Este estudo demonstrou que o gentiopicrosídeo pode tratar a lesão hepática colestática, controlando a produção e o metabolismo de ácidos biliares e lipídios e prevenindo o estresse oxidativo e as respostas inflamatórias.
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Artigo de investigação
Este estudo demonstrou que o gentiopicrosídeo pode tratar a lesão hepática colestática, controlando a produção e o metabolismo de ácidos biliares e lipídios e prevenindo o estresse oxidativo e as respostas inflamatórias.
O principal componente ativo da Swertia chirayita, o gentiopicrosídeo (GPS), demonstrou proteger o fígado em casos de colestase. A fim de elucidar o mecanismo protetor do GPS na lesão hepática colestática, as células HepG2 foram tratadas com ácido quenodesoxicólico (CDCA) para simular o ambiente de colestase in vitro, e o método CCK-8 foi usado para determinar o efeito protetor do GPS nas células HepG2. Usando um kit biológico, foram detectados os conteúdos intracelulares de TBA, T-CHO, TG, ALP, ALT, AST, GSH, IL-1β, IL-6, TNF-α, SOD e MDA. A microscopia confocal a laser foi usada para confirmar o nível de ROS. As expressões das células HepG2 de SHP-2, Tgr5, CYP7A1 e NTCP foram avaliadas usando imunofluorescência e análise de Western blot. O software Autodock foi então usado para verificar o docking molecular de seus principais ingredientes ativos. Os resultados demonstraram que o GPS evitou significativamente os danos que o CDCA causou às células HepG2. Esse efeito protetor pode ter sido alcançado controlando a produção e o metabolismo de ácidos biliares e lipídios dentro da célula e prevenindo o estresse oxidativo e as respostas inflamatórias.
O local metabólico do sistema digestivo do corpo é o fígado. A secreção biliar é um mecanismo chave no processo de catabolismo de gordura do sistema hepatobiliar. Os constituintes primários da bile, os ácidos biliares, são liberados pelas células do fígado e são cruciais para preservar o equilíbrio do metabolismo da gordura. Tanto para indivíduos saudáveis quanto para casos doentes, os processos fisiológicos e patológicos do fígado dependem do equilíbrio de ácidos biliares livres e conjugados no fígado. Se esse equilíbrio for perturbado, a circulação de ácidos biliares não funcionará normalmente, o que pode levar à colestase intra-hep....
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Cultura e tratamento celular
As células HepG2 e o meio MEM foram adquiridos de um fornecedor comercial. As células HepG2 foram cultivadas em meio MEM suplementado com 10% de FBS, 1% de penicilina 100 U/mL e 100 U/mL de estreptomicina, a 37 °C e 5% de CO2 atmosfera. Após a adesão celular, os meios de cultura foram alterados. As células foram cultivadas na proporção de 1:3 após 2-3 dias e foram utilizadas no experimento quando a cultura de células atingiu 80% de confluência.
Ensaio de viabilidade celular
No dia 1, as células foram semeadas em 2 x 104
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A concentração de CDCA foi definida para gradiente de concentração de 0 μM, 20 μM, 40 μM, 60 μM, 80 μM e 100 μM para experimentos. Quando a concentração de CDCA foi de 60 μM, a atividade celular foi significativamente diferente da do grupo Controle e, finalmente, 60 μM foi usada como concentração de CDCA (Figura 1A). Os resultados mostraram que após a incubação por 24 h após a administração do medicamento, não houve diferença significativa na atividade celular entre cada grupo e o grupo Cont.......
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A CLI é uma doença hepática causada pela obstrução da formação, secreção ou excreção da bile. Manifesta-se clinicamente como prurido, osteoporose e evolui até mesmo para fibrose hepática, cirrose e outras doenças, que colocam seriamente em risco a vida e a saúde 36,37,38. O UDCA é reconhecido como o medicamento mais comumente utilizado no tratamento da CLI39. No entanto, .......
