Name: Indução cirúrgica da hidropisia endolinfática por obliteração do ducto endolinfático (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-01-22T16:52:00.000+00:00
Duration: 11 min 49 s
Description: Aprenda a técnica cirúrgica de obstrução do ducto endolinfático em cobaias para modelar a hidropisia endolinfática. Este método permite estudar a patologia da doença de Menière e investigar alterações auditivas progressivas.

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Este trabalho foi financiado em parte por uma doação da Sociedade Americana Otológica a CAM e por uma concessão dos Hospitais Centro Médico da Universidade de caso para KNA e CAM. Gostaríamos de agradecer a Jeff Churney em Foco Medical Group, Inc. (Hinckley, OH) para fornecer-nos com uma câmera microscópio. Serviços de produção de vídeo uma cortesia da Fusão Criativa Marketing, Inc. (Valdosta, GA) Agradecemos Jonathan e Alex Frankel Levitt em CWRU por seus comentários durante a elaboração do vídeo.

Parte 1: Anestesia e preparação para a cirurgia <ol><li> Um adulto, do sexo feminino Duncan-Hartley cobaia de Charles River International Laboratories, Inc. (Wilmington, MA) é anestesiados com cetamina 60 mg / kg e xilazina 12 mg / kg por via intramuscular. </li><li> Lubrificante petróleo é aplicada para os olhos para proteger o animal de lesão da córnea devido à secagem. </li><li> O animal é raspado a partir do topo da cabeça até os ombros e entre as orelhas. </li><li> A área depilada é preparado de forma estéril, em primeiro lugar com 7,5% iodopovidona seguido por álcool etílico 70%. </li><li> O animal é colocado sobre uma mesa de operação com manta para aquecimento e para uma plataforma que eleva a cabeça e flexiona o pescoço. A cabeça do animal é direcionado para longe do cirurgião. Flexão adequada do pescoço é necessária a fim de expor adequadamente a crista occipital. </li><li> O animal é coberto de forma estéril. </li></ol> Parte 2: Incisão e exposição do osso occipital <ol><li> Bupivacaína adrenalina (Marcaine) 0,25% é aplicada ao longo do local da incisão prospectivo (incisão na pele da linha média dorsal ao longo da região occipital). Isso faz com que a vasoconstrição local, limitando o sangramento, e fornece analgesia pós-operatória com duração depois que o animal acorda. </li><li> Linha média dorsal incisão na pele é feita sobre o couro cabeludo ao longo do occipital. <img src="/files/ftp_upload/1728/1728fig1.jpg" alt="Figura 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1: incisão da pele é feita ao longo da linha média dorsal, como mostrado acima. </li><li> Para obter uma exposição adequada, a pele fica retraída lateralmente, colocando uma pequena hemostat curvas em cada lado da incisão. </li><li> Uma incisão horizontal é feita ao longo do músculo do pescoço para expor o occipital óssea. Nesta fase o animal pode se contorcer, apesar anestesia adequada, devido à transecção do nervo occipital maior. Transecção da medula espinhal é um perigo com incisão horizontal na região suboccipital. Esta complicação pode ser evitada garantindo que o osso subjacente é sempre senti debaixo da lâmina de bisturi. </li><li> Com a musculatura suboccipital incisão ao osso, um hemostat terceiro é usado para retirar a borda do músculo superior. Este hemostat é mantida no lugar pelo assistente cirúrgico. </li><li> Um elevador Lempert periosteal é