Métodos para indução simples e rápida de um modelo de dor nas costas em camundongos são fornecidos aqui usando uma injeção intraligamentar de ativador de plasminogênio urinário.
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Artigo de método
Modelo de dor nas costas de camundongo induzido pelo ativador do plasminogênio do tipo uroquinase
Neste artigo
Resumo
Resumo
Um modelo de dor lombar persistente pode ser induzido em camundongos com a metodologia simples aqui descrita. Métodos passo a passo para indução simples e rápida de um modelo de dor persistente nas costas em camundongos são fornecidos aqui usando uma injeção de ativador de plasminogênio do tipo uroquinase (uroquinase), uma serinoprotease presente em humanos e outros animais. A metodologia para indução de dor lombar persistente em camundongos envolve uma simples injeção de uroquinase ao longo da região de inserção ligamentar da coluna lombar. O agente inflamatório uroquinase ativa plasminogênio em plasmina. Normalmente, o modelo pode ser induzido dentro de 10 minutos e a hipersensibilidade persiste por pelo menos 8 semanas.
Hipersensibilidade, distúrbio da marcha e outras medidas padrão semelhantes à ansiedade e depressão podem ser testadas no modelo persistente. A dor nas costas é o tipo de dor mais prevalente. Para melhorar a conscientização sobre a dor nas costas, a Associação Internacional para o Estudo da Dor (IASP) nomeou 2021 o "Ano Global sobre Dor nas Costas" e 2022 o "Ano Global para Traduzir o Conhecimento da Dor para a Prática". Uma limitação do avanço terapêutico da terapêutica da dor é a falta de modelos adequados para testar a dor persistente e crônica. As características deste modelo são adequadas para testar potenciais terapêuticas destinadas à redução da dor nas costas e suas características auxiliares, contribuindo para que o IASP nomeie 2022 como o Ano Global para a Tradução do Conhecimento da Dor para a Prática.
Introdução
A dor lombar é uma das causas mais comuns de incapacidade, com 1 em cada 5 pessoas sofrendo em todo o mundo1. Apesar desses esforços, poucos modelos animais confiáveis de dor nas costas são popularmente usados em pesquisas com animais no campo da dor, especialmente em camundongos. Modelos anteriores utilizaram quase que exclusivamente ratos para a indução de dor lombar crônica (CEC), como aquelas induzidas pela injeção do ativador do plasminogênio urinário (uPA) na articulação da facetalombar2,3, injeção de fator de crescimento nervoso (NGF) namusculatura do tron....
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Protocolo
Todos os procedimentos para animais descritos estão em conformidade com o Guia do NIH para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório. Os estudos foram aprovados pelo Comitê de Cuidado e Uso Institucional local (IACUC #23-201364-HSC) do Centro de Ciências da Saúde da Universidade do Novo México. Todos os estudos estão em conformidade com as políticas sob os auspícios de uma Garantia de Conformidade OLAW (A3002-01) sobre o uso de animais em pesquisa, conforme descrito na Parte III. II. Garantias e Certificações. Os animais são alojados no alojamento do Centro de Recursos Animais (ARC) mantido pela equipe do laboratório e pela equipe da Divisão de Laboratório e Recursos ....
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Resultados
Testes comportamentais relacionados à nocicepção e análise de dados
Medidas evocadas
A hipersensibilidade no coxim plantar desenvolve-se dentro de um dia após a injeção de uroquinase. Dentro de 1 semana, o limiar de retirada é significativamente reduzido e persiste até a eutanásia; isso é demonstrado até a semana 4 pós-cirúrgica (Figura 4A). A latência de retirada da pata é analisada pelo método de von Frey up-down9 e pelo teste.......
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Discussão
Este modelo de dor lombar crônica é simples de induzir, e a hipersensibilidade estabelecida dentro de 1 semana pode durar até (e possivelmente além) de 8 semanas. Isso permite um estudo preciso do estado de dor crônica, em oposição a outros modelos agudos que duram apenas uma ou duas semanas. Enquanto mostramos o modelo em camundongos, o modelo de CBP induzida por uPA também pode ser estabelecido em ratos2. Uma vantagem do modelo é que o curso temporal prolongado provoca o desenvolvimento de compo.......
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Divulgações
Os autores declaram não haver interesses financeiros concorrentes. A KNW reconhece consultas não pagas com a NeuroChronix, a Bessor Pharma e a USA Elixeria BioPharm, Inc.
Agradecimentos
O financiamento da subvenção foi fornecido pelo NIH HEAL UG3 NS123958. As instalações habitacionais foram inspecionadas e credenciadas pela AAALAC. Os animais foram alojados no alojamento do Centro de Recursos Animais (ARC), mantido pela equipe do laboratório e pela equipe da Divisão de Laboratório e Recursos Animais (DLAR). Os procedimentos para testes comportamentais são métodos padrão na área, aprovados pela American Pain Society e pela International Association for the Study of Pain. O método de eutanásia é consistente com as recomendações do Painel de Eutanásia da Associação Médica Veterinária Americana.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Animais e Consumíveis | |||
| 70% etanol | Fonte | ||
| Camundongos BALB/c | Envigo | 20-25 g | |
| Bolas de algodão | Fisher Scientific | 19-090-702 | |
| Aplicadores com ponta de algodão | Fisher Scientific | 19-062-616 | |
| Inalante de isoflurano anestésico | MedVet | RXISO-250 | |
| Fita de rotulagem | Fisher Scientific | NGFP7002 | |
| Luvas de exame de nitrilo | Fisher Scientific | ||
| Fonte local | |||
| Campo cirúrgico, Folha de utilidade Steri-Drape, Prevenção absorvente | VWR | 76246-788 | cortado em pedaços de 15 x 15 cm |
| Tubo Tygon com 3 mm diâmetro interno | Grainger | 22XH87 | |
| Equipment | |||
| #11 lâminas de bisturi de aço carbono | VWR | 21909-612 | |
| Câmara de indução de anestesia | Summit Medical Equipment Company | AS-01-0530-LG | |
| Autoclave | Unidade | ||
| Biologia Dumont # 5 fórceps | Fine Science Tools | 11252-30 | |
| Esterilizador de esferas de vidro Germinador 500 | VWR | 102095-946 | |
| IITC Life Sciences Série 8 Modelo PE34 Medidor de analgesia de placa quente / fria | IITC | PE34 | |
| Integra Miltex algodão & alicate de vestir | Safco Dental Supply | 66-317 | |
| OPTIKA CL31 iluminador LED de braço duplo | New York Microscope Company | OPCL-31 | |
| Sistema de Teste Plantar com Emissor de Infravermelho, ou seja, Aparelho Hargreaves | Ugo Basile | 37370-001 e 37370-002 | |
| Cabo de Bisturi No. 3 | VWR | 25607-947 | |
| Almofada de aquecimento para pequenos animais | Valley Vet Supply | 47375 | |
| , lâmina reta | Fine Science Tools | 91500-09 | |
| Estação de trabalho de anestesia portátil para pesquisa animal de mesa " PAM" | Patterson Scientific | AS-01-0007 | |
| Von Frey Filamentos | Ugo Basile | 37450-275 |
Referências
- O'Sullivan, P. B., et al. Back to basics: 10 facts every person should know about back pain. British Journal of Sports Medicine. 54 (12), 698-699 (2020).
- Nauta, H. J., McIlwrath, S. L., Westlund, K. N.
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Reimpressões e permissões
