Artigo de método

Uma técnica minimamente invasiva de nó vivo duplo para modelagem de lesão de isquemia-reperfusão miocárdica em ratos

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DOI:

10.3791/68430

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25 de julho de 2025

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1Shaanxi Key Laboratory of Chinese Medicine Fundamentals and New Drugs Research, School of Pharmacy, Shaanxi University of Chinese Medicine, 2People's Hospital of Ningxia Hui Autonomous Region, Ningxia Medical University

* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

Aqui, propomos um esquema para induzir lesão miocárdica de isquemia-reperfusão por ligadura em bobina de nó duplo ativo direcionada à artéria coronária descendente anterior (LAD), que pode ser liberada in vitro para reperfusão sob demanda sem toracotomia secundária e é minimamente invasiva.

Resumo

O modelo de lesão de isquemia-reperfusão miocárdica (IM/RI) é de grande importância para explorar os mecanismos fisiopatológicos do infarto do miocárdio e facilitar o desenvolvimento de drogas relevantes. No entanto, entre os métodos de modelagem comumente usados, o método tradicional de ligadura da artéria coronária assistida por tubo de polietileno tem desvantagens significativas. É necessário reabrir o tórax para desamarrar a ligadura, o que não é apenas demorado, mas também causa danos substanciais aos animais experimentais e pode facilmente levar à sua morte. O objetivo deste estudo é introduzir um método aprimorado de preparação de modelos. Nesse método, a Artéria Coronária Descendente Anterior (DA) é ligada por meio de uma bobina de nó vivo duplo, e o nó vivo pode ser aberto in vitro para obter reperfusão, evitando assim um segundo procedimento invasivo. Métodos de avaliação como monitoramento de eletrocardiograma (ECG), determinação de ecocardiografia (ME) em modo M, Evans Blue e coloração de cloreto de 2,3,5-trifenito-trazolium (EB-TTC) mostraram que esse método pode induzir IM/RI estável. Este esquema de modelo MI/RI aprimorado é caracterizado por sua simplicidade e velocidade, e a taxa de sucesso da modelagem é altamente satisfatória. No geral, oferece orientação prática e valiosa para pesquisadores envolvidos no campo da pesquisa em MI/RI.

Introdução

De acordo com a Organização Mundial da Saúde, a doença coronariana ocupa uma posição significativa na carga global de doenças cardiovasculares, caracterizada por alta incidência, alta mortalidade e alta taxa de complicações. Além disso, a doença apresenta uma tendência cada vez mais jovem. Estatísticas de alguns países desenvolvidos indicam que a incidência de doença cardíaca coronária na faixa etária de 35 a 40 anos aumentou aproximadamente 15% a 20% na última década. Métodos de reperfusão, como trombólise medicamentosa, terapia intervencionista e cirurgia de revascularização do miocárdio, são seguros, eficazes e amplamente utilizados. No entanto, a restauração abrupta do fluxo sanguíneo freqüentemente exacerba o dano estrutural e funcional ao miocárdio isquêmico, dando origem a uma cascata de desfechos adversos. Estes incluem apoptose e necrose de cardiomiócitos, arritmias e disfunção sistólica, culminando em lesão de isquemia-reperfusão miocárdica (IM/IR)1,2. A incidência de lesão por IM/IR chega a 25%-30%, e seu mecanismo não foi totalmente elucidado3. Portanto, explorar estratégias eficazes de prevenção e tratamento tornou-se uma questão importante que precisa ser abordada no campo cardiovascular.

Os modelos animais são de suma importância na pesquisa de doenças cardiovasculares. Eles servem como ferramentas indispensáveis para elucidar os mecanismos patológicos do IM/IR e para o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas4. A confiabilidade e a estabilidade do modelo animal de lesão de isquemia-reperfusão miocárdica afetam diretamente o sucesso da tradução e aplicação de estratégias de tratamento na prática clínica. A artéria coronária descendente anterior (DAE) é um vaso comum acometido por isquemia miocárdica5. O modelo IM/IR construído pela ligadura da DAE é altamente semelhante à patogênese e ao processo patológico da lesão de isquemia-reperfusão miocárdica humana6. Dentre esses modelos, o método tradicional de ligadura da artéria coronária assistida por tubo de polietileno tem sido amplamente empregado em estudos anteriores. Seu uso generalizado pode ser atribuído a vantagens como distribuição uniforme da força de ligadura e grau de proteção do endotélio vascular7. No entanto, apesar de suas muitas vantagens, os detalhes operacionais continuam sendo um foco de debate entre muitos pesquisadores.

