Artigo de método

Medição Transdérmica da Taxa de Filtração Glomerular em Leitões Ventilados Mecanicamente

DOI:

10.3791/64413

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13 de setembro de 2022

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1Department of Physiology, College of Medicine University of Tennessee Health Science Center

* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

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A taxa de filtração glomerular (TFG) é o marcador ideal para avaliar a função renal. No entanto, o método de medição padrão usando injeção de inulina com análise seriada de sangue e urina é impraticável. Este artigo delineia um método prático para medir a TFG por via transdérmica em leitões.

Resumo

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A medida transdérmica da taxa de filtração glomerular (TFG) tem sido utilizada para avaliar a função renal em animais conscientes. Esta técnica está bem estabelecida em roedores para estudar lesão renal aguda e doença renal crônica. No entanto, a medição da TFG usando o sistema transdérmico não foi validada em suínos, uma espécie com um sistema renal semelhante ao dos seres humanos. Assim, investigamos o efeito da sepse na TFG transdérmica em suínos neonatais anestesiados e ventilados mecanicamente. A sepse polimicrobiana foi induzida por ligadura e punção cecal (FLP). O sistema de medição da TFG transdérmica, composto por um sensor de fluorescência miniaturizado, foi anexado à pele raspada do porco para determinar a depuração da sinistrina conjugada fluoresceína-isotiocianato (FITC), um marcador de TFG injetado por via intravenosa. Nossos resultados mostram que, às 12 h pós-FLP, a creatinina sérica aumentou com a diminuição da TFG. Este estudo demonstra, pela primeira vez, a utilidade da abordagem da TFG transdérmica na determinação da função renal em suínos neonatais ventilados mecanicamente.

Introdução

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Uma avaliação prática e quantitativa da função renal é a medida da taxa de filtração glomerular (TFG), que informa o quão bem os rins filtram o sangue com base no princípio da depuração1. Um método anterior de mensuração da TFG envolve a injeção intravenosa de compostos exógenos, como inulina ou sinistrina, realizando medições seriadas dos níveis plasmático/urinário para detectar sua depuração 2,3. Esse método é complicado, exigindo a coleta seriada de amostras de plasma e urina4. Uma alternativa é a medição de produtos finais metabólicos endógenos, como a creati....

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Protocolo

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Os procedimentos são escritos de acordo com os padrões nacionais para o cuidado e uso de animais de laboratório e foram aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidado e Uso de Animais (IACUC) do Centro de Ciências da Saúde da Universidade do Tennessee (UTHSC).

NOTA: Os leitões do grupo experimental são submetidos à ligadura e punção cecal, enquanto o grupo simulado só sofre abertura do abdômen sem ligadura ou punção cecal. Leitões em ambos os grupos são mantidos sob anestesia por 12 h após o procedimento para permitir tempo suficiente para que a sepse e a lesão renal aguda (LRA) ocorram no grupo experimental. A medida da TFG transdérmica oc....

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Resultados

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Nesta seção, apresentamos, pela primeira vez, os dados representativos do uso da TFG transdérmica em suínos neonatais. Utilizou-se um modelo de ligadura e punção cecal que já demonstrou diminuir a função renal28. Assim, levantamos a hipótese de que, em nossos suínos com FLP, deve haver uma queda aguda na TFG correspondente à LRA, e isso deve ser detectado no dispositivo de TFG transdérmica como aumento do tempo de depuração (t1/2), validando assim seu uso em suínos. Foram incluídos sete.......

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Discussão

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Este trabalho descreve os passos práticos para a determinação da função renal em suínos utilizando os monitores de TFG transdérmica miniaturizados e FITC-sinistrina em um modelo de suíno neonatal anestesiado e ventilado mecanicamente. Trabalhos prévios estabeleceram protocolos experimentais de TFG transdérmica em roedores 11,12,14, mas não existem protocolos em suínos.

