Artigo de método

Detecção rápida de virulência e tipagem de Helicobacter pylori usando a tecnologia de marcação de pontos quânticos

DOI:

10.3791/67792

⸱

13 de junho de 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Laboratory Medicine, Guangdong Provincial People's Hospital (Guangdong Academy of Medical Sciences), Southern Medical University

* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Entre os inúmeros métodos de diagnóstico para Helicobacter pylori, a imunofluorescência de pontos quânticos pode tipificar e detectar rapidamente Helicobacter pylori, fornecendo uma base para decisões de tratamento clínico. Este artigo fornece uma introdução detalhada ao valor da aplicação da tecnologia de pontos quânticos na tipagem e detecção de Helicobacter pylori.

Resumo

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Apresentamos um método baseado na tecnologia de marcação de pontos quânticos para detectar rapidamente a virulência do Helicobacter pylori e realizar a tipagem, com o objetivo de superar as limitações dos métodos diagnósticos convencionais e fornecer uma base para o tratamento clínico personalizado. Um kit foi projetado usando o método de sanduíche de antígeno duplo. Isso envolveu uma série de etapas meticulosas, incluindo o estabelecimento de sistemas de reação tampão e a realização de processos de ativação e acoplamento para reações antígeno-anticorpo durante a preparação do kit. Além disso, havia procedimentos específicos para operações de coleta, processamento e teste de amostras para determinar o status de infecção e o tipo de virulência de Helicobacter pylori. Ao estabelecer modelos de dados para diferentes resultados (negativo, tipo II e tipo I), foi verificada a eficácia da tecnologia de pontos quânticos na detecção de digitação. No caso de amostras negativas, houve valores de sinal fracos ou inexistentes nas áreas de detecção relevantes. Para amostras do tipo II, foi observado um padrão específico de valores de sinal positivo e negativo para diferentes anticorpos e, para amostras do tipo I, foi observado um conjunto distinto de valores de sinal positivo correspondentes a anticorpos-chave. Além disso, sua aplicação em estudos relacionados à gastrite crônica e ao câncer gástrico demonstrou seu valor em servir como indicador de rastreamento. O método baseado em pontos quânticos tem vantagens como sensibilidade e especificidade aprimoradas em comparação com os métodos de diagnóstico tradicionais. No entanto, também enfrenta desafios como impactos potenciais do tempo de armazenamento da amostra e custos relativamente altos. No entanto, com as contínuas inovações tecnológicas, espera-se que desempenhe um papel mais significativo no campo biomédico para a detecção de Helicobacter pylori e diagnóstico de doenças relacionadas no futuro.

Introdução

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

O Helicobacter pylori (H. pylori) é uma bactéria Gram-negativa encontrada entre a mucosa pilórica e a submucosa do antro gástrico 1,2. Em 1994, a Organização Mundial da Saúde/Agência Internacional de Pesquisa sobre o Câncer (OMS/IARC) classificou-o como cancerígeno de Classe I. De acordo com a expressão de citotoxina A (VacA) vacuolar e toxinas do gene A () relacionadas à citotoxina, elas são divididas em dois tipos: cepa virulenta de infecção por H. pylori tipo I: mais virulenta e mais prejudicial aos pacientes. Intimamente relacionada à incidência de úlceras gástricas, duodenais e câncer gástrico, a infecção por H. pylori tipo II envolve cepas de baixa virulência com fraca patogenicidade, geralmente manifestando-se como indigestão leve 3,4. Os pesquisadores descobriram que a taxa de infecção do tipo I é maior do que a do tipo II, com as taxas de infecção do tipo I e do tipo II sendo de 72,4% e 27,6%, respectivamente5. A detecção rápida dos tipos de H. pylori, especialmente a distinção entre tipo I e tipo II, é crucial para o tratamento clínico e a prevenção de doenças.