Para o método tradicional de ligadura da artéria coronária assistida por tubo de polietileno, o tórax precisa ser reaberto para desatar a ligadura durante a reperfusão. Atualmente, existem dois métodos principais de operação: o método clássico de ligadura por toracotomia e o método de ligadura minimamente invasiva modificado. O método clássico de ligadura da toracotomia requer uma incisão em grande escala do tórax para expor totalmente o coração para a ligadura6. O método de ligadura minimamente invasiva modificado utiliza instrumentos especiais para completar a ligadura por meio de uma incisão menor8. Na fase de reperfusão, o método clássico de ligadura por toracotomia requer a reabertura do tórax para desatar a ligadura, o que não só é demorado, mas também causa traumas graves aos animais experimentais e pode levar à sua morte. Além disso, a toracotomia repetida pode desencadear complicações como infecção, interferindo na precisão dos resultados experimentais 7,9. Além disso, como o grau de cada operação de toracotomia é difícil de ser completamente consistente, aumentará a variabilidade dos dados experimentais. Em relação à aplicação do método de ligadura minimamente invasiva modificado, apesar de sua menor incisão, o procedimento apresenta desafios técnicos significativos. Exige que os experimentadores possuam proficiência técnica altamente avançada e confiem em instrumentos de precisão de ponta, como um estereomicroscópio. Quando tentado em um espaço confinado sem o auxílio de tais instrumentos, há um risco elevado de danificar inadvertidamente os tecidos circundantes. Isso, por sua vez, pode minar a estabilidade e a confiabilidade dos resultados experimentais.

Consequentemente, há uma necessidade urgente de uma abordagem aprimorada de modelo - preparação para enfrentar esses desafios. Este estudo apresenta um método aprimorado para modelagem de IM/IR. O método envolve o uso de uma bobina dupla de nó vivo para ligar o LAD e permite a liberação in vitro do nó vivo para obter reperfusão, evitando assim a necessidade de uma segunda toracotomia. Caracterizado por sua simplicidade de operação e facilidade de domínio, esse método pode induzir consistentemente lesão de isquemia-reperfusão miocárdica, oferecendo valiosa referência e inspiração para pesquisadores na área de IM/IR.

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Protocolo

O protocolo experimental foi conduzido em conformidade com as diretrizes do Comitê de Uso de Animais de Laboratório e Cuidados e Uso de Animais Institucionais da Universidade ShaanXi de Medicina Tradicional Chinesa (número de registro: SUCML20240820006). Todos os dados de pesquisa com animais foram documentados seguindo as diretrizes ARRIVE (Animal Research: Reporting In Vivo Experiments). Ratos machos da raça Sprague Dawley (SD) pesando 250 g ± 20 g e com idade entre 6 e 8 semanas foram utilizados para este estudo. As especificidades sobre os animais, reagentes e equipamentos empregados estão listadas na Tabela de Materiais.

1. Preparo pré-operatório

  1. 1.1.Realizar jejum: Submeter os ratos a um período de jejum de 8 horas com livre acesso à água
  2. Calibre e pese: Meça com precisão o peso corporal usando uma balança eletrônica (precisão de 0,1 g) para calcular a dose de anestésico.
  3. Induzir anestesia: Administrar solução de uretano a 20% por injeção intraperitoneal na dose de 0,4 mL por 100 g de peso corporal usando uma seringa estéril de 2,5 mL; Injetar 1 cm lateral à linha média ventral.
  4. Confirme a anestesia: Clampeie a pata traseira com pinça estéril; A ausência de reflexo de retirada do membro confirma anestesia profunda.

