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Artigo de método

Dispositivo microfluídico para a separação de células de câncer de mama não metastático (MCF-7) e não tumoral (MCF-10A) usando dieletroforese AC

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DOI:

10.3791/63850

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11 de agosto de 2022

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Neste artigo

Resumo

As células do câncer de mama exibem diferentes propriedades dielétricas em comparação com as células epiteliais da mama não tumorais. Foi levantada a hipótese de que, com base nessa diferença nas propriedades dielétricas, as duas populações podem ser separadas para fins de imunoterapia. Para suportar isso, modelamos um dispositivo microfluídico para classificar as células MCF-7 e MCF-10A.

Resumo

Os dispositivos dieletroforéticos são capazes de detectar e manipular células cancerígenas de maneira livre de rótulos, econômica, robusta e precisa, usando o princípio da polarização das células cancerígenas no volume da amostra aplicando um campo elétrico externo. Este artigo demonstra como uma plataforma microfluídica pode ser utilizada para a classificação contínua de alto rendimento de células de câncer de mama não metastático (MCF-7) e células epiteliais de mama não tumorais (MCF-10A) usando dieletroforese hidrodinâmica (HDEP) da mistura celular. Ao gerar um campo elétrico entre dois eletrodos colocados lado a lado com uma lacuna do tamanho de um mícron entre eles em um chip microfluídico HDEP, as células epiteliais mamárias não tumorais (MCF-10A) podem ser afastadas, exibindo DEP negativo dentro do canal principal, enquanto as células de câncer de mama não metastáticas seguem seu curso não afetadas quando suspensas em meio celular devido a terem condutividade maior que a condutividade da membrana. Para demonstrar esse conceito, foram realizadas simulações para diferentes valores de condutividade média, e a classificação das células foi estudada. Um estudo paramétrico foi realizado, e uma condutividade de mistura celular adequada foi encontrada para ser de 0,4 S / m. Mantendo a condutividade média fixa, estabeleceu-se uma frequência CA adequada de 0,8 MHz, dando máxima eficiência de classificação, variando a frequência do campo elétrico. Usando o método demonstrado, depois de escolher a condutividade do meio de suspensão de mistura celular apropriada e a frequência da CA aplicada, a máxima eficiência de classificação pode ser alcançada.

Introdução

Um tumor maligno que se desenvolve dentro e ao redor do tecido mamário é uma causa frequente de câncer de mama em mulheres em todo o mundo, causando um problema crítico de saúde1. Os tumores de mama antes da metástase podem ser tratados através de cirurgia se detectados em um estágio inicial, mas se ignorados, eles podem ter implicações graves na vida do paciente, espalhando-se para seus pulmões, cérebro e ossos. Os tratamentos oferecidos em estágios posteriores, como radiação e terapias químicas, apresentam efeitos colaterais graves2. Estudos recentes têm relatado que o diagnóstico precoce do câncer de mama reduz a taxa....

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Protocolo

NOTA: O protocolo aqui utilizado utiliza o COMSOL, um software de simulação multifísica, para simular a classificação controlada de células de câncer de mama não metastático (MCF-7) e células epiteliais mamárias não tumorais (MCF-10A) usando dieletroforese AC.

1. Projeto do chip e seleção de parâmetros

  1. Abra o software multifísico e selecione Modelo em branco. Clique com o botão direito do mouse nas Definições Globais e selecione Parâmetros. Importe os parâmetros fornecidos na Tabela 1 para definições globais como um arquivo de texto ou insira os v....

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Resultados

Investigando os parâmetros operacionais ideais para a classificação eficaz baseada em DEP de células epiteliais não metastáticas de câncer de mama (MCF-7) e epiteliais de mama não tumorais (MCF-10A)
Para alcançar uma separação bem-sucedida de células do câncer de mama não metastático (MCF-7) e epitelial de mama não tumoral (MCF-10A) com propriedades dielétricas divergentes quando submetidas à dieletroforese, seus fatores K devem ser distintos, mantendo a frequência aplicada fixa37,38.......

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Discussão

Dispositivos microfluídicos foram relatados anteriormente para cultura celular, aprisionamento e classificação 47,52,53. A fabricação desses dispositivos na sala limpa é um processo caro, e é imperativo quantificar a saída e a eficiência de um dispositivo microfluídico proposto por meio de simulações de CFD. Este estudo apresenta o desenho e as simulações de um dispositivo microfluídico dieletroforético AC para a separação contí.......

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Divulgações

Os autores declaram não haver potenciais conflitos de interesse.

Agradecimentos

Este estudo foi apoiado pela Comissão de Ensino Superior do Paquistão.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Software de simulação multifísicaCOMSOLCOMSOL

Referências

  1. Liang, L., et al. Microfluidic-based cancer cell separation using active and passive mechanisms. Microfluidics and Nanofluidics. 24 (4), 26(2020).
  2. Damiati, S., Kompella, U. B., Damiati, S. A., Kodzius, R. Microfluidic devices for drug delivery systems and....

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Reimpressões e permissões

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