A gastrite crônica causada pela infecção por H. pylori pode levar a doenças graves do sistema digestivo, como gastrite atrófica, úlcera péptica, adenocarcinoma gástrico e linfoma de tecido linfóide associado à mucosa (MALT) em pacientes infectados 6,7,8. O Estudo Global de Carga de Doenças de 2014 prevê que, a partir de 2010, aproximadamente 3,5 mortes por 100.000 pessoas serão causadas por úlcera péptica a cada ano9. Relatórios de pesquisa descobriram que quase 800.000 novos casos de câncer gástrico em todo o mundo em 2018 estavam relacionados à infecção por H. pylori 10. Nos últimos anos, estudos descobriram que a infecção por H. pylori também está intimamente relacionada a doenças neurológicas, doenças cardiovasculares, diabetes, etc. A infecção por H. pylori tornou-se um problema de saúde pública global. Portanto, a detecção precisa da infecção por H. pylori é importante para a detecção de doenças relacionadas. O tratamento é crucial, tornando a detecção precisa do H. pylori um ponto de pesquisa.

Como a taxa de infecção por H. pylori é alta na China, a detecção oportuna e precisa da infecção por H. pylori é útil para a detecção e tratamento precoces e tem um significado positivo para a prevenção e tratamento do câncer gástrico. Existem vários métodos para detectar a infecção por H. pylori, incluindo métodos invasivos, como teste rápido de urease (RUT), microscopia corada de cortes de tecido da mucosa gástrica, endoscopia e teste respiratório de uréia C13 ou C14. (UBT), teste de antígeno fecal (SAT) de H. pylori e outros métodos não invasivos 11,12,13. Esses métodos de detecção têm certas limitações. Por exemplo, o exame histológico pode dar resultados falsos negativos devido à qualidade e tamanho da amostra de biópsia selecionada no local da biópsia; o teste respiratório pode ser afetado pelo uso recente de antibióticos ou inibidores da bomba de prótons (IBP) pelo paciente e pela influência de vários fatores de influência 11,14,15. Tendo em vista as limitações dos métodos tradicionais, como sensibilidade e especificidade demoradas e insuficientes, o desenvolvimento de métodos diagnósticos rápidos baseados na imunofluorescência de pontos quânticos (QD-IF) tem mostrado grande potencial de aplicação no campo dos bioensaios16,17. A análise QD-IF introduz sondas fluorescentes de pontos quânticos para obter detecção específica de alvos moleculares por meio de ligação específica a alvos moleculares18,19.

Os pontos quânticos são nanopartículas semicondutoras com um raio menor ou próximo ao raio do éxciton de Bohr, geralmente de 1 a 10 nm. Os pontos quânticos são usados como sondas fluorescentes. Os sinais de fluorescência são gerados por pontos quânticos emocionantes e os dados quantitativos são obtidos medindo o dispositivo. Suas vantagens incluem uma ampla gama de comprimentos de onda de excitação, comprimentos de onda de emissão estreitos, tamanho de fluorescência ajustável, alta sensibilidade, boa estabilidade óptica, longa vida útil de fluorescência, grande deslocamento de Stokes e alta eficiência de fluorescência quântica. Os pontos quânticos superam as deficiências de outros marcadores, como tempo de luminescência curto, requisitos ambientais precisos, baixa repetibilidade, baixa estabilidade (como corantes fluorescentes), inativação enzimática e baixa sensibilidade. O imunoensaio de fluorescência de pontos quânticos combina as vantagens do imunoensaio de fluorescência de pontos quânticos e do imunoensaio de fluorescência de biomarcadores e tem as vantagens de simplicidade, rapidez, alta especificidade e alta sensibilidade20,21.

As ferramentas de diagnóstico tradicionais para detecção de H. pylori, incluindo cultura bacteriana, teste respiratório de uréia e testes sorológicos, têm suas próprias limitações. A cultura bacteriana é demorada e requer condições laboratoriais rigorosas, muitas vezes resultando em sensibilidade relativamente baixa devido aos requisitos de crescimento exigente de H. pylori. O teste respiratório da ureia pode produzir resultados falso-negativos em certas circunstâncias, como uso recente de antibióticos ou inibidores da bomba de prótons 22,23,24. Os testes sorológicos só podem indicar exposição passada em vez do status atual da infecção em alguns casos, e não têm a capacidade de distinguir entre diferentes tipos de virulência do patógeno.

