Testando a barreiras fisiológicas para a transmissão viral em Aphids Usando microinjeção

Resumo

Pulgões são transmissores eficazes de vírus de plantas. Microinjeção pulgão do vírus, o procedimento que irá mostrar-lhe hoje, é uma técnica permitindo que os pesquisadores injetam vírus diretamente no hemocele do pulgão, contornando o intestino, uma das duas principais barreiras para a transmissão do vírus de uma maneira circulativo. A mesma técnica também é usada para injetar dsRNA para RNAi.

Resumo

Batata loafroll vírus (PLRV), a partir da família Luteoviridae infecta solanáceas. É transmitida por pulgões, principalmente, o pulgão-verde. Quando um pulgão infectado se alimenta de uma planta infectada se contrai o vírus através do floema da planta. Uma vez ingerido, o vírus tem de passar pelo intestino do inseto à hemolinfa (o sangue do inseto), e depois devem passar pela glândula salivar, a fim de ser transmitido de volta para uma nova planta. Um afídeo pode levar até vírus diferente quando mastigando uma planta, no entanto, apenas uma pequena fração passará a glândula salivar e intestino, as duas principais barreiras para a transmissão de infectar mais plantas. No laboratório, usamos plantas physalis para estudar a transmissão PLRV. Nesta série, os sintomas são caracterizados por clorose e nanismo intervenal (amarelecimento das folhas entre as veias com as veias restantes verde). O vídeo que apresentamos demonstra um método para a realização de microinjeção pulgão-se de insetos que não vírus vector PLVR e testa se o intestino é prevenir a transmissão viral. O vídeo que apresentamos demonstra um método para a realização de microinjeção Aphid sobre insetos que não vírus vector PLVR e testa se o intestino ou glândula salivar é a prevenção da transmissão viral.

Protocolo

1. Para testar se um pulgão é capaz de vetor um vírus, nós alimentamos os pulgões em tecido infectado por 2 dias.
2. Então, nós permitimos que a alimentação de uma planta saudável durante 5 dias. A planta é, então, fumigado e depois de 3 semanas, iniciar a procura de sintomas.
3. Quando encontramos um pulgão que não podem vetor um vírus, podemos avaliar qual das duas barreiras é impedir que o vírus através de um procedimento de microinjeção.
4. O vírus é injetado diretamente na hemocele, ultrapassando assim a barreira de transmissão intestino.

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