usada para expor a sutura têmporo-occipital. </li></ol> Parte 3: Perfuração da sutura têmporo-occipital <ol><li> Após a exposição da sutura têmporo-occipital (Figura 2), uma broca de 1,5 mm otológica diamante rebarba é usado para perfurar inferio-lateralmente à sutura. </li><li> Abaixo da tabela externa do crânio, a textura esponjosa do diploe (O osso esponjoso intervir entre as tabelas do crânio) se tornará visível. Uma vez que o diploe foi perfurado de distância, a tabela interna do crânio aparece, junto com uma tonalidade azul fraca que é o seio sigmóide. </li><li> As margens do seio sigmóide são definidas sem penetrar na embarcação. </li><li> Uma vez que o osso que cobre o seio sigmóide foi suficientemente diluída, maior ampliação é utilizado e uma pick reta é usado para remover cuidadosamente o osso que cobre o seio sigmóide. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1728/1728fig2.jpg" alt="Figura 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 2"> Figura 2 A área a ser perfurado parcialmente recobre a sutura têmporo-occipital. Parte 4: obstrução do ducto <ol><li> O seio sigmóide esqueletizado é retraído medialmente para revelar o opérculo. </li><li> A 0,5 milímetro de diamante rebarba é usado para perfurar medial do opérculo e no saco endolinfático e duto. </li><li> O ducto endolinfático é então embalado com cera de osso usando uma picareta em linha reta. </li><li> O defeito do crânio é então reforçado com Gelfoam (Pfizer, New York, NY). </li><li> 4-0 Polysorb sutura (Estados Unidos Surgical, Norwalk, CT) é usado para trazer o músculo juntos. Há então uma transição suave para uma técnica de sutura subcutânea para o fechamento da incisão na pele. Com este encerramento não há necessidade de remover suturas mais tarde e não há risco de que o animal garra no local e retirar uma sutura. </li></ol> Parte 5: cuidados pós-operatórios A cobaia é colocado em uma incubadora para manter a temperatura corporal e verificado em intervalos de 30 minutos até que desperto e capaz de manter uma posição esternal. O animal é inspecionado para a taxa de respiração e cor do corpo. Este centro utiliza enrofloxacina (0,2 mL a 22,7 mg / mL, por via subcutânea) e buprenorfina (0,05 mL em 0.3mg/mL, por via subcutânea) no pós-operatório profilaxia de infecções e controle da dor, respectivamente. Analgésico é administrado uma vez no dia da cirurgia e duas vezes no dia pós-operatório de um e dois. Embora os antibióticos não são necessários para su assépticargery, um de cinco dias, duas vezes ao curso de um dia de antibióticos profiláticos pode ser givenonce de pós-operatório de três dias. Complicações e Gestão <ol><li> Depressão respiratória O cirurgião deve sempre estar ciente de respiração do animal s. Se a respiração diminui ou pára, interromper a cirurgia e inspecionar visualmente para o movimento do tórax. Se o animal está passando por dificuldade respiratória ou respiração difícil, verifique se a boca e das vias aéreas não estão ocluídos. </li><li> Sigmóide seio Gelfoam Use penetração e de compressão juntamente com a ponta de sucção até que o sangramento é interrompido. </li><li> Penetração dural cobrir o defeito com Gelfoam. </li><li> Dano vestibular Não perfurar mais de 1 mm lateral ao seio sigmóide. Fazê-lo riscos ferindo o canal semicircular posterior, o que invalidaria todos os dados para a cobaia. </li></ol>

