A fórmula de decocção é a forma farmacêutica mais utilizada na medicina tradicional chinesa e aplicada na prática clínica há milhares de anos por administração transoral, que se caracteriza por efeito rápido, fácil absorção e tratamento individualizado baseado nas síndromes específicas dos pacientes. A qualidade da fórmula de decocção é diretamente responsável pela eficácia clínica da medicina tradicional chinesa; Portanto, o processo de padronização da fórmula de decocção é importante para evitar diferenças na qualidade da decocção causadas por fatores subjetivos. Enquanto isso, devido às limitações da realização de experimentos clínicos, pequenos animais portadores de doenças humanas, como camundongos, são frequentemente usados em pesquisas médicas para explorar a eficácia terapêutica e mecanismos abrangentes de diferentes intervenções, incluindo a fórmula de decocção para a medicina tradicional chinesa. Consequentemente, como um importante método de administração transoral, a técnica de gavagem habilidosa é particularmente importante para evitar possíveis danos ao esôfago e derramamento de drogas, o que garantirá uma quantidade igual de medicamento sendo administrada a cada animal modelo, levando a resultados experimentais precisos. Além disso, o método padronizado de preparação da fórmula de decocção e a estratégia de gavagem habilidosa são necessários para proteger o bem-estar animal e minimizar o número de animais utilizados. Aqui, relatamos um processo detalhado de padronização da fórmula de decocção e técnica de gavagem com decocção Yiqi Jiedu em modelo de osteossarcoma em camundongos como exemplo. A eficácia foi avaliada pelo volume tumoral. Este protocolo maximizará a proteção animal e melhorará a confiabilidade dos dados de pesquisa, fornecendo estratégias eficazes para futuras investigações da eficácia terapêutica e dos mecanismos moleculares da fórmula de decocção para a medicina tradicional chinesa in vivo.