Em contraste, a tecnologia de imunofluorescência quântica de pontos (QD-IF) surgiu como uma alternativa promissora. O QD-IF combina as excelentes propriedades ópticas dos pontos quânticos, como alta intensidade de fluorescência, espectros de emissão estreitos e boa fotoestabilidade, com a especificidade das reações imunológicas. Isso permite a detecção rápida e sensível de antígenos ou anticorpos de H. pylori em amostras biológicas. Além disso, tem a vantagem única de ser capaz de identificar simultaneamente o tipo de virulência da cepa infectante, que os métodos tradicionais lutam para alcançar. Ao preencher essa lacuna no processo de diagnóstico, a tecnologia QD-IF tem grande potencial para revolucionar a maneira como diagnosticamos e gerenciamos infecções por H. pylori , facilitando intervenções médicas mais personalizadas e eficazes.

No geral, há uma necessidade clínica urgente de um método diagnóstico não invasivo e eficaz que possa detectar a infecção por H. pylori e seus tipos de virulência (tipo I e tipo II) simultaneamente. Este artigo tem como objetivo utilizar o método QD-IF para avaliar a presença de infecção por H. pylori em amostras de tecido e construir um método rápido e preciso para detectar os tipos de infecção por H. pylori . A detecção rápida da infecção por H. pylori e seus tipos de virulência é de grande importância para alcançar a medicina de precisão, melhorar os efeitos do tratamento, reduzir o risco de doenças relacionadas e prevenir o câncer gástrico. Ele fornece uma base teórica científica para a equipe clínica escolher métodos precisos de detecção de infecção por H. pylori .

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Protocolo

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Este estudo (KY2025-191-01) foi realizado de acordo com as diretrizes do comitê de ética em pesquisa humana do Hospital Popular da Província de Guangdong (Academia de Ciências Médicas de Guangdong), Southern Medical University. Este artigo está em conformidade com o pedido de isenção do consentimento informado.

NOTA: Este estudo tem como objetivo usar a tecnologia de pontos quânticos para projetar e desenvolver um kit para diagnosticar se as espécies sanguíneas dos participantes contêm anticorpos de urease (Urease) de Helicobacter pylori , anticorpos vacuolares de citotoxina A (VacA) e anticorpos de toxina do gene A () relacionados à citotoxina para determinar se H . pylori está infectado e se a cepa infectada é tipo I ou tipo II. Este kit projetado usa um método de sanduíche de antígeno duplo para medir anticorpos Helicobacter pylori Urease, anticorpos e anticorpos VacA. Quando a amostra de teste contendo a substância alvo é adicionada à almofada de amostra, ela flui através da almofada quântica e da membrana por meio da ação do sifão, formando um complexo antígeno-anticorpo em fase sólida. Após a detecção, a linha de detecção e a massa são lidas, respectivamente, pelo analisador. O valor do sinal da linha de controle é usado para determinar o status negativo e positivo do anticorpo Urase, anticorpo e anticorpo VacA com base nos valores de sinal T/C de cada um dos três anticorpos. O diagrama de projeto é mostrado na Figura 1.

figure-protocol-1
Figura 1: Diagrama esquemático do cartão de teste de digitação de H. pylori . A figura mostra a estrutura e composição do cartão de teste. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

1. Preparação do kit

  1. Estabelecimento do sistema de reação tampão do ácido etanossulfônico (MES) QDs-2-(n-morfina)
    1. Equilibre a solução original de QDs à temperatura ambiente (RT). Em seguida, aspire 1000 μL e adicione um volume igual de solução 2x MES (a concentração final de MES foi de 10 mmol / L).
    2. Misture, agite e sonice por 30 s a 3 min.
  2. Ativação
    1. Adicione 20 mg / mL de 1-etil-3- (3-dimetilaminopropil) carbodiimida (EDC) / N-hidroxisuccinimida (NHS) no sistema tampão QDs-MES na proporção de 10: 1. Misture, agite e sonice por 3 min.
    2. Colocar a solução preparada num banho-maria a 37 °C durante 15 min e centrifugar a 13.000 × g durante 20 min.
    3. Remova o sobrenadante da solução centrifugada e dissolva-o novamente com 1x solução MES. Sopre a solução repetidamente com uma pipeta, agite para misturar uniformemente e sonice por 3 min.
    4. Colocar a solução acima em banho-maria a 37 °C durante 15 min e centrifugar a 13.000 × g durante 20 min.
  3. Acoplamento
    1. Adicione 0,03 mg de antígeno Urease, antígeno, antígeno VacA e IgG anti-camundongo de cabra a 1000 μL da solução de ativação, pipete a ponta repetidamente, agite e sonice por 3 min.
    2. Colocar a solução acima referida num banho-maria a 37 °C e reagir durante 3 h.
  4. Fechamento e armazenamento
    1. Adicione 100 μL de solução de bloqueio (Tabela Suplementar 1) e incube por 1 h.
    2. Centrifugar a solução bloqueada a 13.000 × g durante 15 min.
    3. Retirar o sobrenadante da solução centrifugada, adicionar 750 μl de solução de reconstituição (Tabela Suplementar 1), pipetar repetidamente, agitar e sonicar durante 5 min e conservar a 4 °C.

