Detecção em tempo real de afinidade dinâmica entre biomoléculas usando a tecnologia de ressonância plasmônica de superfície (SPR)

Wenqiao An; Zhihao Sun; Pengmei Guo; Xiaobo Wang; Sanyin Zhang

doi:10.3791/65946

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Artigo de método

Detecção em tempo real de afinidade dinâmica entre biomoléculas usando a tecnologia de ressonância plasmônica de superfície (SPR)

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DOI:

10.3791/65946

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29 de setembro de 2023

Wenqiao An^*¹ , Zhihao Sun^*¹ , Pengmei Guo² , Xiaobo Wang²^,³ , Sanyin Zhang²^,³

¹School of Basic Medical Sciences, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, ²Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, ³Research Institute of Integrated Traditional Chinese Medicine and Western Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

^* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

O presente estudo tem como objetivo elucidar o princípio e a metodologia da tecnologia de ressonância plasmônica de superfície (SPR), que encontra aplicações versáteis em vários domínios. Este artigo descreve a tecnologia SPR, sua simplicidade operacional e sua notável eficácia, com o objetivo de promover uma maior conscientização e adoção dessa tecnologia entre os leitores.

Resumo

A tecnologia de ressonância plasmônica de superfície (SPR) é um método preciso e sensível para detectar vírus, proteínas moleculares patogênicas e receptores, determinar tipos sanguíneos e detectar adulteração de alimentos, entre outras detecções biomoleculares. Essa tecnologia permite a identificação rápida de possíveis ligações entre biomoléculas, facilitando a triagem rápida e não invasiva de vários indicadores sem a necessidade de rotulagem. Além disso, a tecnologia SPR facilita a detecção em tempo real para triagem de drogas de alto rendimento. Neste programa, o campo de aplicação e os princípios básicos da tecnologia SPR são brevemente introduzidos. O processo de operação é descrito em detalhes, começando com a calibração do instrumento e a operação básica do sistema, seguida pela captura de ligantes e análise multiciclo do analito. A curva em tempo real e os resultados experimentais da ligação da quercetina e da calicosina à proteína KCNJ2 foram elaborados. No geral, a tecnologia SPR fornece um método altamente específico, simples, sensível e rápido para triagem de medicamentos, detecção em tempo real de farmacocinética relacionada, detecção de vírus e identificação ambiental e de segurança alimentar.

Introdução

A tecnologia de ressonância plasmônica de superfície (SPR) é uma técnica de detecção óptica que elimina a necessidade de rotular o analito. Ele permite o monitoramento dinâmico e em tempo real da afinidade de ligação quantitativa, cinética e termodinâmica. Essa capacidade de alto rendimento é altamente sensível e reprodutível, permitindo a medição de várias taxas de abertura, taxas de desligamento e afinidade. Além disso, a pequena quantidade de amostra necessária aumenta ainda mais a utilidade desse método ^1,2. O método de detecção biomolecular de respos....