A taxa de filtração glomerular (TFG) é o marcador ideal para avaliar a função renal. No entanto, o método de medição padrão usando injeção de inulina com análise seriada de sangue e urina é impraticável. Este artigo delineia um método prático para medir a TFG por via transdérmica em leitões.
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Artigo de método
Medição Transdérmica da Taxa de Filtração Glomerular em Leitões Ventilados Mecanicamente
* These authors contributed equally
Neste artigo
Resumo
Resumo
A medida transdérmica da taxa de filtração glomerular (TFG) tem sido utilizada para avaliar a função renal em animais conscientes. Esta técnica está bem estabelecida em roedores para estudar lesão renal aguda e doença renal crônica. No entanto, a medição da TFG usando o sistema transdérmico não foi validada em suínos, uma espécie com um sistema renal semelhante ao dos seres humanos. Assim, investigamos o efeito da sepse na TFG transdérmica em suínos neonatais anestesiados e ventilados mecanicamente. A sepse polimicrobiana foi induzida por ligadura e punção cecal (FLP). O sistema de medição da TFG transdérmica, composto por um sensor de fluorescência miniaturizado, foi anexado à pele raspada do porco para determinar a depuração da sinistrina conjugada fluoresceína-isotiocianato (FITC), um marcador de TFG injetado por via intravenosa. Nossos resultados mostram que, às 12 h pós-FLP, a creatinina sérica aumentou com a diminuição da TFG. Este estudo demonstra, pela primeira vez, a utilidade da abordagem da TFG transdérmica na determinação da função renal em suínos neonatais ventilados mecanicamente.
Introdução
Uma avaliação prática e quantitativa da função renal é a medida da taxa de filtração glomerular (TFG), que informa o quão bem os rins filtram o sangue com base no princípio da depuração1. Um método anterior de mensuração da TFG envolve a injeção intravenosa de compostos exógenos, como inulina ou sinistrina, realizando medições seriadas dos níveis plasmático/urinário para detectar sua depuração 2,3. Esse método é complicado, exigindo a coleta seriada de amostras de plasma e urina4. Uma alternativa é a medição de produtos finais metabólicos endógenos, como a creati....
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Protocolo
Os procedimentos são escritos de acordo com os padrões nacionais para o cuidado e uso de animais de laboratório e foram aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidado e Uso de Animais (IACUC) do Centro de Ciências da Saúde da Universidade do Tennessee (UTHSC).
NOTA: Os leitões do grupo experimental são submetidos à ligadura e punção cecal, enquanto o grupo simulado só sofre abertura do abdômen sem ligadura ou punção cecal. Leitões em ambos os grupos são mantidos sob anestesia por 12 h após o procedimento para permitir tempo suficiente para que a sepse e a lesão renal aguda (LRA) ocorram no grupo experimental. A medida da TFG transdérmica oc....
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Resultados
Nesta seção, apresentamos, pela primeira vez, os dados representativos do uso da TFG transdérmica em suínos neonatais. Utilizou-se um modelo de ligadura e punção cecal que já demonstrou diminuir a função renal28. Assim, levantamos a hipótese de que, em nossos suínos com FLP, deve haver uma queda aguda na TFG correspondente à LRA, e isso deve ser detectado no dispositivo de TFG transdérmica como aumento do tempo de depuração (t1/2), validando assim seu uso em suínos. Foram incluídos sete.......
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Discussão
Este trabalho descreve os passos práticos para a determinação da função renal em suínos utilizando os monitores de TFG transdérmica miniaturizados e FITC-sinistrina em um modelo de suíno neonatal anestesiado e ventilado mecanicamente. Trabalhos prévios estabeleceram protocolos experimentais de TFG transdérmica em roedores 11,12,14, mas não existem protocolos em suínos.
Recentemente, tem havido um impu.......
