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Artigo de investigação
Uma fórmula de enema herbal combinando Sanguisorba officinalis, Bletilla striata e Acacia catechu foi avaliada usando perfil LC-MS/MS, acoplamento S100β, modelo de colite DSS e glia entérica ativada por LPS/IFN-γ. A fórmula envolveu S100β, suprimiu a ativação glial e reduziu a expressão p-NF-κB/iNOS, indicando melhoria pelo eixo S100β-RAGE-NF-κB.
A ativação das células gliais entéricas (EKG) contribui para a patogênese da colite ulcerativa (). Este estudo examinou se o Líquido de Enema Dibai (DBE) — um enema herbal que combina Sanguisorba officinalis, Bletilla striata e Acacia catechu — modula a inflamação impulsionada pelo EGC. Perfis LC-MS/MS de constituintes DBE e compostos priorizados foram acoplados ao S100β. A eficácia foi avaliada na colite murina induzida por dextrano sulfato de sódio (DSS) usando peso corporal, comprimento do cólon, histopatologia e níveis de citocinas (ELISA). Marcadores de ativação glial foram medidos por imunohistoquímica, colocalização por imunofluorescência, PCR quantitativa (qPCR) e imunobloting. Um modelo in vitro utilizou CRL-2690 com células gliais entéricas ativadas com lipopolissacarídeo mais interferon-γ, tendo como intervenção soro de rato contendo DBE (15%). O acoplamento sugeriu uma forte ligação prevista de vários componentes DBE ao S100β. O DSS aumentou o TNF-α e o IL-1β, interrompeu junções apertadas e elevou S100β/GFAP tanto em níveis de mRNA quanto de proteína, consistente com hiperativação glial; A DBE reverteu significativamente essas mudanças. In vitro, a DBE reduziu S100β, RAGE, iNOS (NOS2) e o NF-κB fosforilado p65. Coletivamente, a DBE parece aliviar a ao inibir a ativação do EGC e reduzir o eixo S100β/RAGE/NF-κB/iNOS, preservando assim a integridade mucosa.
A colite ulcerativa () é um subtipo importante da doença inflamatória intestinal (DII) caracterizada por inflamação mucosa crônica do cólon, com aumento da carga global desde 1990, e a responsável por uma proporção substancial dos casos incidentes deDII 1,2. Manifestações típicas incluem dor abdominal e diarreia com sangue, levando a considerável sofrimento físico e psicológico e custos elevados de tratamento3. Embora as opções de tratamento tenham se expandido, a exposição prolongada a imunomoduladores e biológicos que suprimem a imunidade sistêmica es....
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Todos os procedimentos com animais foram aprovados pelo Comitê de Ética Animal da Universidade de Medicina Chinesa de Pequim [BUCM-2023-0912] e foram conduzidos de acordo com diretrizes institucionais e nacionais para o cuidado e uso de animais de laboratório. Nenhum sujeito humano estava envolvido.
Os reagentes e os equipamentos utilizados estão listados na Tabela de Materiais.
1. Reagentes e materiais
Solventes de grau analítico e reagentes de grau de biologia molecular foram usados em todo o processo. Todas as informações comerciais, incluindo fabricantes, nú....
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Identificação de componentes DBE e soro contendo medicamentos
O LC-MS/MS identificou 105 constituintes químicos únicos na DBE, com erro de massa < 10 ppm. A identificação foi confirmada por fórmula molecular, padrão isotópico e correspondência de fragmentos. As principais classes incluíam triterpenos, flavonoides, bifenantrenos e ácidos orgânicos. O soro contendo medicamento revelou 59 componentes derivados d.......
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A colite ulcerativa () é uma doença inflamatória crônica do intestino com patogênese multifatorial. Além das respostas imunes desreguladas, a disfunção da barreira epitelial intestinal e a disbiose da microbiota intestinal são contribuintes bem reconhecidos, enquanto anormalidades do sistema nervoso entérico (SNE) são cada vez mais identificadas como um dos principais fatores que impulsionam a progressão da23. Especificamente, tanto a desregulação estrutural quant.......
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Os autores não têm nada a revelar.
Essa pesquisa foi apoiada pelo Projeto de Construção de Disciplinas Médicas Chave de Alto Nível da Administração Nacional de Medicina Tradicional Chinesa (ZYYSZX-2023256).
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| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| AutoDock 4.2 | Software de acoplamento molecular | - | O Instituto de Pesquisa Scripps |
| Dextran Sulfato de Sódio (DSS) | Químico para induzir colite em camundongos | 9011-18-1 | Sigma-Aldrich |
| Líquido de Enema Dibai (DBE) | Mistura herbal para tratamento da colite ulcerativa | - | Universidade de Medicina Chinesa de Pequim |
| DMEM (Eagle Medium Modificado da Dulbecco) | Meio de cultura celular | 11965-092 | Thermo Fisher |
| Soro Bovino Fetal (FBS) | Suplemento para cultura celular | 16000-044 | Thermo Fisher |
| Microscópio de fluorescência | Instrumento para imagem por imunofluorescência | - | Olympus |
| Sistema LC-MS/MS | Espectrômetro de massa para análise de LC-MS | - | Waters Corporation |
| Lipopolissacarídeo (LPS) | Indutor de inflamação em cultura celular | L2630 | Sigma-Aldrich |
| Ciclador Térmico de PCR | Equipamentos para qPCR | T100 | Bio-Rad |
| Anticorpo Primário (S100) | Anticorpo para detecção de proteínas S100 | ABC1234 | Abcam |
| Kit de Ensaio de Proteína (BCA) | Kit de quantificação de proteínas | 23225 | Thermo Fisher |
| Interferon Recombinante - (IFN) | Citocina para ativação de EGC em cultura celular | - | Sigma-Aldrich |
| Anticorpo Secundário (conjugado com HRP) | Anticorpo secundário para imunohistoquímica | XYZ5678 | Thermo Fisher |
| Sulfazazinalina (SASP) | Controle positivo para colite ulcerativa | - | Sigma-Aldrich |
| Equipamentos Western blot | Sistema de eletroforese para análise de proteínas | - | Bio-Rad |
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