2. Preparação de placas revestidas

  1. Preparação de almofadas quânticas
    1. Diluir o complexo de antígenos H . pylori marcado com pontos quânticos 1:5 com tampão de diluição de pontos quânticos para preparar a quantidade necessária de acordo com a produção em lote.
    2. Pegue a almofada quântica e pulverize uniformemente uma certa quantidade de complexo de antígeno H . pylori marcado com pontos quânticos na almofada usando um pulverizador de filme e seque a 37 ° C por 30 min.
  2. Preparação da membrana
    1. Use o buffer de impressão para diluir a linha de controle e os materiais de revestimento da linha de teste e prepare a quantidade necessária de acordo com o volume de produção do lote.
    2. Cole a membrana de nitrocelulose na placa de cloreto de polivinila (PVC), use um pulverizador de ouro para revestir uniformemente a linha de controle de qualidade e os materiais da linha de teste na membrana e seque a 57 ° C por 24 h.

3. Montagem

  1. Cole o quantum e sample pads na placa de PVC revestida por filme em sequência.

4. Corte em tiras

  1. Use um cortador de tiras para cortar a placa grande montada em tiras de teste.

5. Embalagem interna

  1. Complete a embalagem de acordo com os requisitos de composição do kit.
    NOTA: Os componentes do kit são os seguintes: (i) Cartão de teste: Consiste em um invólucro de tira de teste e uma tira de teste. A tira de teste consiste em uma placa de PVC, uma almofada de amostra, uma almofada quântica (um complexo de antígeno marcado com pontos quânticos; o complexo contém antígeno Urease, antígeno, antígeno VacA e IgG de camundongo), uma membrana de nitrocelulose (a área de detecção é fixada com antígeno VacA, antígeno e antígeno Urease (expressão eucariótica de antígeno recombinante) e a área de controle de qualidade é revestida com IgG anti-camundongo caprino (anticorpo poli caprino)), e papel absorvente. Diferentes especificações de embalagem têm diferentes quantidades de cartão de teste. É necessário um cartão de teste para o reagente de uma pessoa. (ii) Cartão SD: 1 peça/caixa. Os componentes do cartão de teste e do cartão digital seguro (SD) de diferentes lotes de kits de teste não devem ser misturados.

6. Processamento de amostras

NOTA: Para coleta de amostras, consulte os Procedimentos Operacionais do Laboratório Clínico Nacional.

  1. Colete sangue em um tubo de gel de separação. Tome cuidado para evitar hemólise.
  2. Testar a amostra de soro separada em 4 h à temperatura ambiente (RT). Se não puder ser testado a tempo, armazene a amostra a 2-8 °C por 3 dias. Para longo prazo (dentro de 1 ano), sele e armazene-o abaixo de -20 °C.
  3. Restaure as amostras para RT e misture-as bem antes de usar.
    NOTA: As amostras congeladas e descongeladas devem ser completamente descongeladas antes do uso, e o número de ciclos de congelamento e descongelamento não deve exceder cinco. Amostras repetidas congeladas e descongeladas podem causar a deterioração do analito e devem ser evitadas. Amostras graves de quilo e hemólise também afetarão o teste e devem ser evitadas.

