O teste de segurança contra ameaças sociais permite uma avaliação simultânea do desenvolvimento de evitação social como uma medida da aprendizagem condicionada aversiva e da capacidade de discriminação de segurança contra ameaças sociais, ambos utilizados para identificar indivíduos suscetíveis e resilientes ao estresse dentro de um único grupo de camundongos machos cronicamente derrotados socialmente.
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Artigo de método
Teste de segurança contra ameaças sociais revela fenótipos psicossociais relacionados ao estresse
Neste artigo
Resumo
Resumo
O estresse social é uma das principais causas do desenvolvimento de transtornos mentais. Para aumentar o valor translacional de estudos pré-clínicos, a experiência de estresse social e seu impacto comportamental em camundongos devem ser comparáveis aos humanos. A derrota social crônica (DSC) utiliza um tipo de estresse social envolvendo ataques físicos e ameaças sensoriais para induzir disfunções mentais semelhantes a transtornos afetivos humanos. Para fortalecer o componente psicossocial do DSC, aplicou-se um protocolo de 10 dias de DSC, no qual as agressões físicas diárias são padronizadas para três episódios de 10 segundos seguidos por uma fase sensorial de 24 horas. Após a10ª fase sensorial, o protocolo de DSC é seguido por um ensaio comportamental refinado chamado teste de segurança de ameaça social (STST). Os ensaios comportamentais pós-estresse precisam determinar como e em que medida o estressor social influenciou o comportamento. O STST permite que camundongos machos cronicamente derrotados socialmente interajam com 2 novos indivíduos masculinos (alvos sociais): um alvo social da cepa atacante encontrada durante os dias de DSC e o outro de uma nova cepa. Ambos são apresentados simultaneamente em diferentes compartimentos de uma arena de teste de três câmaras. O teste permite uma avaliação simultânea do desenvolvimento da evitação social para medir a aprendizagem condicionada aversiva bem-sucedida e a capacidade de discriminação de segurança e ameaça social. O desenvolvimento de evitação social para ambas as cepas reflete uma resposta aversiva generalizada e, portanto, uma medida de suscetibilidade ao estresse. Enquanto isso, o desenvolvimento de evitação social em relação apenas à cepa agressora reflete discriminação ameaça-segurança e, portanto, uma medida de resiliência ao estresse. Finalmente, a ausência de evitação social em relação à tensão agressora reflete aprendizagem condicionada aversiva prejudicada. O protocolo visa refinar os modelos de camundongos atualmente usados de suscetibilidade/resiliência ao estresse, incluindo critérios translacionais, especificamente discriminação de segurança de ameaça e generalização de resposta aversiva, para categorizar um único grupo de animais cronicamente derrotados socialmente em subgrupos resilientes e suscetíveis, eventualmente avançando futuras abordagens translacionais.
Introdução
O estresse é definido como a ruptura da homeostase causada por estímulos físicos ou psicológicos1. O estresse é um importante fator de risco bem conhecido para o desenvolvimento de transtornos mentais, como transtorno de estresse pós-traumático, depressão e ansiedade 2,3. Em particular, o estresse social é considerado um importante fator de risco para o desenvolvimento de transtornos mentais relacionados ao estresse4. Um tipo de estresse social que tem ganhado particular importância nas pesquisas é o estresse de subordinação social5. Os ca....
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Protocolo
Todos os procedimentos foram realizados em conformidade com a Directiva do Conselho das Comunidades Europeias relativa aos cuidados e utilização de animais em procedimentos experimentais e foram aprovados pelas autoridades locais (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz). A Figura 1 representa uma linha do tempo esquemática.
1. Tratamento
- Animais de interesse: Obter camundongos machos C57BL6/J com 7 semanas de idade e, na chegada, em uma instalação com temperatura e umidade controladas em um ciclo claro-escuro de 12 h (luzes acesas: 8:00; luzes apagadas: 20:00; 23 °C; 38% de umidade) c....
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Resultados
Índice de interação social como medida de resposta condicionada aversiva
Um índice de interação social ≥1 reflete maior interação social com o respectivo alvo social em comparação com a exploração dos recintos de malha vazios. Em condições basais, aqui definidas como não tendo experiência apetitiva ou aversiva com os traços caracterizadores de uma cepa específica (aqui tanto alvos sociais para o grupo controle quanto o alvo social 129/Sv para o grupo de tratamento), níveis de sociabilidade intactos sã.......