2. Monitoramento do eletrocardiograma (ECG) (Figura 1, Etapa 1)

  1. Imobilize o rato em decúbito dorsal: Prenda o tronco e os membros em uma "postura estendida dos membros" usando fita adesiva médica na mesa cirúrgica.
  2. Conecte os eletrodos: Insira subcutaneamente agulhas de eletrodo esterilizadas na seguinte sequência: o membro anterior direito (conectado ao eletrodo branco), o membro posterior direito (conectado ao eletrodo preto) e o membro posterior esquerdo (conectado ao eletrodo vermelho). Em seguida, conecte esses eletrodos a um monitor de ECG de derivação II. Certifique-se de que uma linha de base estável seja estabelecida e que os complexos QRS sejam claramente visíveis no monitor.
    NOTA: Mantenha o monitoramento contínuo do ECG durante todo o procedimento. Avalie a profundidade da anestesia e o estado do rato em tempo real por meio de anormalidades na forma de onda.

3. Depilação e desinfecção do sítio cirúrgico (Figura 1, Etapa 2)

  1. Depilação mecânica: Use um aparador elétrico para remover o pelo do pescoço e do tórax esquerdo (comprimento residual ≤0,5 mm).
    NOTA: Segure a lâmina em um ângulo de 30° e mova-se na direção contrária ao crescimento do cabelo.
  2. Depilação química: Aplique o creme depilatório uniformemente sobre a pele exposta por 2 min. Remova cuidadosamente com um raspador estéril, seguido de lavagem pulsada usando uma seringa de 2,5 mL com solução salina a 37 ° C. Repita 3 vezes até que não haja mais resíduos.
  3. Desinfecção gradual: Desinfete a pele três vezes em círculos concêntricos (interno para externo) com uma mistura de etanol-iodóforo a 75% (1:1) usando bolas de algodão estéreis.

4. Configuração do parâmetro do ventilador

  1. Verificação pré-operatória do equipamento: Conecte o circuito do ventilador ao adaptador do tubo traqueal em forma de Y.
  2. Ajuste os parâmetros ( Figura 1, Etapa 3): Defina os parâmetros específicos da espécie: volume corrente 3,0 ml, frequência respiratória 80 respirações / min e relação inspiratória-expiratória (I: E) 2: 1.
  3. Verifique a permeabilidade do circuito: Ative o ventilador e mergulhe a extremidade do circuito em solução salina. Observe a formação de bolhas rítmicas. Se ausente, verifique sistematicamente se há vazamentos e solucione o problema.

5. Intubação traqueal

  1. Posicionamento da incisão: Cubra o campo cirúrgico com um pano estéril. Levante a pele da cartilagem subtireoidiana com uma pinça afiada e faça uma incisão longitudinal de 2,5 cm ao longo da traqueia usando uma tesoura reta.
  2. Dissecção camada por camada: Retraia a pele com pinça estéril (mão esquerda) e faça dissecção progressiva superficial com microtesoura (mão direita).
    NOTA: Limite a primeira camada à epiderme e derme; Evite danos à camada muscular.
  3. Exposição traqueal (Figura 1, Etapa 4): Use uma pinça hemostática para dissecção romba dos músculos platisma e cinta para expor 4-5 cartilagens traqueais. Mobilize a traqueia com uma pinça e coloque um tubo de silicone embaixo dela para estabilização.
    NOTA: A artéria carótida e o nervo vago podem ser vistos em ambos os lados da traqueia, portanto, evite danificar essas estruturas durante a operação.
  4. Intubação traqueal ( Figura 1, Passo 5): Crie uma incisão transversal em forma de Ω (aproximadamente 1/3 de circunferência) entre o 3º e o 4º anéis de cartilagem traqueal usando microtesoura. Insira um tubo endotraqueal de silicone de 14 G rapidamente, alinhando o marcador de profundidade com a borda da incisão.
    NOTA: Pós-intubação, sincronize o movimento torácico com o ritmo ventilatório. Monitore a pressão das vias aéreas e a frequência respiratória em busca de anormalidades. Ajuste as configurações do ventilador ou verifique a permeabilidade do tubo se ocorrerem desvios.