7. Procedimento para o teste

  1. Retire o kit de reagentes e os materiais de controle de qualidade para equilibrar o RT.
  2. Preparação da amostra: Centrifugue as amostras de sangue total a 1467 g por 10 min.
  3. Verifique se o número do lote do cartão SD corresponde ao do kit de reagentes. Insira o cartão SD no instrumento para calibração automática.
  4. Ligue o instrumento e o computador operacional. Inicie o software designado e selecione o módulo de teste . Escolha Configurações de inicialização para inicializar o instrumento e aguarde a conclusão bem-sucedida.
  5. Acesse a área de reagente do instrumento e remova o slot do cartão de teste. Abra o kit de reagentes e selecione o número necessário de cartões de teste.
  6. Abra as bolsas de alumínio dos cartões de teste e coloque-as no slot de acordo com a orientação indicada. Reinsira o slot de cartão na área de reagente do instrumento.
  7. Teste de controle de qualidade (CQ)
    1. No módulo Teste , selecione Entrada Manual. Clique em Entrada de informações e insira as informações específicas do material de CQ. Clique em Gerar. Coloque os materiais de controle de qualidade no rack de amostras designado, garantindo a ordem e orientação corretas.
    2. Clique em Iniciar teste para iniciar o teste de CQ. A agulha de amostra do instrumento aspirará 80 μL da amostra e a dispensará verticalmente no poço da amostra. O instrumento começará a cronometrar automaticamente após a distribuição da amostra. Após 15 min, o instrumento realizará a detecção, lerá os valores de medição e emitirá os resultados.
  8. Teste de amostra: no módulo Teste , selecione LIS bidirecional. Coloque as amostras a serem testadas no suporte de amostras designado, garantindo a ordem e orientação adequadas. Clique em Iniciar teste. O instrumento aspirará 80 μL de amostra de cada um e os processará de forma idêntica ao processo de controle de qualidade.
  9. Assim que o teste for concluído, remova os cartões de teste usados do instrumento e descarte-os como lixo médico.

8. Controle de qualidade

  1. H. pylori negativo: Verifique e certifique-se de que os resultados dos produtos de referência negativos para Helicobacter pylori , ou seja, anticorpo Urease, anticorpo e anticorpo VacA, são todos negativos.
  2. Infecção por H. pylori tipo II: Verifique e certifique-se de que o produto de referência do Helicobacter pylori tipo II, ou seja, o anticorpo Urease, seja positivo e os resultados do anticorpo e do anticorpo VacA sejam todos negativos.
  3. Infecção por H. pylori tipo I: Verifique e certifique-se de que o produto de referência Helicobacter pylori tipo I, ou seja, o anticorpo Urease é positivo, o anticorpo e/ou o anticorpo VacA são positivos.

9. Análise dos resultados

  1. Infecção tipo II com cepas fracas ou não toxigênicas: Quando a leitura do anticorpo Urease é positiva e as leituras do anticorpo e do anticorpo VacA são negativas, interprete-a como uma infecção por uma cepa fraca ou não toxigênica de H. pylori .
  2. Infecção tipo I com cepas produtoras de toxinas altamente patogênicas: Quando a leitura do anticorpo Urease é positiva e a leitura do anticorpo ou do anticorpo VacA é positiva, ou ambos são positivos, interprete-a como uma infecção por uma cepa produtora de toxina H . pylori altamente patogênica.
  3. Negativo: Quando as leituras do anticorpo Urease, anticorpo e anticorpo VacA forem todas negativas, interprete-o como nenhuma infecção por cepas de H. pylori .
  4. Inválido: Quando o instrumento julgar o resultado como inválido, verifique se há operação incorreta ou falha do kit de reagentes e tente o procedimento novamente.

10. Calibração do analisador de fluorescência

  1. Primeiro, ligue o analisador e deixe-o aquecer por cerca de 15 minutos para estabilizar seu desempenho. Em seguida, insira o padrão de calibração fornecido pelo fabricante no porta-amostras.
  2. Em seguida, acesse a função de calibração na interface do analisador e inicie o processo. O analisador detectará automaticamente a fluorescência do padrão e ajustará seus parâmetros internos de acordo para corresponder aos valores de referência predefinidos.
  3. Depois disso, remova o padrão de calibração e insira uma amostra em branco para verificar se as leituras estão dentro da faixa aceitável.
  4. Repetir regularmente essas etapas de acordo com o cronograma recomendado ajuda a manter a precisão do analisador para medições confiáveis.

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Resultados

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

A Figura 2 mostra o princípio de funcionamento do imunoanalisador de fluorescência de pontos quânticos. Consiste principalmente em uma fonte de luz de excitação, uma fonte de luz receptora, um módulo de circuito de conversão fotoelétrica, um circuito de processamento de sinal, um circuito de conversão de valor AD e um módulo de cálculo de processamento de sinal; A fonte de luz de excitação gera marcadores fluorescentes. Ele absorve luz monocromática com comprimento de onda semelhante, e a lu...