<ol><li>Andrews, J. C., Bohmer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+surgical+approach+to+the+endolymphatic+sac+and+the+cochlear+aqueduct+in+the+guinea+pig%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig.</a> Am J Otolaryngol. 10, 61-66 (1989).</li>
<li>Kimura, R., Schuknecht, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Membranous+hydrops+in+the+inner+ear+of+the+guinea+pig+after+obliteration+of+the+endolymphatic+sac%5BTitle%5D)+AND+%22Pract+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">Membranous hydrops in the inner ear of the guinea pig after obliteration of the endolymphatic sac.</a> Pract Otolaryngol. , (1965).</li>
</ol>

Experimentos em animais foram realizados de acordo com as diretrizes e regulamentos estabelecidos pela Institutional Animal Care e do Comitê Use na Case Western Reserve University.

Nas semanas seguintes a obstrução cirúrgica do ducto endolinfático, o tema animais experiências perda auditiva flutuante neurossensorial medida pela audiometria de tronco cerebral evocados. A amostra de resposta auditiva de tronco cerebral de gravação (ABR) é mostrado na Figura 3. A orelha esquerda serve como um controle não operados. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1728/1728fig4.jpg"><img border="0" src="/files/ftp_upload/1728/1728fig3tmb.jpg" alt="Fim 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="...

indução cirúrgica da hidropisia endolinfática por obliteração do ducto endolinfático

Surgical Induction of Endolymphatic Hydrops by Obliteration of the Endolymphatic Duct

Indução cirúrgica de hidropisia endolinfática (ELH) na cobaia por obliteração e obstrução do ducto endolinfático é um modelo animal bem-aceito da doença e uma importante correlação para as doenças humanas de Meniere. Em 1965, Robert Kimura e Harold Schuknecht descrita pela primeira vez uma abordagem intradural para a obstrução do ducto endolinfático (Kimura, 1965). Apesar de eficaz, esta técnica, que requer a penetração da cobertura protetora do cérebro, decorrentes de um nível indesejável de morbidade e mortalidade nos indivíduos animal. Conseqüentemente, Andrews e Bohmer desenvolveu uma abordagem extradural, que previsivelmente produz menos das complicações associadas com o sistema nervoso central (SNC) de penetração. (Andrews e Bohmer 1989) A abordagem extradural descrito aqui primeiro exige uma incisão mediana na região do occipital para expor a camada subjacente muscular. Operamos apenas no lado direito. Após retração do tecido apropriado sobrejacente, uma incisão horizontal é feita na musculatura da região occipital direito de expor a linha de sutura direito temporo-occipital. O osso imediatamente inferio-lateral da linha de sutura (Fig. 1) é então perfurado com uma broca otológico até o seio sigmóide torna-se visível. Retração medial do seio sigmóide revela o opérculo do ducto endolinfático, que abriga o saco endolinfático. Perfuração medial do opérculo até a área do saco endolinfático revela o ducto endolinfático, que depois é embalado com cera óssea a produzir obstrução e, finalmente, ELH. Nas semanas seguintes, o animal irá demonstrar a progressiva, perda auditiva flutuante e evidência histológica de ELH.

Este vídeo mostra como cirurgicamente obstruem o ducto endolinfático cobaia para produzir hydrops endolinfático.

Indução cirúrgica da hidropisia endolinfática por obliteração do ducto endolinfático

A indução cirúrgica de hidropisia endolinfática (HEL) em porquinhos-da-índia, por meio da obliteração e obstrução do ducto endolinfático, é um modelo animal bem aceito...

