Estudos genéticos de proteínas de reparo do DNA Humano Utilizando Levedura como um sistema modelo

Os plasmídeos WRN são digeridos com a célula de endonuclease de restrição um e MLU um e os fragmentos são purificados a partir de um gel. Esses vetores de expressão digeridos com fragmentos de célula um a MLU e WN são então ligados aos locais da célula um a MLU um do vetor de levedura. O plasmídeo multicópia também contém um marcador TRP selecionável.

As construções W Rrn são transformadas em levedura seguindo protocolos padrão e os transformantes são selecionados em meio sintético de glicose completa sem triptofano. Os transformantes individuais são então colocados em meios sintéticos de glicose completa sem triptofano e as placas são incubadas a partir da placa principal. Para analisar a restauração do fenótipo de crescimento lento em SGS transformada em WRN, um dos três principais transformantes de cepa mutante dupla são listrados em placas contendo glicose ou galactose.