Name: Gravação eletrofisiológicas na Drosophila Embrião (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-05-21T00:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 31 s
Description: Aprenda a realizar gravações eletrofisiológicas em embriões de Drosophila para estudar propriedades elétricas de músculos e neurônios em desenvolvimento. Este método permite caracterizar a sinaptogênese funcional em junções neuromusculares glutamatérgicas e sinapses colinérgicas e GABAérgicas centrais.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

KB é suportado pelo NIH conceder GM54544.

Os autores não têm nada a declarar.

Eletrofisiológicas gravação a partir de embriões Drosophila requer manipulação manual e dissecção. A saúde da preparação e conseqüente qualidade das gravações, depende de um ser capaz de rapidamente e ordenadamente preparar os tecidos frágeis embrionárias para gravação, e depois executar o experimento. Experimentadores devem ser proficientes em ambas as dissecções embrionárias e eletrofisiologia patch clamp antes de tentar resolver ao mesmo tempo. As gravações podem ser feitas em um...

gravação eletrofisiológicas na drosophila embrião

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Drosophila é um modelo premier genética para o estudo de ambos o desenvolvimento embrionário e neurociência funcional. Tradicionalmente, esses campos são muito afastadas umas das outras, com histórias em grande parte independentes e comunidades científicas. No entanto, a interface entre esses campos normalmente díspares são os programas de desenvolvimento subjacente aquisição de propriedades funcionais elétricos de sinalização e diferenciação das sinapses químicas funcionais durante as fases finais da formação de circuitos neurais. Esta interface é uma área extremamente importante para a investigação. Em Drosophila, estas fases de desenvolvimento funcional ocorrem durante um período de &lt;8 horas (a 25 ° C) durante o último terço da embriogênese. Este período final de desenvolvimento foi considerado por muito tempo intratáveis ​​devido a investigação para a deposição de um resistente, impermeável cutícula epidérmica. Um avanço de avanço foi a aplicação de cola de água polimerização cirúrgica que pode ser aplicado localmente para a cutícula para que a dissecção controlada de embriões em estágio avançado. Com uma incisão dorsal longitudinal, o embrião pode ser deitadas, expondo o cordão nervoso ventral e musculatura da parede do corpo à investigação experimental. Whole-cell patch-clamp técnicas podem então ser empregadas para gravar a partir de neurônios individualmente identificáveis ​​e músculos somáticos. Estas configurações de gravação ter sido usado para rastrear o surgimento e amadurecimento de correntes iónicas e propagação do potencial de ação em ambos os neurônios e músculos. Mutantes genéticos que afetam estas propriedades elétricas foram caracterizados para revelar a composição molecular de canais iônicos e associados complexos de sinalização, e para começar a exploração dos mecanismos moleculares de diferenciação funcional. Uma atenção especial tem sido a montagem de conexões sinápticas, tanto no sistema nervoso central e periferia. O glutamatérgica junção neuromuscular (MNJ) é mais acessível a uma combinação de imagens ópticas e de gravação eletrofisiológico. Um eletrodo de sucção de vidro é usado para estimular o nervo periférico, junção com excitatórios atual (EJC) gravações feitas na tensão muscular preso. Esta configuração de gravação tem sido usado para traçar a diferenciação funcional da sinapse, e acompanhar o surgimento e amadurecimento de propriedades de liberação pré-sináptica de glutamato. Além disso, as propriedades de pós-sinápticos podem ser analisadas de forma independente por meio de iontoforese ou aplicação de pressão de glutamato diretamente na superfície do músculo, para medir o aparecimento e maturação dos campos receptores de glutamato. Assim, ambos os elementos pré e pós-sinápticos podem ser monitorados separadamente ou em combinação durante a sinaptogênese embrionárias. Este sistema tem sido fortemente usada para isolar e caracterizar mutantes genéticos que impedem a formação da sinapse embrionárias e, assim, revelar os mecanismos moleculares que regem a especificação e diferenciação das conexões sinápticas funcionais sinapse e propriedades de sinalização.

Gravações eletrofisiológicas da<em&gt; Drosophila</em&gt; Embriões permitem análises de músculo em desenvolvimento e as propriedades elétricas do neurônio, bem como caracterização de sinaptogênese funcionais da junção neuromuscular e glutamatérgica colinérgica central e sinapses GABAérgica.

Gravação eletrofisiológicas na Drosophila Embrião

A Drosophila é um modelo genético primordial para o estudo tanto do desenvolvimento embrionário quanto da neurociência funcional. Tradicionalmente, esses campos são bastante ...

