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Artigo de método

Estratégia de Gavagem para Fórmula de Decocção da Medicina Tradicional Chinesa em Camundongos Modelo de Osteossarcoma

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DOI:

10.3791/66177

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7 de junho de 2024

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Neste artigo

Resumo

O protocolo fornece um processo detalhado de padronização da fórmula de decocção e técnica de gavagem com decocção Yiqi Jiedu no modelo de osteossarcoma de camundongos como exemplo. Descreve a proteção animal e melhora a confiabilidade dos dados de pesquisa, fornecendo estratégias eficazes para investigar a eficácia terapêutica e os mecanismos moleculares das fórmulas de decocção in vivo.

Resumo

A fórmula de decocção é a forma farmacêutica mais utilizada na medicina tradicional chinesa e aplicada na prática clínica há milhares de anos por administração transoral, que se caracteriza por efeito rápido, fácil absorção e tratamento individualizado baseado nas síndromes específicas dos pacientes. A qualidade da fórmula de decocção é diretamente responsável pela eficácia clínica da medicina tradicional chinesa; Portanto, o processo de padronização da fórmula de decocção é importante para evitar diferenças na qualidade da decocção causadas por fatores subjetivos. Enquanto isso, devido às limitações da realização de experimentos clínicos, pequenos animais portadores de doenças humanas, como camundongos, são frequentemente usados em pesquisas médicas para explorar a eficácia terapêutica e mecanismos abrangentes de diferentes intervenções, incluindo a fórmula de decocção para a medicina tradicional chinesa. Consequentemente, como um importante método de administração transoral, a técnica de gavagem habilidosa é particularmente importante para evitar possíveis danos ao esôfago e derramamento de drogas, o que garantirá uma quantidade igual de medicamento sendo administrada a cada animal modelo, levando a resultados experimentais precisos. Além disso, o método padronizado de preparação da fórmula de decocção e a estratégia de gavagem habilidosa são necessários para proteger o bem-estar animal e minimizar o número de animais utilizados. Aqui, relatamos um processo detalhado de padronização da fórmula de decocção e técnica de gavagem com decocção Yiqi Jiedu em modelo de osteossarcoma em camundongos como exemplo. A eficácia foi avaliada pelo volume tumoral. Este protocolo maximizará a proteção animal e melhorará a confiabilidade dos dados de pesquisa, fornecendo estratégias eficazes para futuras investigações da eficácia terapêutica e dos mecanismos moleculares da fórmula de decocção para a medicina tradicional chinesa in vivo.

Introdução

A fórmula de decocção é a forma farmacêutica mais utilizada da medicina tradicional chinesa e dos medicamentos líquidos 1,2. A fórmula de decocção da medicina tradicional chinesa é processada pela decodificação das ervas em água após serem embebidas e, seguidas de filtragem para descartar as borras.

Como a fórmula de decocção pode ser individualizada com base nas necessidades clínicas, especialmente de acordo com as características do tratamento baseado em evidências na medicina tradicional chinesa, essa forma farmacêutica via administração transoral tem sido aplicada na pr....

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Protocolo

Este protocolo descreve a técnica detalhada de gavagem em camundongos modelo de osteossarcoma usando a decocção Yiqi Jiedu como amostra. Camundongos atímicos machos com quatro semanas de idade (BALB/c nude) foram usados neste experimento e mantidos na sala de reprodução grau SPF do Laboratory Animal Center da Universidade de Medicina Tradicional Chinesa de Xangai. Todos os experimentos com animais foram aprovados pelo Comitê e Gestão Animal da Universidade de Medicina Tradicional Chinesa de Xangai, cumpriram o Código de Ética para Animais de Laboratório (Animal Ethics Approval Number: PZSHUTCM2304060007) e conduzidos em estrita conformidade com os requisitos internaci....