6. Preparação da incisão intercostal

  1. Marque o local da incisão: Use um marcador cirúrgico estéril para delinear a borda esternal esquerda no 3º-4º espaço intercostal (identificado pela palpação do ponto de impulso apical máximo). Desenhe uma linha longitudinal de 3,0 cm.
  2. Dissecção camada por camada: Eleve a pele com uma pinça estéril e faça uma incisão ao longo da linha marcada usando uma tesoura estéril. Insira a pinça hemostática por via subcutânea em um ângulo de 30° e faça uma dissecção romba paralela ao espaço intercostal para separar a camada muscular.
  3. Transecção de costelas: Passe a 3ª e 4ª costelas e os músculos intercostais usando microtesouras. Nota: Se ocorrer hemorragia na artéria intercostal, aplique imediatamente um cotonete estéril com pressão firme por 60 s para obter hemostasia10.

7. Localização e ligadura da artéria descendente anterior (DA)

  1. Confirme o local da ligadura (Figura 1, Etapa 6): Expanda o espaço intercostal para 4 cm usando um afastador esternal para expor o coração. Disseque suavemente o pericárdio (identifique o tecido tímico como a estrutura branca acima do coração). Localize a DA 2 mm abaixo do ponto médio do "V" formado pelo cone pulmonar (protrusão cônica auricular direita) e aurícula esquerda (estrutura valvar triangular).
  2. Calibração da agulha (Figura 1, Etapa 7-1): Clamp uma sutura de polipropileno 6-0 (com agulha) usando microfórceps. Entrar no miocárdio 1 mm lateralmente à junção médio-distal da DA em um ângulo de 15° em relação à superfície miocárdica (profundidade: 1 mm; largura: 2 mm), avançando da direita para a esquerda.
  3. Técnica do nó corrediço duplo (Figura 1, Etapa 7-1 - 7-5): Depois que o fio da ligadura passou pelo miocárdio, enrole uma extremidade do fio da ligadura com a ponta da agulha em uma bobina com pinça microscópica e rosqueie a outra extremidade na bobina e puxe-a suavemente para apertar a fixação. Dê um nó na outra extremidade do fio de ligadura novamente, repetindo a operação acima para formar uma estrutura de nó duplo e certificando-se de que as duas extremidades do fio de ligadura sejam deixadas paralelas uma à outra fora da cavidade torácica.
    NOTA: Durante o processo de aperto, foram utilizadas micropinças para apertar gradualmente com força suave e uniforme, enquanto foram observadas alterações na cor do miocárdio para determinar o grau de isquemia, de modo a evitar esforço excessivo levando à ruptura do vaso ou ligadura insegura. O estabelecimento bem-sucedido do modelo foi confirmado pela observação da palidez isquêmica da parede anterior/região apical do ventrículo esquerdo e elevação sustentada do segmento ST ≥ 0,2 mV no eletrocardiograma, e o temporizador isquêmico de 30 min foi iniciado imediatamente após a confirmação da ligadura bem-sucedida.

8. Sutura e restauração da pressão negativa torácica

  1. Fechamento da costela: Remova o afastador esternal. Feche os músculos intercostais ao redor das costelas 3-4 usando uma sutura absorvível 4-0 em um padrão de travamento contínuo (intervalos de pontos de 2 mm).
    NOTA: Evite o contato entre a sutura de ligadura e as suturas de fechamento para evitar interferência na reperfusão.
  2. Fechamento da camada muscular e evacuação de ar: Aproxime os músculos peitoral maior e menor superficiais com uma sutura 4-0. Antes do aperto final, insira uma seringa de 2.5 mL sem agulha no último orifício do ponto para aspirar o ar intratorácico enquanto um assistente prende a sutura.
    NOTA: Monitore o movimento torácico para respiração espontânea (conforme indicado pelo ritmo assíncrono em relação ao ventilador).
  3. Fechamento e desinfecção da pele: Suturar a pele continuamente com sutura 4-0. Desinfete três vezes seguindo as diretrizes do Protocolo 3.3.

9. Desengatar o ventilador

  1. Extubação: Retire o tubo endotraqueal lentamente enquanto observa a respiração espontânea.
  2. Fechamento traqueal e muscular: Sutura os anéis de cartilagem traqueal longitudinalmente usando uma sutura 4-0 para garantir uma vedação hermética. Reaproximar os músculos do pescoço.
  3. Fechamento e desinfecção da pele (Figura 1, Etapa 8): Feche a pele do pescoço com uma sutura 4-0. Desinfete usando cotonetes estéreis embebidos em etanol e iodopovidona. Remova as cortinas e transfira o rato para uma almofada de aquecimento a 38 ° C para reperfusão.
    NOTA: Se a respiração espontânea falhar, reinsira o tubo endotraqueal e repita as etapas 8.1 a 8.3 antes de tentar novamente a extubação.

