Velocidade de Hemossedimentação: Uma Caracterização Física em um Contexto Médico

Summary

A velocidade de hemossedimentação (VHS) é um parâmetro físico, frequentemente utilizado em exames de saúde de rotina e diagnóstico médico. Um modelo teórico que permite extrair parâmetros fisicamente significativos de toda a curva de sedimentação, baseado no conhecimento coloidal moderno, foi recentemente desenvolvido. Aqui, apresentamos um protocolo para coletar automaticamente a VHS ao longo do tempo, e extrair os parâmetros desse modelo recente dessa coleta automatizada de dados. Esses parâmetros refinados também tendem a melhorar o testemunho médico.

Abstract

A velocidade de sedimentação eritrocitária (ou eritrócitos) (VHS) é um parâmetro físico derivado do sangue que é frequentemente usado em exames de saúde de rotina e diagnóstico médico. Por exemplo, no caso de inflamação, observa-se uma VHS mais elevada devido ao aumento associado do fibrinogênio e de outras proteínas plasmáticas. Acreditava-se que esse aumento se devesse à formação de maiores agregados de hemácias (hemácias) causada pelo aumento do fibrinogênio. De fato, o fibrinogênio é uma agregação de hemácias promotora de agentes e, no regime de Stokes, supõe-se que seja observada em sedimentos de agregados maiores do sangue mais rapidamente. No entanto, todos os modelos de medidas de VHS baseados nessa hipótese requerem pressupostos físicos específicos, não exigidos em nenhum outro sistema. Além disso, estudos modernos no campo das suspensões coloidais estabeleceram que partículas atrativas formam agregados percolantes (ou seja, agregados tão largos quanto o recipiente). A sedimentação desses coloides segue-se então a um chamado "colapso do gel coloidal". Recentemente, foi demonstrado que as hemácias realmente seguem o mesmo comportamento. Essa hipótese também permite modelar de forma eficiente e analítica a curva de sedimentação de hemácias, a partir da qual descritores robustos e fisicamente significativos podem ser extraídos. Este artigo descreve como realizar tal análise e discute os benefícios dessa abordagem.

Introduction

A velocidade de hemossedimentação (VHS) é uma ferramenta clínica médica in vitro, formalmente introduzida na medicina baseada em evidências durante o século XX1,2,3,4. Atualmente, é utilizada mundialmente como teste inflamatório inespecífico, ou para monitorar a evolução de algumas condições específicas5,6,7,8. Isso se deve principalmente ao aumento da concentração de fibrinogênio, mas também de outros com....

Protocol

A coleta de amostras de sangue e os experimentos foram aprovados pela "Ärztekammer des Saarlandes", ética votum 51/18, e realizados após a obtenção do consentimento informado de acordo com a Declaração de Helsinque. As medições padrão devem ser realizadas com sangue anticoagulado com ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) (concentração padrão de EDTA de 1,6 mg/mL de sangue, norma europeia NF EN ISO 6710), em tubos de Westergren. O volume necessário para encher o tubo de Westergren depende do fabricante (já que as peças inferiores às vezes contêm um reservatório mais largo); O volume deve ser de cerca de 1 mL de sangue pleno, e 800 μL para os tubos indicados na

Results

Um exemplo de uma sequência de imagens adquirida corretamente é fornecido como Filme Suplementar 1 (MovieS1.avi). Uma série de ajustes característicos do modelo é mostrada para várias condições na Figura 2. A concentração de fibrinogênio foi determinada a partir da concentração de fibrinogênio no plasma Fib₀, assumindo que o soro não possui fibrinogênio. Assim, Fib = C Fib₀, onde C é a fração de volume plasmático na mistura pl.......

Discussion

Para que o protocolo automatizado funcione de forma eficiente, é importante ter um fundo claro e iluminação adequada. Um fundo escuro pode impedir a existência de um limiar de binarização eficiente. Para amostras com alguma hemólise, que geralmente ocorre (aumenta) ao longo do tempo, é importante verificar primeiro se o limiar de binarização escolhido é relevante tanto para as imagens iniciais quanto para as finais.

Quando se trata do processo de binarização da imagem, a escolha do ROI e do li.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Tubo anticoagulante (EDTA ou heparina) (para amostra de sangue)	SARSTEDT	267001 ou 265	Amostra de sangue anticoagulado para caracterizar
Câmera EOS M50	Kit Canon	EF-M18-150 IS STM	Qualquer câmera deve funcionar, desde que a alimentação do setor, a conexão ao computador para disparo automatizado e a objetiva adaptada estejam disponíveis
Centrífuga	HERMLE	302.00 V03 - Z 36 HK	Requisitos: pelo menos 3000 x g de 7 min.
Micro-centrífuga	MLW	TH21	ou qualquer outra forma de determinar o hematócrito
Micro-hematócrito capilaries	Fisher scientific	11884040	ou outros capilares/recipientes para determinação do hematócrito
Solução salina tamponada com fosfato (PBS)	ThermoFisher	10010023	1x PBS, pH 7,4, 298 Pipetas Osm
(por exemplo, pipeta de deslocamento positivo)	Gilson	FD10006	Pipeta necessária para manipular sangue e/ou células compactadas. Outros modelos são adequados, mas tome cuidado para tratar o sangue e as células como fluidos altamente viscosos.
Placa de vedação de cera	Hirschmann	9120101	Cera de vedação para os capilares de micro-hematócrito
Tubos de Westergren	Praxindo	A9244560	Qualquer outro tubo Wetsergren padrão deve funcionar também
Fundo branco com iluminação	/	/	Folha (s) de papel branca atrás das amostras, com luz ambiente usual é perfcetly suficiente.