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Resultados

O efeito inibitório da decocção de Yiqi Jiedu sobre o crescimento de osteossarcoma in vivo foi determinado em um modelo de xenoenxerto intra-tibial de camundongo osteossarcoma, que foi preparado injetando as células do osteossarcoma 143B na tíbia de camundongos atímicos. A decocção Yiqi Jiedu foi administrada aos camundongos do grupo Yiqi Jiedu por gavagem por 28 dias a partir do segundo dia da injeção de 143B. Solução salina fisiológica foi administrada aos camundongos do grupo controle. Todos os camundongos fo.......

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Discussão

A eficácia clínica das ervas prescritas na medicina tradicional chinesa está amplamente associada com a dose administrada e forma de dosagem; Portanto, o estabelecimento de uma estratégia padronizada de decocção e um processo de administração habilidoso são necessários na prática clínica, bem como na melhoria da confiabilidade dos resultados experimentais.

Neste estudo, nós primeiro fornecemos uma estratégia detalhada para a decocção padronizada de ervas chinesas usadas na prática clínica da m.......

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Divulgações

Os autores declaram que não têm nada a divulgar.

Agradecimentos

O trabalho atual é apoiado por subsídios da (1) National Nature Science Foundation (81973877 e 82174408), (2) National Key R&D Program of China (2020YFE0201600), (3) Shanghai Top Priority Research Center building project (2022ZZ01009), (4) Shanghai Collaborative Innovation Center of Industrial Transformation of Hospital TCM Preparation, e (5) Projetos de Pesquisa dentro do Orçamento da Universidade de Medicina Tradicional Chinesa de Xangai (2021LK047).

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
linha celular 143B ATCCCRL-8303linha celular osteossarcoma
Máquina de anestesiaShenzhen RWD Life Technology Co., LtdR500IPO equipamento de camundongos de anestesia
contador automático de célulasShanghai Simo Biological Technology Co., LtdIC1000Contando células
BALB / c camundongos atímicosShanghai SLAC Laboratory Animal Co, Ltd.farpada animalmasculina
Shanghai Yanghetang Medicina Tradicional Chinesa Tablet Co., Ltd.20230606Medicamentos prontos para decocção 
Matriz de membrana basalShanghai Uning BioscienceTechnology Co., Ltd356234, BD, Matrigelressuspende células
Tubo de centrífuga (15 mL)Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd430790, CorningCentrifuga as células
Agulha de gavagem de cotovelo (calibre 12 / 55 mm)RWD Life Science Co., Ltd.C21014-12Componente do dispositivo de perfusão gástrica
GauzeHaishi Hainuo Group Co., Ltd.LC45Filtro de decocção
GinsengShanghai Wanshicheng Pharmaceutical Co., Ltd.20220704-2Medicamentos prontos para decocção 
Hedyotis diffusaShanghai Yanghetang Medicina Tradicional Chinesa Tablet Co., Ltd.2023071107Medicamentos prontos para decocção 
isofluranoShenzhen RWD Life Technology Co., LtdVETEASYCamundongos de anestesia
Seringa de microvolumeXangai indústria e comércio de pombos altos Co., Ltd0-50 μ LInjete células precisas na tíbia
Solução salina tamponada com fosfatoBeyotime BiotechnologyST447lave as células de osteossarcoma humano
Bandas de borrachaShanghai Hengfei Biotechnology Co., Ltd.XPJGaze de fixação no copo medidor
Seringa (1 mL)Shanghai Mishawa Medical Industry Co., Ltd.SBM0040Componente do dispositivo de perfusão gástrica
Tripsina (0,25%)Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd25200056,Gibco tripsina tratamento de células
Erva

Referências

  1. Gao, S. Discussion on advantages and improvement of traditional Chinese medicine decoction. Chinese Community Physicians (Comprehensive Edition). (21), 12(2005).
  2. Chinese Pharmacopoeia Commission. Pharmacopoeia of the People's Republic of China. , (2015).
  3. An, Y., et al. Interpretation on specifi....

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Reimpressões e permissões

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