10. Isquemia-reperfusão

  1. Afrouxe a ligadura (Figura 1, Etapa 9): Após 30 min de isquemia, desamarre o primeiro nó puxando horizontalmente o fio da ligadura em uma extremidade da agulha de bandagem, depois desamarre o segundo nó puxando o fio da ligadura na outra extremidade e, em seguida, puxando horizontalmente de um lado para o outro para garantir que não haja resistência provando que o nó duplo foi desatado.
    NOTA: Se for necessário o tingimento duplo EB-TTC, a linha de ligadura não pode ser puxada.
  2. Validação da reperfusão: Confirme a resolução do segmento ST no ECG como evidência de reperfusão bem-sucedida12.

11. Determinação da ecocardiografia (EM) modo-M 10

  1. Preparação pré-procedimento: Às 2 h pós-reperfusão, avalie a profundidade da anestesia e complemente, se necessário. Imobilize o rato em decúbito dorsal e aplique 2 mm de gel de ultrassom a 37 °C na região precordial.
  2. Aquisição de dados: Ligue o sistema de ultrassom. Selecione o protocolo predefinido, defina a sonda MX250 para 18 MHz e registre imagens no modo M do movimento ventricular esquerdo. Salve as imagens adequadamente.
  3. Análise de dados: Calcule a fração de ejeção do ventrículo esquerdo (FEVE), o encurtamento fracionário (LVFS), o diâmetro sistólico final (LVIDs), o diâmetro diastólico final (LVIDd) e o volume sistólico (VS) usando um software integrado ao sistema.
    NOTA: Capture dados de ≥3 ciclos cardíacos consecutivos; relatar valores médios para rigor estatístico.

12. Coloração com Azul de Evans e 2,3,5-Trifenito-cloreto de trazólio (EB-TTC)

  1. Re-intubação: Remova sequencialmente as suturas da pele do pescoço, músculos e traqueia. Insira um tubo endotraqueal e conecte-o ao ventilador para manter a respiração.
  2. Retoracotomia: Remova as suturas da pele do tórax, músculos e costelas. Use um afastador torácico para ampliar o espaço intercostal e expor totalmente o coração.
  3. Religue a artéria LAD: Relige a artéria LAD; confirme a ligadura bem-sucedida observando palidez apical e supradesnivelamento persistente do segmento ST no ECG.
  4. Injetar EB: Usando uma seringa de insulina de 0,5 mL, aspire 0,3 mL de solução de Evans Blue a 1,5%. Em seguida, disseque rapidamente o arco aórtico, insira a agulha da seringa na aorta e prenda-a com uma pinça micro-hemostática. Em seguida, injete a solução de Evans Blue e observe o coração quanto a uma coloração azul uniforme.
  5. Extirpar o coração: Após 30 s após a injeção, excisar o coração com uma tesoura estéril. Mergulhe-o imediatamente em solução salina e enxágue repetidamente para remover o sangue residual e o Evans Blue. Congele o coração a -80 °C.
  6. Divida o coração: Após 20 minutos de congelamento, remova o coração. Usando uma lâmina cirúrgica, corte cinco cortes transversais de 1 mm de espessura perpendiculares ao eixo cardíaco longo do ápice à base.
  7. Manchar com TTC: Deixe as fatias se equilibrarem à temperatura ambiente. Transfira-os para um tubo de centrífuga âmbar de 50 mL contendo solução de TTC a 1,5%. Incubar o tubo num agitador termostático pré-aquecido a 37 °C durante 30 min em condições de proteção contra a luz.
  8. Aquisição e análise de imagens: Após a coloração, fixar as fatias em paraformaldeído por 12 h. Capture imagens de alta resolução e quantifique a área do infarto (IA), a área de risco (AAR) e a área total do ventrículo esquerdo (VE) usando o software Image J. Calcular a razão de infarto do miocárdio em IA/(RAA+IA) e a razão isquemia-risco em (RAA+IA)/VE, seguindo a metodologia descrita por Cai ecols.12.