Olá, meu nome é Chris Edden. Sou pesquisador da Case Western Reserve University, no Departamento de Otorrinolaringologia e Cirurgia de Cabeça e Pescoço. Hoje descreverei o bloqueio cirúrgico do ducto endolinfático no porquinho-da-índia, o qual produz hidropisia endolinfática e é utilizado para modelar diversas patologias otológicas relacionadas a doenças.A hidropsia linfática é um inchaço do compartimento endolinfático da cóclea e é um marcador histológico fundamental da doença de Menière. Aqui você vê uma imagem em corte transversal de uma cóclea normal com dois compartimentos perilinfáticos, a escala vestibular e a escala timpânica, e uma escala média não dilatada, que é contínua com o ducto endolinfático, a estrutura sobre a qual realizamos a cirurgia. Dentro de semanas após o procedimento cirúrgico, a escala média se torna dilatada, como indicado aqui, e a membrana de Reissner fica distendida. Os animais também apresentam perda auditiva flutuante progressiva na orelha operada.Assim como em muitas doenças do ouvido, a indução cirúrgica de hidropisia no porquinho-da-índia tornou-se o modelo animal padrão-ouro para a doença de Menière humana desde que foi descrita pela primeira vez em 1965 por Robert Kor e Harold Schneck. Embora o procedimento tenha sido inicialmente realizado usando uma abordagem intradural mais invasiva, nosso centro prefere uma abordagem extradural porque resulta em menor morbidade e mortalidade para o animal. A seguir, descrevem-se os materiais, os cuidados com o animal e a técnica cirúrgica necessários para a realização bem-sucedida e humanitária deste procedimento bastante complexo.Primeiro, descreverei os materiais cirúrgicos necessários. O animal é uma porquinho-da-índia adulta fêmea, raça Duncan Hartley, albina, da Charles River International Laboratories Incorporated. Para a preparação do ambiente e a montagem asséptica, serão necessários trajes cirúrgicos estéreis, microscópio operatório com capa estéril e luz de Mars, campo cirúrgico pequeno com janela, almofada térmica intraoperatória e aparelho de aspiração.Um número cinco, sucção, um número 40 de sucção com soro fisiológico estéril, um recipiente de aço inoxidável e um suporte para a cabeça. Para anestesia, você precisará de quetamina 60 miligramas por quilograma e xilazina 12 miligramas por quilograma pré-operatóriamente. Você precisará de um lubrificante à base de petróleo, uma máquina de barbear elétrica, Betadine e álcool etílico 70% intraoperatóriamente, você precisará de 0,6 mililitros de 0,25% de marcain, uma lâmina de bisturi descartável número 11 com segurança, três hemostatos curvos, um elevador periostal de Lieber, pontas cirúrgicas Wexel, uma broca otológica, uma broca diamantada de 1,5 milímetro e uma broca diamantada de 0,5 milímetro.Uma cureta de osso reta, uma seringa de 10 cc, cera óssea, espuma gelatinosa, fio reabsorvível 4-0 com agulha cortante P-13, pinça adin, porta-agulhas com mandíbula de diamante e tesoura para sutura. Para os cuidados pós-operatórios, você precisará de uma gaiola limpa com almofada aquecida. Dois décimos de ml de enrofloxacina a 22,7 miligramas por mililitro.0,05 mililitros de buprenorfina 0,3 miligramas por mililitro. Primeiro, anestesie o porquinho-da-índia com quetamina 60 miligramas por quilograma e xilazina 12 miligramas por quilograma por via intramuscular. Este regime permite de 60 a 90 minutos de anestesia sem depressão respiratória, o que geralmente é tempo suficiente para a realização deste procedimento.Após anestesiar o animal, um lubrificante à base de petróleo é aplicado nos olhos. Em seguida, a região posterior da cabeça é raspada com tesoura elétrica, da região torácica superior até o topo da cabeça. Então, o local é preparado com Betadine, seguido por álcool.Agora o animal está pronto para a cirurgia. Meu nome é Dr. Cliff McGillion. Sou professor de Otorrinolaringologia e Cirurgia de Cabeça e Pescoço aqui nos Hospitais da Case Western Reserve University em Cleveland e diretor de Otologia e Neurotologia.O que eu quero discutir com vocês hoje é a técnica cirúrgica para induzir hidroses endolinfáticas no porquinho-da-índia. Acessamos a região de forma extrabucal e expomos o seio sigmoide e, logo anterior e lateral ao seio sigmoide, localizamos o óstio do sistema endolinfático. Removemos o material do ducto e o material da bolsa, e na verdade alargamos o ducto com broca, sob visualização direta.A parte mais importante, na minha opinião, do procedimento é a esqueletização do seio sigmoide e, em seguida, a visualização medial e direta do O do canal endolinfático. Uma vez que o local cirúrgico esteja preparado, o animal é transferido para o centro cirúrgico e posicionado em um suporte para a cabeça. O pescoço é flexionado para proporcionar exposição adequada da crista occipital e é coberto de maneira estéril para garantir a saúde e a segurança do animal.Observe a mesma técnica asséptica que seria necessária em um paciente humano para manter uma temperatura corporal adequada durante o procedimento; certifique-se de colocar um tapete aquecedor sob a superfície operatória antes da primeira incisão. Injeta-se marcação ao redor