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Agradecimentos
Este estudo foi apoiado pelos subsídios dos Institutos Nacionais de Saúde R01 DK120595 e R01 DK127625 concedidos ao Dr. Adebiyi. O conteúdo deste artigo é de responsabilidade exclusiva dos autores e não representa necessariamente as opiniões oficiais dos Institutos Nacionais de Saúde. Agradecemos ao Dr. Daniel Schock-Kusch, diretor do site da MediBeacon GmbH, por seus conselhos.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Alpha - Cloralose | Sigma-Aldrich | C0128-25G | Usado para manutenção de anestesia |
| Seda trançada preta 3-0 | Especialidades Cirúrgicas | SP117 | Gravata de seda para tração e ligadura de vasos sanguíneos |
| Máquina de centrifugação AccuSpin 8C | Fischer Scientific | 75-008-821 | Usado para extrair plasma de amostra de sangue total |
| Tubo Endotraqueal 3.0 sem punho | Progressive Medical International | 1109021995 | Inserido através de traqueostomia |
| FITC-Sinistrin 1,0 g | MediBeacon Inc. | FTCF S001 | Armazene em temperatura ambiente e proteja da luz |
| Analisador de gases sanguíneos GEM Premier 3000 | Laboratório de Instrumentação | 5700 | Para análise de gases sanguíneos à beira do leito |
| Almofada de aquecimento tamanho médio 20 pol x 29 pol | Adroit Medical Systems | V029 | Conecta-se à bomba de terapia de calor |
| HTP-Bomba de terapia de calor | Adroit Medical Systems | HTP | Permite definir a temperatura conforme necessário. |
| IDEXX Catalyst One | IDEXX Laboratories | 89-92525-00 | Análise de creatinina plasmática |
| Cateter invasivo de pressão arterial 3.5Fr | Millar | SPR-524 | Inserido no |
| conjunto de administração IV da artéria femoral com regulador de fluxo | True Care | TCRTCBINF033G | Usado para conectar a bolsa de fluido IV ao cateter venoso |
| Cetamina | Covetrus | 68317 | Usado para indução de anestesia |
| Software de análise MediBeacon versão 3.0 | MediBeacon Inc. | N/A | Programa de software usado para analisar dados para obter a depuração do sinistrin meia-vida e curva |
| Unidade de Filtro de Seringa Millex-GV 0.22 µ m | Millipore Sigma | SLGVR33RS | Filtro de seringa para injeção de cloralose |
| Ventilador neonato/infantil | Sechrist Millennium | 20409 | Conectado ao suprimento de ar para fornecer ventilação através do tubo endotraqueal |
| Fenobarbital Sódico + Fenitoína Sódica (Euthasol) | Covetrus | 72934 | Usado para eutanásia |
| Ringer Lactato 500 mL saco | Baxter | 2B2323Q | Infusão de fluidos de manutenção |
| Luvas estéreis | Henry Schein | 104-5920 | Usado pelo operador durante a cirurgia |
| Avental estéril | Halyard Health | 95021 | Usado pelo operador durante a cirurgia |
| Toalha Estéril | Medline | 42131704 | Usado como cortina para manter o campo estéril ao operar |
| a agulha de corte reverso de seda Sutura 3-0 | Ethicon | NC1842168 | Usado para suturar camadas da parede abdominal |
| Mini Monitor GFR Transdérmico | MediBeacon Inc. | TDM004 | Bateria e conector USB incluídos no pacote |
| Adesivo para monitor transdérmico | MediBeacon Inc. | PTC-SM001 | Remendo adesivo de dupla face para sonda GFR |
| Fita umbilical 1/8 pol x 20 jardas | Fisher Scientific | NC9303017 | Para fixar o tubo endotraqueal |
| Tamanho do cateter venoso PE / 5 | Micro tubo médico | BB31695 | Para canulação da veia femoral |
| Xylazine | Covetrus | 61035 | Usado para indução de anestesia |
Referências
- Pasala, S., Carmody, J. B. How to use... serum creatinine, cystatin C and GFR. Archives of Disease in Childhood Education and Practice Edition. 102 (1), 37-43 (2017).
- Smith, H. W. The Kidney: Structure and Function in Health and Disease. , Oxford Universit....
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Reimpressões e permissões