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Resultados

ECG
O eletrocardiograma foi registrado durante todo o processo, desde antes da ligadura do coração do rato até 120 min após a isquemia-reperfusão. As alterações do eletrocardiograma são mostradas na Figura 2A. Durante a isquemia, o segmento ST mostrou uma elevação arqueada para cima, e a onda T era alta e com pico. Após a reperfusão, a elevação do segmento ST caiu gradualmente.

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Discussão

A ligadura da artéria coronária, método clássico para estabelecer o modelo de lesão miocárdica de isquemia-reperfusão, tem grande importância na pesquisa de doenças cardiovasculares12. Desde a década de 1980, o método de ligadura da artéria coronária assistida por tubo de polietileno, pioneiro de Yamamoto et al., tem sido amplamente adotado em laboratórios de pesquisa científica em todo o mundo. Este método oferece várias vantagens, incluindo força de ligação cont...

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Divulgações

Os autores não têm nada a divulgar.

Agradecimentos

Este trabalho foi apoiado pelo Programa de Talentos Inovadores em Ciência e Tecnologia da Universidade de Medicina Chinesa de Shaanxi (No. 2024-CXTD-03), Administração Provincial de Projetos de Pesquisa em Medicina Tradicional Chinesa de Shaanxi (No. SZY-KJCYC-2025-JC-043) e Programa de Pesquisa e Desenvolvimento do Departamento Provincial de Ciência e Tecnologia de Shaanxi (nº 2024CY-JJQ-36).

