Administração de Composto I

A administração composta é frequentemente um componente integral de um estudo animal, e muitos fatores precisam ser avaliados para garantir que o composto seja entregue corretamente e de forma humana. As duas principais rotas administrativas são enteral-via trato digestivo, e parenteral-fora do trato digestivo. A principal diferença é que, se o composto é dado através da rota enteral, ele sofre metabolismo hepático antes de entrar na corrente sanguínea. Considerando que, por qualquer rota parenteral, como intravenosa ou intramuscular, a substância pula esta primeira passagem pelo fígado, geralmente resultando em uma maior biodisponibilidade.

Neste primeiro vídeo da série sobre administração composta, começaremos discutindo os fatores que afetam a escolha da rota da administração em geral. E então vamos rever os métodos de injeções parenteral mais comuns, incluindo abreviação subcutânea como SC ou SubQ, intraperitoneal ou IP, intramuscular ou IM, e intravenoso AKA IV.

Vamos começar revendo algumas coisas que se deve ter em mente antes de pré-formar qualquer tipo de procedimento de administração composta. O primeiro passo é preparar a solução ou suspensão a ser injetada, e a primeira consideração fundamental para a preparação da substância é a esterilidade. Para evitar a introdução de patógenos no animal, é importante que o material de injeção, bem como as agulhas e seringas a serem utilizadas, sejam estéreis.

A segunda consideração é a compatibilidade fisiológica. Uma solução de dosagem, seja administrada de forma enterral ou parental, deve ser fisiologicamente tamponada para pH adequado para que o composto seja devidamente absorvido e para evitar lesões teciduais. O terceiro fator é a viscosidade do artigo de injeção, que desempenha um papel crítico na seleção de agulhas. Normalmente, 20 a 30 agulhas de calibre são usadas em procedimentos de administração parenteral para ratos e ratos. Os hubs dessas agulhas são geralmente codificados por cores para facilitar a identificação.

A solução deve ter fluidez suficiente para passar por pelo menos uma dessas agulhas. Se a solução pode passar por mais de um, então, em geral, a escolha é o menor medidor viável. O próximo fator é o volume de administração que afeta a seleção de seringas. Semelhante às agulhas, deve ser selecionada a menor seringa possível para dosagem precisa com graduações corretas. O medidor de agulha e o volume de administração também dependem da rota, e da espécie, tamanho e idade do animal sendo administrado. Consulte a Tabela 1 abaixo para revisar os valores relacionados às rotas discutidas neste vídeo. A consideração final importante é a taxa de absorção, que varia significativamente com cada rota de administração e pode desempenhar um papel na seleção do método mais adequado.

Agora, vamos falar sobre as características peculiares dos métodos de injeção rotineiramente empregados.

Sc ou SubQ Injection coloca o material entre as camadas da pele e o músculo em um espaço virtual criado pelo levantamento da pele. Isso permite a injeção segura de volumes maiores, mas a taxa de absorção é mais lenta do que outras rotas, proporcionando um efeito mais sustentado. Durante a administração de IP, o composto é injetado diretamente na cavidade peritoneal. Este é outro método comum usado para fornecer grandes volumes de solução. Embora uma injeção de IP seja considerada administração parenteral, o mecanismo de absorção é, na verdade, mais semelhante à dosagem oral.

Uma injeção de IM fornece um composto diretamente no glúteo ou no músculo gastrocnemius. Uma substância injetada IM é rapidamente absorvida devido ao número abundante de vasos dentro do tecido muscular, o que pode torná-lo uma rota preferida em alguns casos. A injeção imprópria ou repetida no músculo pode causar danos nos nervos, resultando em paralisia ou necrose muscular. Por fim, uma injeção intravenosa na veia traseira do animal é a via mais eficaz de administração, pois a substância é diretamente introduzida no sistema circulatório. Note que o composto deve ser injetado em uma das veias traseiras caudais laterais localizadas nas laterais da cauda. Há um vaso que corre ao longo da linha média ventral da cauda, que não é adequado para fins de injeção.

