Ganaspis brasiliensis-a larval parasitoide de Drosophila suzukii (uma praga global de cultura de frutas invasivas)-- foi aprovado ou é considerado para introdução na Europa e nos Estados Unidos para o controle biológico desta praga. Este artigo fornece protocolos para a criação em pequena escala e em larga escala deste parasitoide.
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Artigo de método
Métodos de Criação do Parasitoide Ganaspis brasiliensis, um Agente promissor de controle biológico para a Drosophila suzukii invasiva
Neste artigo
Resumo
Resumo
Nativa do leste da Ásia, a drosophila de asa manchada, Drosophila suzukii (Matsumura) (Diptera: Drosophilidae), estabeleceu-se amplamente nas Américas, Europa e partes da África na última década, tornando-se uma praga devastadora de várias frutas de pele macia em suas regiões invadidas. O controle biológico, especialmente por meio de parasitoides autoperpetuantes e especializados, deverá ser uma opção viável para uma gestão sustentável em toda a área desta praga altamente móvel e polifagosa. Ganaspis brasiliensis Ihering (Hymenoptera: Figitidae) é um parasitoide larval que é amplamente distribuído no leste da Ásia, e foi encontrado como um dos parasitoides mais eficazes de D. suzukii.
Após rigorosas avaliações pré-introdução de sua eficácia e potenciais riscos não-alvo, um dos grupos genéticos mais específicos para hospedeiros desta espécie (G1 G. brasiliensis) foi aprovado recentemente para introdução e liberação de campo nos Estados Unidos e na Itália. Outro grupo genético (G3 G. brasiliensis), que também foi comumente encontrado para atacar D. suzukii no leste da Ásia, pode ser considerado para introdução em um futuro próximo. Atualmente, há um enorme interesse em criar g. brasiliensis para pesquisa ou em produção em massa para lançamento de campo contra D. suzukii. Este protocolo e artigo de vídeo associados descrevem métodos eficazes de criação para este parasitoide, tanto em pequena escala para pesquisa quanto em grande escala para produção em massa e lançamento de campo. Esses métodos podem beneficiar mais pesquisas de longo prazo e o uso deste parasitoide asiático-nativo como um agente de controle biológico promissor para esta praga invasiva global.
Introdução
Nativa do leste da Ásia, a drosophila de asa manchada, Drosophila suzukii (Matsumura) (Diptera: Drosophilidae), estabeleceu-se amplamente nas Américas, Europa e partes da África 1,2. A mosca é extremamente polifago, sendo capaz de utilizar diversos frutos cultivados e selvagens com peles macias e finas em suas regiões nativas e invadidas 1,2,3. As estratégias de manejo atuais para esta praga dependem fortemente do uso frequente de inseticidas que visam moscas adultas em campos de cultivo quando frutas suscetí....
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Protocolo
1. Métodos para criação laboratorial em pequena escala do G3 Ganaspis brasiliensis
- Prepare a dieta do anfitrião.
- Adicione 600 mL de água destilada a um recipiente de vidro de 1.500 mL e aqueça a água em uma placa quente.
- Adicione 88,6 g de dieta seca comercialmente disponível (feita de ágar, levedura de Cervejeiro, farinha de milho, parabeno de metila e sacarose) ou prepare a dieta usando a fórmula publicada por Dalton et al.28 (ver passo 2.1.2).
- Adicione 300 mL de água destilada na dieta seca e mexa bem a mistura dietética.
- Adicione a mistura à água fervente. <....
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Resultados
A Figura 4 mostra resultados representativos da criação laboratorial em pequena escala do G3 Ganaspis brasiliensis usando duas densidades parasitoides diferentes (seis ou dez pares) e dois tempos de exposição diferentes (5 ou 10 dias) na instalação de quarentena da Unidade de Introdução de Insetos Benéficos do USDA-ARS (Newark, Delaware). Houve 14 réplicas para cada combinação de densidade parasitoide e tempo de exposição. No total, os 64 frascos produziram 4.018 vespas (71,7 ± 4,9 .......
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Discussão
Pesquisas de longo prazo e liberações de campo subsequentes de um agente de controle biológico dependem da disponibilidade de técnicas eficazes e econômicas de criação. Os métodos descritos neste estudo provaram ser protocolos eficientes tanto para a criação em pequena escala quanto para a criação em larga escala do Ganaspis brasiliensis. O protocolo de criação em pequena escala foi desenvolvido ao longo de vários anos para otimizar a quantidade de mão-de-obra e reduzir os equipamentos especializados necessários.......
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Divulgações
Os autores não têm conflitos de interesse para divulgar.
