeo-artigo fornece um tutorial visual de cada etapa envolvida na realização de um transplante de BALB/c--> C57BL / 6 da pele.

Resumo

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Como um dos modelos mais rigorosos e menos tecnicamente desafiador, transplante cutâneo é um método padrão para ensaio de anfitrião respostas das células T aos antígenos MHC-díspares doador. O objetivo deste vídeo-artigo é proporcionar ao espectador com uma demonstração passo a passo-visual do transplante de pele usando o modelo de mouse. O protocolo é dividido em cinco componentes principais: 1) a colheita da pele do doador; 2) preparar receptor para transplante; 3) transplante de pele; 4) remoção de curativo e rejeição do enxerto de monitoramento; 5) dicas úteis. Uma vez proficiente, o procedimento em si deve ter <10 minutos para executar.

Protocolo

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Antes do início do experimento:

  • Obter a aprovação IACUC
  • Esterilizar instrumentos cirúrgicos e Q-dicas

I. tecido do doador Colheita

  1. Euthanize camundongo doador (de acordo com SOP instituição)
  2. Trás os cabelos molhados da base da orelha com álcool
  3. Colheita da pele de doadores cortando orelha fora na base
  4. Tecido lugar na placa sobre o gelo
  5. Ouvido Split: pinch lados ventral e dorsal do tecido na base da orelha com dente-de-rato fórceps; puxe suavemente o tecido, tecido de flutuação dorsal, superfície interna para baixo, na PBS sobre o gelo; descartar flap ventral colág....

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Discussão

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Como demonstrado neste vídeo-artigo, o modelo de transplante de pele é um método rápido e fácil para monitorar respostas de células T alogênicas. Transplante alogênico de pele tem uma vasta gama de aplicações e tem sido utilizada para ensaio da eficiência de uma variedade de agentes imunossupressores e protocolos de indução de tolerância, bem como para investigar os efeitos biológicos de vários anticorpos de bloqueio.

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Divulgações

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Os autores não têm nada a declarar.

Agradecimentos

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NIH Imunologia Training Grant T32 AI 60573 (KRG) e NIH conceder GM 41514 (MDC)

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Pinça microcirúrgica (curva)Sigma-AldrichF4142
Pinça dentada (1x2 dentes, reta)Fine Science Tools11053-10n=2
Tesoura de estrabismo (ponta romba)Fine Science Tools14074-11
Pinça de íris (curva)Fine Science Tools11065-07
Tesoura de mola (angulada)Fine Science Tools15006-09
Porta-agulha micro HalseyFine Science Tools12500-12
Placas de 10 cmCorning430167
PBSCellgro21-040-CV
Bupernex (cloridrato de buprenorfina)Reckitt Benckiser517201
Seringas de insulina (29 Ga)Monoject8881 600145
CotonetesSolon Manufacturing Company362
Lâminas de barbear de borda única (#9)Smith & Nephew Inc.67-0238
Fio de seda (2-0; PS-2)Ethicon Inc.583H

Reimpressões e permissões

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Etiquetas

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