Agora que discutimos o fundo, vamos aprender os procedimentos, começando com injeções de SC. Para ratos, escolha o animal pela cauda e deixe descansar em outra superfície segura, como a tampa da barra de arame. Em seguida, contenha manualmente o animal levantando a pele ao redor do pescoço, formando uma tenda. Em seguida, coloque o animal sobre a mesa com os pés traseiros apoiados na superfície e coloque o calcanhar da mão sobre a mesa para evitar peso indevido sobre o animal que pode comprometer a respiração.

Para injetar, pegue a seringa com a solução a ser injetada, e direcione a agulha paralela à coluna vertebral e longe da cabeça para evitar a possibilidade de perfurações no crânio. Em seguida, insira a agulha com chanfrado voltado para cima, o que permite um deslize suave na pele. Puxe o êmbolo para verificar se há uma colocação adequada da agulha. Se houver pressão traseira quando o êmbolo é puxado para trás, então a agulha está na posição correta. Se o ar for atraído para dentro do êmbolo, então a agulha precisará ser reposicionada.

Depois de confirmar que a agulha está posicionada corretamente, injete lentamente com um movimento constante. Faça uma pausa após a injeção e gire a agulha ligeiramente sob a pele para evitar a perda do artigo de injeção. Em seguida, belisque a pele no local da injeção e retire a agulha. Este mesmo método pode ser usado em desmamar ratos.

Para ratos adultos, primeiro o animal tem que ser contido usando um dispositivo, procedimento para o qual é discutido no vídeo “Noções Básicas de Manuseio e Contenção” desta coleção. Então, pode-se realizar a injeção de SC da mesma forma que feito em camundongos.

Em seguida, aprenderemos como executar uma injeção de IP. Em camundongos, use a técnica de contenção de duas mãos para conter manualmente o animal, novamente descrito no vídeo “Noções Básicas de Manuseio e Contenção”. Certifique-se de que sua mão não dominante está posicionada alta o suficiente no pescoço para evitar que o animal vire. Estabilize os traseiros colocando a cauda entre o terceiro e quarto dedos ou fixando firmemente a pele entre os dedos restantes e a base do polegar.

Em seguida, posicione o animal para expor seu abdômen. Incline o animal com a cabeça apontada para baixo em um ângulo de 30° para permitir que os intestinos caiam para a frente. O marco da injeção pode ser delineado assim: desenhar uma linha imaginária que se estende horizontalmente através do corpo, no topo do quadril, do flanco ao flanco. Em seguida, desenhe a fronteira medial, ou a linha média, ao longo da linha onde o cabelo crescendo em direções opostas se encontra. Por fim, imagine a borda lateral, que é uma linha do topo dos quadris até o prepuce em machos e seguindo as em fêmeas. Isso fornece a área triangular para injeção de IP segura.

O próximo método que discutiremos é a injeção de IM. A contenção nesta técnica para camundongos e ratos requer duas pessoas ou o uso de um tubo de contenção. Aqui, descreveremos o método de uma pessoa utilizando um dispositivo de contenção.

Primeiro, coloque o animal no tubo e com as patas traseiras para fora, puxe a cauda para posicionar o animal. Em seguida, segure a pele do flanco na porção craniana do fêmur para estender a perna e evitar que o sufocamento se dobre. Em seguida, posicione o dispositivo de contenção para permitir a visualização do local de injeção.

Para identificar o marco glúteo, localize a massa muscular glútea posterior ao fêmur. O osso pode ser palpated e o músculo grande é facilmente sentido. Observe a linha média que vai do ponto do hock até a cauda. Muitas vezes você pode ver o cume onde os cabelos das superfícies laterais e internas se unem crescendo em direções opostas. Normalmente, as injeções são feitas em direção ao aspecto lateral fora da linha média. O gastrocnemius é o músculo da panturrilha e a injeção neste músculo também é melhor realizada a partir do aspecto posterior.