Recentemente, tem havido um impu.......

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Agradecimentos

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Este estudo foi apoiado pelos subsídios dos Institutos Nacionais de Saúde R01 DK120595 e R01 DK127625 concedidos ao Dr. Adebiyi. O conteúdo deste artigo é de responsabilidade exclusiva dos autores e não representa necessariamente as opiniões oficiais dos Institutos Nacionais de Saúde. Agradecemos ao Dr. Daniel Schock-Kusch, diretor do site da MediBeacon GmbH, por seus conselhos.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Alpha - CloraloseSigma-AldrichC0128-25GUsado para manutenção de anestesia
Seda trançada preta 3-0Especialidades CirúrgicasSP117Gravata de seda para tração e ligadura de vasos sanguíneos
Máquina de centrifugação AccuSpin 8CFischer Scientific75-008-821Usado para extrair plasma de amostra de sangue total
Tubo Endotraqueal 3.0 sem punhoProgressive Medical International1109021995Inserido através de traqueostomia
FITC-Sinistrin 1,0 gMediBeacon Inc.FTCF S001Armazene em temperatura ambiente e proteja da luz
Analisador de gases sanguíneos GEM Premier 3000Laboratório de Instrumentação5700Para análise de gases sanguíneos à beira do leito
Almofada de aquecimento tamanho médio 20 pol x 29 polAdroit Medical SystemsV029Conecta-se à bomba de terapia de calor
HTP-Bomba de terapia de calorAdroit Medical SystemsHTPPermite definir a temperatura conforme necessário.
IDEXX Catalyst OneIDEXX Laboratories89-92525-00Análise de creatinina plasmática
Cateter invasivo de pressão arterial 3.5FrMillarSPR-524Inserido no
conjunto de administração IV da artéria femoral com regulador de fluxoTrue CareTCRTCBINF033GUsado para conectar a bolsa de fluido IV ao cateter venoso
CetaminaCovetrus68317Usado para indução de anestesia
Software de análise MediBeacon versão 3.0MediBeacon Inc.N/APrograma de software usado para analisar dados para obter a depuração do sinistrin meia-vida e curva
Unidade de Filtro de Seringa Millex-GV 0.22 µ mMillipore SigmaSLGVR33RSFiltro de seringa para injeção de cloralose
Ventilador neonato/infantilSechrist Millennium20409Conectado ao suprimento de ar para fornecer ventilação através do tubo endotraqueal
Fenobarbital Sódico + Fenitoína Sódica (Euthasol)Covetrus72934Usado para eutanásia
Ringer Lactato 500 mL sacoBaxter2B2323QInfusão de fluidos de manutenção
Luvas estéreisHenry Schein104-5920Usado pelo operador durante a cirurgia
Avental estérilHalyard Health95021Usado pelo operador durante a cirurgia
Toalha EstérilMedline42131704Usado como cortina para manter o campo estéril ao operar
a agulha de corte reverso de seda Sutura 3-0EthiconNC1842168Usado para suturar camadas da parede abdominal
Mini Monitor GFR TransdérmicoMediBeacon Inc.TDM004Bateria e conector USB incluídos no pacote
Adesivo para monitor transdérmicoMediBeacon Inc.PTC-SM001Remendo adesivo de dupla face para sonda GFR
Fita umbilical 1/8 pol x 20 jardasFisher ScientificNC9303017Para fixar o tubo endotraqueal
Tamanho do cateter venoso PE / 5Micro tubo médicoBB31695Para canulação da veia femoral
XylazineCovetrus61035Usado para indução de anestesia

Referências

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  1. Pasala, S., Carmody, J. B. How to use... serum creatinine, cystatin C and GFR. Archives of Disease in Childhood Education and Practice Edition. 102 (1), 37-43 (2017).
  2. Smith, H. W. The Kidney: Structure and Function in Health and Disease. , Oxford Universit....

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Etiquetas

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