Abordagem Técnica para Análise Estrutural de um Composto Desconhecido em Líquido Oral Huoxiang Zhengqi Baseada em Espectrometria de Massa por Armadilhas Iônicas Lineares

Summary

Aqui, mostramos um protocolo padrão que combina árvores de espectrometria de massa de múltiplos estágios com um processo de fragmentação baseado no líquido oral Huoxiang Zhengqi.

Abstract

Os compostos herbais chineses (CHCs) desempenham um papel insubstituível na medicina chinesa, e a identificação de seus complexos constituintes tem sido um foco significativo de pesquisa nos últimos anos. O líquido oral Huoxiang Zhengqi é um medicamento patenteado clássico chinês cuja composição química requer investigação adicional em nível molecular. Espectrômetros de massa tradicionais, como o time of flight e o Orbitrap, normalmente fornecem apenas informações secundárias de fragmentação. Com base em um espectrômetro de massa linear de armadilha de íons, os compostos podiam ser decompostos de forma mais completa, obtendo assim informações mais profundas sobre fragmentos. Este artigo desenvolve uma técnica de exploração estrutural para compostos desconhecidos em CHCs, abrangendo pré-tratamento de amostras, preparação de cromatografia líquida de ultra-performance, preparação para espectrometria de massas, testes de espectrometria de massas completos, testes de espectrometria de massa secundária, testes de espectrometria de massa multinível e análise de resultados. Resultados representativos demonstram o processo de derivação da estrutura composta. Discutimos fatores que influenciam a técnica experimental, como isômeros, compostos polihidroxi e resolução de instrumentos. Baseado na derivação da estrutura molecular microscópica de compostos desconhecidos por meio da fragmentação por espectrometria de massa em múltiplos estágios, o método experimental estabelecido é versátil e aplicável para a caracterização estrutural de pequenas moléculas bioativas na medicina tradicional chinesa e sua ligação a mecanismos farmacológicos.

Introduction

Os compostos herbais chineses (CHCs), como recursos inestimáveis da medicina tradicional chinesa (MTC), acumularam milênios de experiência clínica^{validada 1}. Eles desempenham um papel insubstituível na prevenção de doenças, intervenção terapêutica e^{reabilitação 2}. Por meio do sinergismo multi-ervas, os CHCs tratam o corpo humano de forma holística, operacionalizando os princípios centrais da terapia baseada em diferenciação de holismo^{e síndrome 3}. Dentro dos marcos médicos contemporâneos, os CHCs ganham reconhecimento global por seus mecanismos polifarmacológicos ....

Protocol

1. Pré-tratamento por amostra

1. Abra a embalagem do HXZQ comercial. Transfira com precisão 0,1 mL de HXZQ para um frasco de amostra de 2 mL, depois adicione 0,9 mL de água. Agite a solução até que esteja bem misturada.
2. Prepare uma seringa de injeção (1 mL) e um filtro de membrana microporosa (0,22 μm). Filtre a solução em um novo frasco de amostra de 2 mL.
   NOTA: Tome as precauções pessoais apropriadas durante os procedimentos experimentais.

2. Preparação para cromatografia líquida de ultra-performance (UPLC)

1. Clique dois vezes no sof....

Results

Sugerimos que toda a informação m/z precisava ser compilada primeiro, e então o valor da diferença de massa entre o íon pai e o íon fragmento era calculado. Encontrei o composto que foi relatado no banco de dados ou na literatura e depois deduziu a estrutura desconhecida do composto inversamente com base nessa estrutura conhecida.

Todos os compostos detectados e seus íons fragmentados correspondentes foram apresentados por valores m/z. Um subconjunto desses ío.......

Discussion

A combinação do LIT-MS com sua tecnologia de fragmentação MSⁿ fornece um método para identificar compostos desconhecidos em CHCs. Ao contrário dos modos tradicionais tandem MS no Orbitrap e Q-TOF MS, a armadilha linear de íons pode capturar especificamente íons-alvo, evitando efetivamente interferência dos íons²³ coeluentes. Esse método alcança precisão em nível molecular, fornecendo informações estruturais químicas relativamente precisas, abordando par.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Acetonitrila	Termo Científica	CAS 75-05-8	Estado líquido
Ácido fórmico	Termo Científica	CAS 64-18-6	Estado líquido
Líquido Oral Huoxiang Zhengqi	Chongqing Taiji Industry (Group) Co., Ltd.	Código Estadual de Padrões de Medicamentos Z50020409	Objeto de estudo
Espectrômetro de massa linear de armadilha de íons	Termo Científica	LTQ XL	Instrumento IT-MS
Cromatógrafo líquido	Termo Científica	U3000	Instrumento UPLC
Xcalibur	Termo Científica	Versão 2.0	Software operacional UPLC-IT-MS