Registros eletrofisiológicos de músculos e neurônios motores podem ser obtidos a partir da parede corporal de um embrião de oph adequadamente preparado. Os músculos 6, 7, 12 ou 13 podem ser facilmente registrados na configuração de gravação de célula inteira, e correntes de amplitude miniatura robustas podem ser medidas após a obtenção de um selo gigaohm para registrar da junção neuromuscular. Um eletrodo de sucção pode ser usado para aspirar um nervo motor próximo ao ponto de saída do SNC e fornecer estimulação pré-sináptica enquanto as correntes de célula inteira são medidas no músculo pós-sináptico.Alternativamente, uma pipeta pode ser usada para liberar neurotransmissores excitatórios próximo ao eletrodo de registro por iontoforese ou ejeção por pressão. Olá, eu sou Ton do Laboratório do Dave do Departamento de Ciências Biológicas da Universidade de Illinois em Chicago. Hoje eu vou mostrar a vocês a gravação eletrofisiológica da junção neuromuscular de embriões em estágio de saliente e de neurônios centrais.Estes procedimentos estão sendo usados para estudar a função e o desenvolvimento do sistema neuromuscular de joof. Essas técnicas foram originalmente desenvolvidas por Kenda

electrophysiological-recording-in-the-drosophila-embryo

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Este vídeo demonstra o procedimento para isolar toda cérebros de adultos Drosophila em preparação para gravar a partir de neurônios individuais usando a tecnologia de célula padrão todo. Inclui imagens de células GFP rotulados e neurônios visto durante a gravação.

Todo Recordings celular do cérebro de adultos Drosophila

Aqui nós descrevemos métodos eletrofisiológicos para medir a transmissão sináptica na junção neuromuscular de larva Drosophila. Liberação evocada é iniciado artificialmente estimulando os axônios do neurônio motor ea transmissão através do MNJ pode ser medida pela resposta pós-sináptica evocado no músculo.

Métodos eletrofisiológicos de gravação Potenciais Synaptic do MNJ de larvas de Drosophila

Esta técnica expõe a Drosophila neuromusculature embrionárias para imuno-histoquímica ou gravação eletrofisiológico. É útil para o estudo de eventos no início do desenvolvimento neuromuscular ou a realização de eletrofisiologia em mutantes que não podem eclodir.

Colheita e Preparação Drosophila Os embriões para Gravação eletrofisiológicos e outros procedimentos

Apresentamos várias maneiras de monitorar a função cardíaca na larva...

Função de monitorização cardíaca em larval Drosophila melanogaster Para estudos fisiológicos

O Sistema de Fibra gigante é um circuito neuronal simples de...

As gravações eletrofisiológicas da via fibra Gigante da D. melanogaster</em

Este vídeo descreve o protocolo para registro eletrofisiológico da atividade fotorreceptora no olho de uma Drosophila imobilizada, permitindo a medição precisa das mudanças de voltagem em resposta a estímulos luminosos.

Registro eletrofisiológico das respostas de voltagem de fotorreceptores retinianos de Drosophila a estímulos luminosos

O vídeo demonstra o registro extracelular da atividade neuronal do sistema nervoso central (SNC) de larvas de Drosophila. O SNC seccionado é posicionado em uma câmara de registro e a atividade elétrica de um nervo descendente é registrada para estabelecer a frequência de disparo da linha de base. Um agente de teste é então introduzido e a mudança na frequência de disparo é registrada para determinar o efeito excitatório ou inibitório do agente.

Registro extracelular da atividade elétrica no sistema nervoso central da drosófila

Este protocolo descreve gravação extracelular das respostas potenciais de ação disparados pelos neurônios do gosto labellar em Drosophila.

Eletrofisiológica Gravação De<em&gt; Drosophila</em&gt; Labellar Prove sensilla

Os microeletrodos afiados permitem a caracterização eletrofisiológica precisa da saída de fotorreceptores e interneurônios visuais em Drosophila viva. Aqui, mostramos como usar esse método para registrar respostas de voltagem de alta qualidade de células individuais à estimulação de luz controlada. Este método é ideal para estudar o processamento de informações neurais em olhos compostos de insetos.

Método eletrofisiológico para respostas gravação intracelular de tensão<em&gt; Drosophila</em&gt; Fotorreceptores e Interneurônios à luz Estímulos<em&gt; In Vivo</em

As gravações de células inteiras dos fotorreceptores Drosophila melanogaster permitem a medição de solavancos escuros espontâneos, colisões quânticas, respostas macroscópicas à luz e relações tensão-tensão em várias condições. Em combinação com as ferramentas de manipulação genética de D. melanogaster , este método permite o estudo da via de sinalização inositol-lipídico ubíqua e seu alvo, o canal TRP.

Método eletrofisiológico para gravações de tensão de célula inteira de<em&gt; Drosophila</em&gt; Fotorreceptores

Este protocolo descreve um método para registrar a atividade elétrica descendente do sistema nervoso central Drosophila melanogaster para permitir que o custo-eficiente e conveniente de teste de agentes farmacológicos, mutações genéticas das proteínas neurais, e/ou o papel das vias fisiológicas inexploradas.

Eletrofisiológica gravação da atividade do sistema nervoso Central de terceiro ínstar Drosophila Melanogaster

Aprenda a realizar gravações eletrofisiológicas em embriões de Drosophila para estudar propriedades elétricas de músculos e neurônios em desenvolvimento. Este método permite caracterizar a sinaptogênese funcional em junções neuromusculares glutamatérgicas e sinapses colinérgicas e GABAérgicas centrais.

Gravação eletrofisiológicas na Drosophila Embrião

Explorar mais vídeos