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Discussão

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Os métodos diagnósticos atuais para Helicobacter pylori são divididos principalmente em duas categorias: invasivos e não invasivos26. Métodos como teste rápido de urease (RUT), histologia, biologia molecular e cultura bacteriana têm limitações em invasividade, sensibilidade, especificidade, restrições de tempo, custo, requisitos de equipamento, manuseio de amostras e monitoramento em tempo real. Mais comuns são os diagnósticos rápidos in vitro us...

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Divulgações

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Os autores declaram não haver conflitos de interesse.

Agradecimentos

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Esta pesquisa foi financiada pelo Projeto do Fundo de Pesquisa Básica e Aplicada da Província de Guangdong (Grant No.: 2021A1515220022, 2022A1515220023).

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
1- (3-dimetilaminopropil) -3-etilcarbodiimida cloridrato (EDC)Sigma25952-53-85 g / frasco
2- (n-morfina) ácido etanossulfônico (MES)Sigma145224-94-8100 g / garrafa
CentrífugaSigma3K15
Analisador Imuno de FluorescênciaGuangzhou Labsim Biotech Co., LtdProvíncia de Guangdong Registro de dispositivo médico nº.
Kit de Teste de Tipagem Helicobacter pylori Chongqing iSIA BIO-Technology Co., LtdRegistro nacional de dispositivos médicos nº 20203400330QDs Método de imunofluorescência
Sal de sódio de N-hidroxitiosuccinimida (NHS)Sigma106627-54-71 g / frasco
2017221743