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Seringa de insulina de 0,5 mL Fornecedor verificado - Wuxi Yushou Medical Equipment Co.https://e.tb.cn/h.6NJ9o4dBdpXt4bT?tk=YobMVflhtgI Usado para absorver EB e injetar através do arco aórtico 
2,3,5-trifenito-cloreto de trazolium ShanghaiYuanye Biotechnology Co., Ltd.S19026Para coloração de coração 
Seringa estéril descartável de 2,5 mLPing robusto An Medical Technology Co., Ltd.20231230Usado para aspirar anestésicos e anestesiar ratos por injeção intraperitoneal; usado para extrair ar da cavidade torácica de ratos durante operações de tórax fechado.
4% de paraformaldeídoGuangzhou Viggs Biotechnology Co., Ltd.SW002Usado para fixar o coração após a coloração
4-0 suturaShandong Haidike Medical Products Co., Ltd.Para costurar costelas, músculos e pele 
6-0 suturaJiangsu Beiyueshen Medical Device Co., Ltd.https://e.tb.cn/h.6NKQ9XNVD1J56np?tk=R8NKVfPJIUMPara ligadura de LAD 
Agulha de acupuntura Pequim Luoya Shanchuan Medical Equipment Co.https://e.tb.cn/h.6NQZzrSfBLQ9OYZ?tk=yW5aVfPuXP3Usado para perfurar a pele de membros de ratos e conectar a linha de eletrodos do eletrocardiograma.
Removedor de pêlos de animaisJinyun New Concept Household Products Co.https://e.tb.cn/h.6NJe67IEMgxPfUt?tk=9boIVflb6mm Para depilação 
Creme depilatórioGuangzhou Miyanshe Brand Management Co., Ltd.https://3.cn/2fP-knZw Para depilação profunda 
EtanolTianjin Tianli Reagente Químico Co., Ltd.https://e.tb.cn/h.6NnxsK8EAvBV1Zu?tk=ja1XVflVhfM Para desinfecção 
Evans BlueSigmaE2129Para coloração do coração 
Pinça hemostáticaFornecedor verificado - Shanghai Aide Medical Instrument Co.https://e.tb.cn/h.6NQkHWD25dxnsv4?tk=xA1VVflTXjWUsado para fixar a seringa de insulina e parar o sangue do arco aórtico 
Micro tesoura médicaNanjing Ji Xiaobao Trading Co.https://e.tb.cn/h.6NJu33PgNRJCO1L?tk=smZjVflr730Usado para abrir a traqueia e as costelas 
Pinças microscópicas médicasNanjing Ji Xiaobao Trading Co.https://e.tb.cn/h.6Nqn2dyJIUjUN6n?tk=MEMaVflGK0bPara beliscar a sutura 6-0 para ligar o
bisturi médicoShandong Boryuida Analytical Instrument Co.https://e.tb.cn/h.6NJyfb9CWH5Sj32?tk=HW0kVflEyOL Para cortar o coração durante a coloração EB-TTC
Tesoura médicaShandong Boryuida Analytical Instrument Co.https://e.tb.cn/h.6NJCLzckQnXXEPe?tk=CtcTVflFJQw Usado para cortar pele de rato e sutura.
Pano cirúrgico médicoHenan Meideqi Medical Equipment Co.https://e.tb.cn/h.6NqItN9yA0xttr9?tk=cCCIVflzFjr Usado para fornecer área cirúrgica estéril 
Fita médicaZhejiang Aotai Medical Technology Co.https://e.tb.cn/h.6N93etxLPPlJ9ZQ?tk=DfblVflAo5dUsado para consertar ratos 
Pinças médicasJiangsu Videocon Medical Technology Co.https://e.tb.cn/h.6NreHXQv2YTJkIl?tk=S1imVfO17QVUsado para julgar o grau de anestesia em ratos, pinçar pele, costelas e outros tecidos, e descascar os músculos subcutâneos e o pericárdio.
Agente de acoplamento ultrassônico médico Fornecedor verificado - Qingdao Hainuo Biological Engineering Co., Ltd.https://3.cn/2fPpwB-j Usado para melhorar a eficiência da transmissão ultrassônica
Solução salina normal Fornecedor verificado - Shandong Qidu Pharmaceutical Co., Ltd.https://e.tb.cn/h.6NMCUFJIti2EsiU?tk=FXBBVfOV1iNUsado para lavar creme depilatório residual 
Ultrassom Doppler colorido portátilVINNO Technology Co., Ltd.Vinno 6 Usado para determinação de ecocardiografia em modo M em ratos 
IodopovidonaShandong Anjie Tecnologia de Desinfecção de Alta Tecnologia Co., Ltd.https://e.tb.cn/h.6NqAb4WsT3xjMb9?tk=mhFxVfO4G1GPara desinfecção 
Placa cirúrgica de ratoShandong Boryuida Analytical Instrument Co.https://e.tb.cn/h.6NQyjjGNGInF3Eu?tk=qgQwVflHilH Usado para consertar ratos 
Refrigerador de refrigeração Zhejiang Zhixing Ultra-baixa Temperatura Technology Co.DL-78Para congelar o coração 
Tubos de sílica gelShandong Chengwu Sano Medical Equipment Co.https://e.tb.cn/h.6N9L82XWNGlgDDG?tk=pWzCVfOQIgNUsado para suportar a traqueia 
Máquina de respiração artificial para pequenos animaisAnhui Zhenghua Biological Equipment Co., Ltd.DW-3000HUsado para ajudar ratos a respirar após toracotomia 
Bola de algodão estéril Fornecedor verificado - Qingdao Hainuo Biological Engineering Co., Ltd.https://e.tb.cn/h.6NJbKVmD0b7QhTf?tk=wMceVfOTrBX Para desinfecção por imersão de etanol e iodopovidona 
cotonete estérilQingdao Hainuo Biological Engineering Co., Ltd.https://e.tb.cn/h.6NMAQz1252EJHSM?tk=nyfLVfOUSBi Usado para limpar o sangue residual na cavidade torácica
Manta de isolamento térmicoGuangdong Zhongke Life Science & Fornecedor:Technology Co.https://e.tb.cn/h.6N9OyBVWuSXTUDy?tk=d6OqVfOSTlIPara isolamento corporal pós-operatório em ratos 
Afastador de toracotomiaGuangdong Zhongke Life Science & Fornecedor:Technology Co.https://e.tb.cn/h.6NQra4Z9UG8dnvo?tk=6eFUVfllCFWUsado para expor o campo cirúrgico da visão 
Monitor de eletrocardiograma tipo IIChengdu Taimeng Technology Co., Ltd.BL-420NPara monitorar eletrocardiograma 
UretanoShandong Keyuan Biochemical Co., Ltd.U820333Usado em ratos anestesiados 
Oscilador de temperatura constante da águaShanghai Boxun Medical Biological Instrument Co., Ltd.SHZ-BPara coloração do coração 
LAD

Referências

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