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Os autores não têm nada a divulgar.
Este trabalho é apoiado pela Fundação de Ciências Naturais da Província de Sichuan (2024NSFSC0697), Projeto do Fundo Conjunto de Inovação da Universidade de Medicina Tradicional Chinesa de Chengdu (LH202402015).
Contribuição do autor:
Caitong Wu: Metodologia, análise formal, curadoria de dados, redação do rascunho original e redação e edição. Yang Xiao: Conceituação, investigação, visualização e validação. Fuhan Fan: Validação e edição. Zhangli Lei, Xianhua Zhou e Xianli Meng: Edição e tradução. Yong Zeng, Hou Ya e Peng Shen: Conceituação, metodologia, validação, investigação, revisão e ....
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| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| ALP Nanjing Jiancheng Instituto de Bioengenharia | A059-2-2 | ||
| ALT | Nanjing Jiancheng Instituto de Bioengenharia | C009-2-1 | |
| AST | Nanjing Jiancheng Instituto de Bioengenharia | C010-2-1 | |
| BCA | Boster Biological Technology Co., Ltd | AR0146 | |
| CDCA | Chengdu Medesheng Technology Co., Ltd | 474-25-9 | |
| pilha que conta o kit-8 | Boster Biological Technology Co., Ltd | AR1160-500 | |
| Anticorpo do citocromo P450 7A1 | Abmart Shanghai Co., Ltd. | ||
| DAPI | Beyotime Biotechnology | C1005 | |
| DMSO | Boster Biological Technology Co., Ltd | PYG0040 | |
| IgG anti-coelho de cabra (H & L) | Chengdu Zen-Bioscience Co., Ltd. | ||
| cabra anti-coelho IgG AF488 | Abmart Shanghai Co., Ltd. | ||
| GPS | Chengdu Medesheng Technology Co., Ltd | RP210717 | |
| GSH | Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute | A006-2-1 | |
| HepG2 células | Procell Life Science & Technology Co., Ltd | CL-0103 | |
| HRP IgG Anti-Coelho para Cabras Wuhan | ABclonal Biotechnology Co., Ltd. | AS014 | |
| IL-1β | Elabscience Biotechnology Co., Ltd | E-EL-H0149c | |
| IL-6 | Elabscience Biotechnology Co., Ltd | E-EL-H6156 | |
| MDA | Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute | A003-1-2 | |
| MEM base média | Procell Life Science & Technology Co., Ltd | PM150410 | |
| PBS | Boster Biological Technology Co., Ltd | PYG0021 | |
| Buffer de transferência rápida (20 vezes;) | NCM Biotech | WB4600 | |
| RIPA | Boster Biological Technology Co., Ltd | BL651A | |
| ROS | Beyotime Biotechnology | S0033S | |
| SHP2 Coelho pAb | Wuhan ABclonal Biotechnology Co., Ltd. | A12486 | |
| SLC10A1 Anticorpo | Abmart Shanghai Co., Ltd. | ||
| SOD | Nanjing Jiancheng Instituto de Bioengenharia | A001-3-1 | |
| TBA | Nanjing Jiancheng Instituto de Bioengenharia | E003-2-1 | |
| T-CHO | Nanjing Jiancheng Instituto de Bioengenharia | A111-1-1 | |
| TG | Nanjing Jiancheng Instituto de Bioengenharia | A110-1-1 | |
| TGR5 Anticorpo Policlonal | Empresa de biotecnologia ImmunoWay | YT4636 | |
| TNF-&alfa; | Elabscience Biotechnology Co., Ltd | E-EL-H0109c | |
| Solução de tripsina (0,25%) | Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd | 40126ES60 | |
| UDCA | Chengdu Lemetian Medical Technology Co., Ltd | DSTDX007601 | |
| β-Actin Rabbit mAb | Wuhan ABclonal Biotechnology Co., Ltd. | AC026 |
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