Preparação da Amostra para Caracterização Analítica

1. Fazer uma solução a partir de um sólido

1. Escolha o vidro correto para fazer a solução.
2. Limpe bem os vidros através de um banho ácido de 1% HCl ou HNO_3, juntamente com sabão para remover quaisquer impurezas (aviso de segurança: com qualquer forte uso de ácido luvas, óculos e outros equipamentos de proteção individual apropriados).
3. Enxágüe o vidro várias vezes com água destilada. Seque em um forno, se necessário.
4. Para fazer uma solução a partir de uma massa sólida e massa a quantidade correta de sólido.
5. Coloque o sólido no frasco volumoso e depois encha cerca de 3/4 cheio com solvente.
6. Gire para dissolver totalmente o sólido antes de encher o frasco volumoso completamente.
7. Encha o frasco volumoso até a linha. O menisco deve tocar na linha de enchimento. Em seguida, inverta o frasco várias vezes com a tampa para misturar ainda mais, se necessário.

2. Fazer uma solução a partir de um líquido

1. Escolha o vidro correto para fazer a solução. Para entregar um líquido usando uma pipeta de transferência, encha a pipeta na linha usando uma lâmpada de pipeta.
2. Solte o líquido no frasco volumoso para fazer a solução. Não exploda a última gota.
3. Encha o frasco volumoso até a linha para que o menisco toque a linha. Misture a solução invertendo várias vezes.

3. Filtragem

1. Para uma configuração de frasco de filtro, coloque um pedaço de papel filtro no filtro de vidro frito.
2. Conecte o filtro de vidro frito a um frasco de filtro.
3. Coloque um vácuo no braço do frasco do filtro. Uma armadilha também pode ser usada para evitar que qualquer líquido entre no vácuo.
4. Ligue o vácuo e despeje a amostra através do papel do filtro.
5. Filtre até que um pó seco seja deixado. Continue a secar a amostra em um forno se desejar um precipitado seco.
6. Para o filtro de seringa, adicione a amostra a uma seringa limpa com uma extremidade de bloqueio Luer.
7. Enrosque o filtro de seringa na trava Luer. Empurre o êmbolo sobre a seringa e colete o líquido após o filtro.
8. Para um filtro de giro, pré-enxágue o filtro com tampão ou água ultrapura.
9. Insira o filtro de giro em um tubo de microcentrifuuagem.
10. Carregue a amostra em cima do filtro e cubra o tubo.
11. Coloque o tubo em uma centrífuga, certificando-se de equilibrá-lo corretamente com outro tubo do outro lado, e centrífuga por 10-30 min, dependendo do tipo de filtro de giro.
12. Remova o filtro e o líquido na parte inferior é a solução filtrada.
13. Se a amostra não puder passar pela membrana — como uma grande proteína — ela permanecerá no topo do filtro. Neste caso, vire o filtro, coloque-o em um novo tubo e gire novamente. Isso produzirá uma amostra concentrada.

4. Mascaramento e Chelating

1. Para mascarar e quesla, ajuste o pH a um valor apropriado, dependendo das constantes de formação do agente mascarador e do agente quelaante.
2. Adicione o agente de mascaramento à solução e deixe que ele reaja por pelo menos 10 minutos com o íon metálico de escolha.
3. Adicione o reagente de quesequente. Para EDTA, ele normalmente forma um complexo 1:1 com o íon metálico, por isso adicione o máximo de mols de EDTA como o metal que será quelaado.
4. Após a quelação, demask adicionando um produto químico que reagirá com o íon de metal mascarado. A substância mascarada pode então ser analisada ou recuperada por precipitação.