Referências

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Tacconelli, E., et al. research and development of new antibiotics: WHO priority list of antibioticresistant bacteria and tuberculosis. Lancet Infect Dis. 18 (3), 318-327 (2018).
  2. Kamboj, A. K., et al. Helicobacter pylori: past, present, and future of treatment. Mayo Clin Proc. 92 (4), 599-604 (2017).
  3. Yamaoka, Y. Disease mechanisms: Helicobacter pylori virulence factors. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 7 (11), 629-641 (2010).
  4. Sharndama, H. C., Mba, I. E. Helicobacter pylori: an updated overview on its virulence and pathogenesis. Braz J Microbiol. 53 (1), 33-50 (2022).
  5. Lin, Y., et al. Infection status of type I and type II Helicobacter pylori in areas with high incidence of gastric cancer and its impact on gastrin and pepsinogen levels. World J Gastroenterol. 26 (25), 3673-3685 (2020).
  6. Li, Y. H., et al. Global prevalence of Helicobacter pylori infection from 1980 to 2022: a systematic review and metaanalysis. Lancet Gastroenterol Hepatol. 8 (6), 553-564 (2023).
  7. Karbalaei, M., Keikha, M. Rescue effect of lactobacillicontaining bismuth regimen on Helicobacter pylori treatment failure. New Microbiol New Infect. 42, 100904(2021).
  8. Malfertheiner, P., et al. Helicobacter pylori infection. Nat Rev Dis Primers. 9 (1), 19(2023).
  9. Stewart, B., et al. Global burden of disease requiring emergency surgery. Br J Surg. 101 (1), e9-e22 (2014).
  10. de Martel, C., et al. The global burden of cancer attributable to infection in 2018: a global incidence analysis. Lancet Glob Health. 8 (2), e180-e190 (2020).
  11. Godbole, G., et al. Review: diagnosis of Helicobacter pylori infection. Helicobacter. 25 (S1), e12735(2020).
  12. Lee, Y. C., et al. Diagnosis and treatment of Helicobacter pylori infection. Annu Rev Med. 73 (1), 183-195 (2022).
  13. Fischbach, W., Malfertheiner, P. Helicobacter pylori infection. Ger Int Med J. 115, 429-436 (2018).
  14. Zhang, C., et al. Survey on the quantitative detection of serum Helicobacter pylori antibodies in clinical laboratories in my country. J Clin Lab Anal. 36 (1), e24069(2021).
  15. Wan, W. S., et al. Improving the detection rate of Helicobacter pylori in chronic gastritis biopsies: a comparative analysis of H&E, methylene blue, WarthinStarry, immunohistochemistry, and quantum dot immunohistochemistry. Front Oncol. 13, 1229871(2023).
  16. Bodo, J., et al. Quantitative in situ detection of phosphoproteins in fixed tissues using quantum dot technology. J Histochem Cytochem. 57 (7), 701-708 (2009).
  17. Chen, C., et al. Quantum dotbased immunofluorescence technology for quantitative determination of HER2 expression in breast cancer. Biomaterials. 30 (15), 2912-2918 (2009).
  18. Kuang, H., et al. Recent developments in quantum dot analytical applications. TrAC Trends Anal Chem. 30 (10), 1620-1636 (2011).
  19. Park, Y., et al. Medically transformable quantum dots for biosensing and imaging. J Photochem Photobiol C Photochem Rev. 30, 51-70 (2017).
  20. SanmartinMatalbobs, J., et al. Semiconductor quantum dots as target analytes: properties, surface chemistry and detection. Chem Detect Nanomaterials. 12 (14), 2501(2022).
  21. Katan, C., Mercier, N., Even, J. Quantum and dielectric confinement effects in lowerdimensional hybrid perovskite semiconductors. Chem Rev. 119 (5), 3140-3192 (2019).
  22. Chinese Medical Association Branch of Health Management. Physical examination population 13C expert consensus on technical specifications for urea breath tests. Health Exam Manag. 2 (2), 94-96 (2021).
  23. National Clinical Medical Research Center for Digestive Diseases. Expert consensus on clinical application of Helicobacter pyloriurea breath test (2020). Chin J Health Manag. 14 (2020), 510-513 (2020).
  24. Zhang, Y., et al. The influence factors of Helicobacter pylori infection were detected by urea breath test. Chin J Clin Gastroenterol. 32 (3), 197-202 (2020).
  25. Lin, B., et al. Diagnostic value of gastric function triad and Helicobacter pylori typing in chronic gastritis and gastric cancer. Labeled Immunoassays Clin Med. 30 (1), 74-76 (2023).
  26. Cardos, A. I., et al. Evolution of diagnostic methods for Helicobacter pylori infection: from traditional tests to hightech, advanced sensitivity and identification tools. Diagnostics. 12 (508), 1-23 (2022).
  27. Ding, S. Z., et al. Chinese consensus report on familybased Helicobacter pylori infection control and management (2021 edition). Gut. 71 (2), 238-253 (2021).
  28. Wan, W., et al. Comparison of quantum dot immunofluorescence histochemistry and conventional immunohistochemistry in detecting Helicobacter pylori infection in paraffinembedded tissue of gastric biopsy. J Mol Histol. 52, 461-466 (2021).
  29. Zhou, Y., et al. Development of a fast and sensitive doubleantigen sandwich lateral flow immunoassay based on quantum dot nanobeads and its clinical performance in detecting SARSCoV2 total antibodies. Sens Actuators B Chem. 343, 130139(2021).
  30. Liu, H., et al. Consistency analysis of highsensitivity cardiac troponin I in peripheral blood and venous blood using quantum dot immunofluorescence method and its clinical application in acute myocardial infarction. J Chest Dis. 14 (4), 1267-1274 (2022).
  31. Xirong, W., et al. Development of quantum dotbased lateral flow immunoassay test strips for rapid and sensitive detection of SARSCoV2 neutralizing antibodies. Sci Rep. 13, 22253(2023).
  32. Purwidyantri, A., et al. Programmable graphenebased microfluidic sensor for DNA detection. Sens Actuators B Chem. 367, 132044(2022).
  33. Lee, K. S., Wagner, M., Stocker, R. Ramanbased sorting of microbial cells to link functions to their genes. Microb Cell. 7 (3), 62-65 (2020).
  34. Hu, C., et al. Design and fabrication of carbon dots for energy conversion and storage. Chem Soc Rev. 48 (8), 2315-2337 (2019).

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Reimpressões e permissões

Solicitar permissão para reutilizar o texto ou as figuras deste artigo JoVE

Solicitar permissão

Etiquetas

Detec o de Helicobacter PyloriTipagem de Virul nciaLiga o Ant geno AnticorpoReagentes de ImunocromatografiaSandu che de Ant geno DuploRastreamento de Gastrite Cr nicaBiomarcadores de C ncer G stricoCurva ROC Receiver Operating CharacteristicSensibilidade Diagn stica

Artigos relacionados