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Como prova de conceito, o DSNB foi escolhido como a molécula de analito e revestido na superfície dos AgNPs. Os espectros típicos de SERS do DSNB aprimorados pelo conjunto AgNP plasmônico e agNP dispersos são mostrados na Figura 6. Sem o laser de captura, os AgNPs dispersos na câmara de amostrageraram um espectro negro (Figura 6A) após a excitação pelo laser da sonda Raman. Um sinal de SERS fraco e amplo foi observado em aproximadamente 1380-1450 cm-1, o pico característico de DSNB de seu trecho simétrico nº2, o que é consistente com os relatórios de literatura35,36. Uma vez que os AgNPs dispersos estavam sob movimento browniano, as junções interpartículas eram grandes e instáveis, como ilustrado na Figura 6C. Assim, a amplificação do sinal SERS do DSNB foi baixa para os AgNPs dispersos.
AgNPs são reunidos para formar um conjunto agNP plasmônico quando o laser de trapping está ligado. Aumentar a potência e estender o tempo de irradiação do laser de trapping poderia atrair mais AgNPs e gerar uma mancha escura, como mostrado na Figura 6B. Aqui, aplicamos um poder laser de captura de 700 mM e um tempo de irradiação de 20 s para criar um conjunto AgNP plasmônico em uma solução AgNP revestida de 0,05 nM DSNB em um local e momento designados. O espectro SERS de DSNB foi obtido na região do conjunto Plasmônico AgNP (Figura 6A, vermelho). A forte banda Raman em 930 cm-1 é atribuída à vibração de tesoura nitro, e as grandes bandas em 1078 cm-1, 1152 cm-1 e 1191 cm-1 provavelmente correspondem ao trecho succinimidyl N-C-O sobreposto com os modos de anel aromático de DSNB35,37. As bandas de características a 1385 cm-1 e 1444 cm-1 surgem do trecho nitro simétrico do DSNB e são significativamente aprimoradas e ligeiramente deslocadas devido à reação com a superfície de AgNP 35,37. Com base nas impressões digitais sers relatadas anteriormente de DSNB 35,36,37, a banda em 1579 cm-1 foi atribuída ao modo anel aromático do DSNB. As intensidades globais de DSNB no conjunto AgNP plasmônico foram maiores do que as do AgNP disperso. Considerando a intensidade do pico característico em 1444 cm-1, o conjunto AgNP plasmônico pode fornecer aproximadamente um aprimoramento de 50 vezes do sinal SERS do DSNB em comparação com o do AgNP disperso. Como mostrado na Figura 7, os espectros sers de DSNB foram registrados repetidamente (20 vezes) para o conjunto AgNP no experimento, demonstrando características vibracionais idênticas. As intensidades dos picos característicos de DSNB a 1152 cm−1, 1444 cm−1 e 1579 cm-1 através desses 20 espectros sers foram traçadas como histogramas com desvios padrão relativos (RSD) de 6,88%, 6,59% e 5,48%, respectivamente. Isso verificou ainda a reprodutibilidade e estabilidade. Portanto, essa abordagem é confiável para manipular nanopartículas plasmônicas e detecção de sers de moléculas de analito em solução.

Figura 1: Representação esquemática da plataforma espectroscópica Raman acoplada à pinça óptica. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 2: Preparação de AgNP para medição sers. (A) SEM imagem de AgNP. (B) Distribuição de tamanho de AgNP por DLS. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 3: Interação de AgNP e DSNB. (A) Esquema do revestimento de DSNB na superfície do AgNP. (B) Espectros visíveis UV de AgNP e AgNP-DSNB. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 4: Esquema de preparação da câmara amostral. (A) Processo de preparação da câmara de amostra. (B) Câmara de amostra preparada. Barra de escala = 1 cm. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 5: Posição sobreposta de laser Raman de 532 nm e laser de trapping de 1064 nm. (A) Posição de laser Raman de 532 nm indicada por mancha branca. (B) Posição de laser de trapping de 1064 nm indicado pelo círculo vermelho. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 6: Espectros típicos de SERS das moléculas de analito aprimoradas pelo conjunto AgNP plasmônico. (A) Espectros SERS de DSNB no conjunto AgNP plasmônico (vermelho) e o AgNP disperso (preto). (B) O conjunto AgNP plasmônico quando o laser de trapping está ligado mostra um ponto escuro sob visualização microscópica. (C) O AgNP disperso quando o laser de trapping está desligado. (D) Ilustração do mecanismo de formação de montagem AgNP. (E) Intensidade de SERS dependente da concentração na ausência do laser de trapping. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 7: Reprodutibilidade do sinal SERS de DSNB. (A) 20 espectros SERS de DSNB no conjunto AgNP plasmônico registrado repetidamente no experimento. (B) Histogramas das intensidades dos picos característicos de DSNB a 1152 cm-1 (RSD = 6,88%), 1444 cm-1 (RSD = 6,59%) e 1579 cm-1 (RSD = 5,48%). Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 8: Conjunto AgNP gerado sob diferentes parâmetros experimentais. (A) Potência laser de captura diferente; tempo de irradiação 20 s e concentração agnp 0,05 nM. (B) Tempo de irradiação diferente; potência laser de 700 mW e concentração AgNP 0,05 nM. (C) Diferente concentração agnp; tempo de irradiação 20 s e potência laser de 700 mW. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura suplementar 1: As imagens da câmera do microscópio do conjunto AgNP em séries temporâneas quando o laser de captura foi desligado. Clique aqui para baixar este Arquivo.