Para o músculo glúteo, no marco localizado, insira a agulha a uma profundidade máxima de cerca de 5 mm. Evite reposicionar a seringa durante a injeção para evitar danos musculares. Em seguida, aspire para garantir que a colocação está dentro do músculo, não um vaso sanguíneo. E por último, injete o material de forma lenta e constante, já que a injeção rápida causará trauma tecidual. Remova a agulha de forma perpendicular seguindo a mesma rota da inserção. Para o músculo gastrocnemius, insira a agulha a uma profundidade máxima de 3 mm e realize a injeção da mesma forma que para o músculo glúteo.

Por último, vamos aprender como realizar uma injeção intravenosa nas veias traseiras dos roedores. O mesmo método é aplicável tanto para ratos quanto para ratos.

Coloque o animal em um tubo de contenção cilíndrica e aqueça todo o corpo do animal usando uma almofada de aquecimento elétrica definida para MEDIUM por cerca de 2-5 minutos. Continue aquecendo o animal, até que os vasos sanguíneos fiquem dilatados, que é visivelmente maior. Lembre-se, as veias traseiras caudais laterais estão localizadas nas laterais da cauda. A artéria que está na linha média ventral não é adequada para fins de injeção. Gire o dispositivo de contenção e posicione a cauda de tal forma que as veias laterais da cauda estejam voltadas para cima e mantidas sob tensão. Não aplique tensão excessiva ou o vaso pode ser esticado e o fluxo sanguíneo diminuído.

Coloque a agulha chanfrada diretamente sobre o vaso sanguíneo o mais distally possível, e aplique uma leve pressão para deslizar a agulha para dentro da cauda paralela à coluna vertebral. Injete o material em um movimento lento e fluido e observe que o vaso branqueia à medida que o sangue é empurrado para fora pelo material de injeção. Se a agulha não estiver bem posicionada no vaso, haverá forte resistência ao injetar, e se você injetar com força o material encherá o espaço subcutâneo e a cauda irá balão. Pare imediatamente, pois o material – que foi projetado para ser injetado por via intravenosa – pode ser cáustico para os tecidos circundantes. Retire a agulha e tente outra injeção mais cranialmente na cauda. Após a injeção bem sucedida, retire a agulha e aplique pressão no local da injeção para garantir uma boa hemostasia antes de devolver o animal à gaiola.

Agora que você está familiarizado com métodos comuns de injeção, vamos olhar para algumas aplicações dessas rotas de administração, além da entrega de drogas.

Em vários experimentos, camundongos são injetados com um patógeno específico para estudar infecção. Aqui, os pesquisadores utilizaram a rota subcutânea para introduzir bactérias resistentes a antibióticos que causam lesões, e o tamanho dessas lesões serviu como leitura para a virulência do patógeno. Vários cientistas estão interessados em estudar distribuição e sobrevivência de células-tronco após a entrega sistêmica. Neste estudo, os pesquisadores realizaram a injeção de veias traseiras de células-tronco neurais geneticamente marcadas em um modelo animal de esclerose múltipla e localizaram a distribuição das células injetadas para a medula espinhal e regiões cerebrais.

Em outro experimento, pesquisadores injetaram myoblasts marcados fluorescentemente intramuscularmente em um modelo animal de distrofia muscular. Na sequência, foi realizada a bioluminescência para análise da implantação bem sucedida das células-tronco. Por fim, as injeções também podem ser usadas para gerar modelos animais. Esses cientistas perfomaram a injeção intraperitoneal de Dimethylnitrosamina – uma potente toxina hepática – em ratos Wistar machos para gerar um modelo animal de fibrose hepática, que foi então usado para estudar o desenvolvimento da doença hepática.

Você acabou de assistir a primeira parcela de JoVE na administração composta discutindo as injeções parenteral comumente empregadas. Lembre-se, a rota ideal de entrega é baseada em vários fatores, incluindo o pH, volume e viscosidade da solução injetada. E cada técnica tem vantagens e desvantagens, que devem ser consideradas em relação às necessidades experimentais. Como sempre, obrigado por assistir!