do local cirúrgico. O procedimento cirúrgico inicia-se com uma incisão mediana na pele do couro cabeludo ao longo da região occipital para obter exposição adequada; retrai-se a pele colocando uma pinça hemostática em cada lado da incisão. A eletrocauterização não será necessária, pois o porquinho-da-índia possui um mecanismo hemostático robusto.Em seguida, faz-se uma incisão horizontal ao longo do músculo do pescoço. Para expor o osso occipital, uma incisão bem posicionada pode expor imediatamente a linha da sutura occipital temporal, conforme mostrado aqui. A secção do nervo occipital maior, que geralmente está subjacente ao músculo, pode fazer o animal apresentar espasmos.Apesar da anestesia adequada ao cortar através do músculo, é importante sentir o osso sob a lâmina. Caso contrário, o corte pode estar muito baixo, o que poderia correr o risco de secção da medula espinhal ao atravessar o músculo do pescoço. Um terceiro hemostato é utilizado para segurar a porção superior da incisão e é mantido no lugar pelo auxiliar cirúrgico.A dissecação romba é utilizada para expor o osso occipital. Lembre-se de permanecer sempre no lado direito da crista occipital externa e de que a orelha esquerda serve como controle. Neste modelo, um elevador periostal tipo lumper é então usado para expor ainda mais o crânio e revelar a crista occipital externa e a linha da sutura occipital temporal. A perfuração com uma broca de diamante de 1,5 milímetro começa logo abaixo da linha da sutura.O objetivo é expor a fossa auricular posterior e o seio sigmoide. Toda perfuração deve permanecer na linha de junção temporoccipital ou inferior a ela em todos os momentos. Mantenha um tubo de sucção número cinco para aspirar o sangue.Também peça a um assistente manter o campo irrigado com soro fisiológico estéril, gotejando continuamente de uma seringa de 10 cc. A perfuração causará algum sangramento da medula, mas a broca de diamante pode ser usada para estancar os vasos sangrantes a uma profundidade de aproximadamente um milímetro.Uma linha azul pálida ficará visível. Este é o seio sigmoide. Fique apenas aqui.O seu un lateral ao seio sigmoide. Pode-se encontrar a porção do ducto endolinfático. É importante definir as bordas do seio sigmoide sem penetrá-lo.Uma vez que o osso subjacente esteja suficientemente fino, a perfuração é interrompida e a sucção é alterada para um número 40. Também se utiliza uma ampliação maior. Um gancho reto é usado para remover suavemente o osso subjacente.O seio sigmoide é suavemente retratado, medialmente revelando o opérculo, que pode não ser claramente visível, pois frequentemente estará obscurecido por sangue. Agora, o seio sigmoide esqueletizado é suavemente retratado, medialmente revelando o opérculo. O sulco é então alargado com uma broca menor de corte de 0,5, obliterando o saco endolinfático e, finalmente, levando ao ducto endolinfático.O ducto é visível como uma oval escura na brancura do osso circundante. Cerca de um milímetro do ducto é perfurado antes de ser preenchido com cera óssea. A cera óssea é empurrada para dentro do ducto usando espuma de gel.Essa oclusão do ducto linfático endolinfático induzirá hidrodrops linfático endolinfático. O fio 4.0 poly shorb é usado para reunir o músculo. Em seguida, há uma transição contínua para uma técnica de sutura subcutânea para a incisão na pele. Com esse fechamento, não há necessidade de remover os pontos posteriormente, e não há risco de o animal arranhar o local ou puxar um ponto ou grampeamento para fora.Após a cirurgia, o porquinho-da-índia é colocado em uma incubadora para manter a temperatura corporal, com verificações a cada 30 minutos até que esteja acordado. O animal é examinado quanto à frequência respiratória e cor do corpo. Este centro utiliza o antibiótico de amplo espectro inin e buprenorfina para complicações dolorosas.Como em qualquer cirurgia, existem riscos para o animal. Agora abordarei algumas possíveis complicações intraoperatórias e como evitá-las. Depressão respiratória: o cirurgião deve estar sempre atento às respirações do animal, caso a respiração pare ou diminua.Interrompa a cirurgia e inspecione visualmente a presença de movimento torácico. Se o animal estiver apneico, verifique se a boca e a via aérea não estão obstruídas. Para a penetração do seio sigmoide, utilize espuma de gel e compressão juntamente com a ponta de sucção até que o sangramento seja interrompido.Cobertura da penetração dural com espuma de gel; danos vestibulares evitam perfurar mais de um milímetro lateralmente ao seio sigmoide, pois caso contrário o canal semicircular posterior pode ser lesionado, o que invalidaria todos os dados para aquele porquinho-da-índia específico. O bloqueio cirúrgico do ducto endolinfático no porquinho-da-índia é uma cirurgia tecnicamente exigente, mas com as ferramentas adequadas, instruções e conhecimento da anatomia relevante, pode ser realizada de maneira que seja ao mesmo tempo humanitária para o animal e útil como modelo para a doença de Ménière humana.

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Biology

Biologia

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