Agradecimentos
Os autores agradecem a Lukas Seehausen e Marc Kenis (CABI, Suíça) por gentilmente fornecerem G1 G. brasiliensis. O financiamento na Itália foi fornecido por Provincia Autonoma di Trento, Trento, Itália, e nos EUA pelo National Institute of Food and Agriculture, prêmio USDA Specialty Crops Research Initiative (#2020-5118-32140), USDA Animal and Plant Health Inspection Service (Farm Bill, fundo 14-8130-0463) e fundos base USDA ARS CRIS (projeto 8010-22000-033-000D). O USDA é um provedor de igualdade de oportunidades e empregador e não endossa os produtos mencionados nesta publicação.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Levedura seca ativa | Levedura Fleischmanns, Cincinatti, OH, EUA | Nenhuma | Usada para cobrir frutas para reduzir o crescimento de fungos e aumentar a atração de frui pelas moscas |
| Ágar bacteriológico | Merk Life Science S.r.l., Milão, Itália | A1296 - 5KG | Usado para preparar a solução de alvejante médio padrão de Drosophila |
| Clorox Company, Oakland, CA, EUA | Nenhum | Usado para desinfetar frutas | |
| de carneRolha azul | Azer Scientific, Morgantown, PA, EUA | ES3837 | Usado para selar o tubo enquanto permite ventilação para insetos |
| Mirtilos | Mercearia, Newark, DE, EUA | Nenhum | Fornecido como fruta hospedeira para as moscas (várias outras frutas também podem ser usadas) |
| Gaiola de criação de insetos BugDorm (L24,5 x P24,5 x A63,0 cm) | Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan | 4E3030 | Usado para criar parasitóides (gaiola de parasitismo) |
| Gaiola de criação de insetos BugDorm (L32,5 x P32,5 x A32,5 cm) | Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan | 4E4590 | Usado para criar moscas |
| Gaiola de criação de insetos BugDorm (L32,5 x P32,5 x A32,5 cm) | Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan | 4E4545 | Usado para criar parasitóides (gaiola de eclosão) |
| Arame (0,64 cm, 19 gauge) | Everbilt, OH, USA | 308231EB | Usado para levantar a fruta para permitir a máxima oviposição do parasitóide |
| Mercearia de Fubá | , Trento, TN, Itália | Nenhum | Usado para preparar o rolo de algodão dental médio padrão Drosophila |
| (1 x 3,8 cm) | Gima S.p.A., Gessate, MI, Itália | 35000 | Usado para fornecer água aos parasitóides dentro do recipiente de armazenamento |
| Dieta | DrosophilaFrontier Scientific, Newark, DE, EUA | TF1003 | Dieta personalizada usada para criar moscas |
| Frascos de Drosophila estreitos, Poliestireno (2,5 x 9,5 cm) | VWR International, LLC., Radnor, PA, US | 75813-160 | Usado para fornecer água aos parasitóides dentro da gaiola |
| Tampões de frascos de Drosophila, Acetato de celulose (2,5 cm) | VWR International, LLC., Radnor, PA, US | 89168-886 | Usado para fornecer água aos parasitóides dentro da gaiola |
| Frasco Erlenmeyer (250 mL) | Carolina Biological, Burlington, NC, EUA | 731029 | Usado para criar moscas e parasitóides |
| Tubo de centrífuga estilo Falcon (50 mL) | VWR International, LLC., Radnor, PA, US | VWRI525-0611 | Modificado para enviar parasitóides adultos |
| Rolha de espuma | Jaece Industries, North Tanawanda, NY, EUA | L800-C | Usado para selar os frascos enquanto permite ventilação para insetos |
| Mercearia de mel | , Newark, DE, EUA | Nenhum | Fornecido como alimento para parasitóides |
| Rolha de espuma de plástico Identi-Plug | Fisher Scientific Company, L.L.C., Pittsburg, PA, US | 14-127-40E | Usado como alimentador para parasitóides e para selar o recipiente de armazenamento |
| Toalha de papel industrial | Mercearia, Newark, DE, EUA | Nenhum | Fornecido como substrato de pupação para pupas e umidade mitigada |
| Tecido de malha de mícron (250 mL) | Rede Industrial, Maple Grove, MN, EUA | WN0250-72 | Usado para fazer tampa de ventilação para insetos |
| Levedura nutricional (flocos) | Mercearia, Trento, TN, Itália | Nenhum | Usado para preparar o porta-copos de papel médio padrão Drosophila |
| (10,2 cm) | Hoffmaster, WI, EUA | 35NG26 | Fornecido como substrato de pupação para moscas e pupas |
| parsitizadasCopo de plástico (Ø 13,3 cm, 800 mL) | Berry Superfos, Taastrup, Dinamarca | Unipak 5134 | Modificado para armazenar parasitóides adultos |
| Tampa de plástico (Ø 13,3 cm) | Berry Superfos, Taastrup, Dinamarca | PP 2830 | Modificado para armazenar parasitóides adultos |
| Ácido propiônico | Merk Life Science S.r.l., Milão, Itália | P1386 - 1L | Usado para preparar a sacarose |
| média padrão de DrosophilaMercearia, Trento, TN, Itália | Nenhum | Usado para preparar o copo de sopa médio padrão Drosophila | |
| com tampa (475 mL) | StackMan, Vietnã | DC1648 | Usado para larvas parasitadas para pupar |
| Farinha de soja | Mercearia, Trento, TN, Itália | Nenhum | Usado para preparar a arruela de feltro branco médio padrão Drosophila |
| (0,64 cm de espessura, 5 mm ID x 20 mm OD) | Quiklok, Lincoln, NH, EUA | WFW/.25 x 5 x 20 mm | Usado como anel de alimentação para parasitóides |
Referências
- Asplen, M. K., et al. Invasion biology of spotted wing drosophila (Drosophila suzukii): a global perspective and future priorities. Journal of Pest Science. 88 (3), 469-494 (2015).
- Tait, G., et al.
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Reimpressões e permissões