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Discussão
O protocolo comportamental aqui descreve o Teste de Segurança de Ameaça Social, usado para dividir um único grupo de tratamento pós-DSC em três subgrupos diferentes, servindo como um método para investigar a biologia subjacente da suscetibilidade ao estresse e resiliência e testar terapias potenciais. O contexto biológico e os detalhes técnicos precisam ser cuidadosamente considerados para orientar um planejamento experimental completo.
Diferentes condições de moradia podem alterar os níveis d.......
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Divulgações
Os autores não têm nada a revelar.
Agradecimentos
Esta pesquisa é apoiada pelo Centro de Pesquisa Colaborativa 1193, Subprojeto Z02, financiado pela Fundação Nacional de Pesquisa da Alemanha (SFB1193, Neurobiologia da Resiliência) e pela Fundação Boehringer Ingelheim (concessão ao Instituto Leibniz de Pesquisa em Resiliência e Fenotipagem Individual e Análise Comportamental Automatizada de Alta Resolução). Gostaríamos de agradecer ao Dr. Konstantin Radyushkin e à Sra. Sandra Reichel por sua assistência técnica, bem como à Sra. Hanna Kim por seu suporte em inglês. As fontes de financiamento não tiveram envolvimento no desenho do modelo; coleta, análise e interpretação dos dados; na redação do protocolo; e na decisão d....
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Arenas | Noldus, Gaiola de sociabilidade, Wageningen, Holanda | https://www.noldus.com/applications/sociability-cage | Três câmaras, em forma retangular com um tamanho total de 60 cm x 40 cm, feito de paredes transparentes de acrílico e pisos lisos |
| Câmera para gravação de vídeo | Basler AG, Alemanha An der Strusbek 60-62 22926 Ahrensburg | ace Classic acA1300-60gc | Se estiver usando o programa de detecção automática, certifique-se de que as câmeras sejam compatíveis |
| Objetiva da câmera | KOWA Kowa Optimed Deutschland GmbH Fichtenstr. 123 40233 Düsseldorf: LMVZ4411 | 1/1.8" 4.4~11mm Varifokal Objektiv | Part-No. 10504 | |
| Programa de detecção/Temporizador | Noldus, EthoVision-XT, Wageningen, Holanda | https://www.noldus.com/ethovision-xt | A detecção pode ser realizada manualmente (usando um temporizador ou um software para pontuação manual) ou automaticamente |
| Gaiolas de alojamento | ZOONLAB GmbH, Hermannstraß e 6, 44579 Castrop-Rauxel | 3010010 | gaiolas Tipo 2: 265 mm x 205 mm x 140 mm (c x l x a), ou seja, 360 cm² área inferior. Feito de policarbonato (Makrolone©) e Polysulfone. As tampas são feitas de aço inoxidável. Gaiolas padrão europeias para até 5 ratos (20– 25 g). Autoclavável até 134 > Gabinetes de |
| malha C | Parte do Pacote Arena: Noldus, Gaiola de Sociabilidade, Wageningen, Holanda | https://www.noldus.com/applications/sociability-cage | Pequena gaiola de acrílico ou metal com um diâmetro de 100 mm e uma altura de 200 mm com aberturas de 10 mm de tamanho. Dois gabinetes de malha por arena funcionariam, mas quatro é preferível (consulte o ponto 2.5 no protocolo) |
| Parede de malha | de fabricação própria | N / A | Acrílico ou metal, um para cada gaiola. O tamanho depende das gaiolas usadas. As paredes não devem permitir que os dois animais tenham contato físico |
| Alvos sociais: Camundongos das linhagens CD-1 e 129/Sv; reprodutores machos aposentados | Camundongos fornecidos pela Charles River: Nome da cepa: CD-1® IGS Mouse 129S2/SvPasCrl | Crl:CD1(ICR); 129S2/SvPasCrl | CD-1 e 129/Sv reprodutores machos aposentados, de casa única, novos (desconhecidos) coespecíficos para os animais de interesse. Se os criadores aposentados não estiverem disponíveis, os machos com mais de 1 ano de ambas as linhagens seriam suficientes |
Referências
- Hyman, S. E. How mice cope with stressful social situations. Cell. 131 (2), 232-234 (2007).
- Kessler, R. C. The effects of stressful life events on depression. Annual Review of Psychology. 48 (1), 191-214 (1997).
- Vos, T., et al.
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Reimpressões e permissões
