22 de janeiro de 2010
Este vídeo mostra como cirurgicamente obstruem o ducto endolinfático cobaia para produzir hydrops endolinfático.
Olá, meu nome é Chris Edden. Sou pesquisador da Case Western Reserve University, no Departamento de Otorrinolaringologia e Cirurgia de Cabeça e Pescoço. Hoje descreverei o bloqueio cirúrgico do ducto endolinfático no porquinho-da-índia, o qual produz hidropisia endolinfática e é utilizado para modelar diversas patologias otológicas relacionadas a doenças.
A hidrose linfática é um inchaço do compartimento endolinfático do cóclea e é um marcador histológico fundamental da doença de Ménière. Aqui você vê uma imagem em corte transversal de um cóclea normal, com dois compartimentos perilinfáticos, a escala timpânica e a escala vestibular, e uma escala média não dilatada, que é contínua com o ducto endolinfático, a estrutura sobre a qual realizamos a cirurgia. Dentro de semanas após o procedimento cirúrgico, a escala média torna-se dilatada, como indicado aqui, e a membrana de Reissner fica distendida. Os animais também apresentam perda auditiva flutuante progressiva na orelha operada.
Assim como em muitas doenças do ouvido, a indução cirúrgica de hidropisia no porquinho-da-índia tornou-se o modelo animal padrão-ouro para a doença de Menière humana desde que foi descrita pela primeira vez em 1965 por Robert Kor e Harold Schneck. Embora o procedimento tenha sido inicialmente realizado usando uma abordagem intradural mais invasiva, nosso centro prefere uma abordagem extradural porque resulta em menor morbidade e mortalidade para o animal. A seguir, descrevem-se os materiais, os cuidados com o animal e a abordagem cirúrgica necessários para a realização bem-sucedida e humanitária deste procedimento bastante complexo.
Primeiro, descreverei os materiais cirúrgicos necessários. O animal é uma porquinho-da-índia adulta fêmea, raça Duncan Hartley, albina, da Charles River International Laboratories Incorporated. Para a preparação do ambiente e a montagem asséptica, serão necessários trajes cirúrgicos estéreis, microscópio operatório com capa estéril e Mars, campo cirúrgico com janela pequena, almofada térmica intraoperatória e aparelho de aspiração.
Um número cinco, sucção, um número 40 de sucção com solução salina estéril, um recipiente de aço inoxidável e um suporte de cabeça. Para anestesia, você precisará de quetamina 60 miligramas por quilograma e xilazina 12 miligramas por quilograma pré-operatóriamente. Você precisará de um lubrificante à base de petróleo, uma máquina de barbear elétrica, Betadine e álcool etílico 70% intraoperatóriamente, você precisará de 0,6 mililitros de 0,25% de marcain, uma lâmina de bisturi descartável número 11, três hemostatos curvos, um elevador periostal de Lieber, pontas cirúrgicas Wexel, uma broca otológica, uma broca diamantada de 1,5 milímetro e uma broca diamantada de 0,5 milímetro.
Uma cureta reta para osso, uma seringa de 10 cc, cera para osso, espuma gelatinosa, fio reabsorvível quatro zero com agulha cortante P-13, pinça adin, porta-agulhas com mandíbula diamantada e tesoura para sutura. Para os cuidados pós-operatórios, você precisará de uma gaiola limpa com almofada aquecida. Dois décimos de ml de enrofloxacina a 22,7 miligramas por mililitro.
0,05 mililitros de buprenorfina 0,3 miligramas por mililitro. Primeiro, anestesie o porquinho-da-índia com cetamina 60 miligramas por quilograma e xilazina 12 miligramas por quilograma por via intramuscular. Este regime permite de 60 a 90 minutos de anestesia sem depressão respiratória, o que geralmente é tempo suficiente para a realização deste procedimento.
Após anestesiar o animal, um lubrificante à base de petróleo é aplicado nos olhos. Em seguida, a região posterior da cabeça é raspada com tesoura elétrica, da região torácica superior até o topo da cabeça. Então, o local é preparado com Betadine, seguido por álcool.
Agora o animal está pronto para a cirurgia. Meu nome é Dr. Cliff McGillion. Sou professor de Otorrinolaringologia e Cirurgia de Cabeça e Pescoço aqui nos Hospitais da Case Western Reserve University em Cleveland e diretor de Otologia e Neurotologia.
O que eu quero discutir com vocês hoje é a técnica cirúrgica para induzir hidros linfáticas endolinfáticas no porquinho-da-índia. Acessamos a região extrabucalmente e expomos o seio sigmoide e, logo anterior e lateral ao seio sigmoide, localizamos o óstio do sistema endolinfático. Removemos o material do ducto e o material da bolsa, e na verdade alargamos o ducto com broca, sob visualização direta.
A parte mais importante, na minha opinião, do procedimento é a esqueletização do seio sigmoide e, em seguida, a região medial a ele, com a visualização direta do O do curso do ducto endolinfático. Uma vez que o local cirúrgico é preparado, o animal é transferido para o centro cirúrgico e posicionado em um suporte para a cabeça. O pescoço é flexionado para proporcionar exposição adequada da crista occipital e é coberto de maneira estéril para garantir a saúde e a segurança do animal.
Observe a mesma técnica asséptica que seria necessária em um paciente humano para manter uma temperatura corporal adequada durante o procedimento; certifique-se de colocar um tapete aquecedor sob a superfície operatória antes da primeira incisão. Injeta-se marcação ao redor do local cirúrgico. O procedimento cirúrgico é iniciado com uma incisão mediana na pele do couro cabeludo ao longo da região occipital para obter exposição adequada; retrai-se a pele colocando uma pinça hemostática em cada lado da incisão. A eletrocauterização não será necessária, pois o porquinho-da-índia possui um mecanismo hemostático robusto.
Em seguida, faz-se uma incisão horizontal ao longo do músculo do pescoço. Para expor o occipital ósseo, uma incisão bem posicionada pode expor imediatamente a linha da sutura occipital temporal, conforme mostrado aqui. A secção do nervo occipital maior, que geralmente está subjacente ao músculo, pode fazer o animal estremecer.
Apesar da anestesia adequada ao cortar através do músculo, é importante sentir o osso sob a lâmina. Caso contrário, o corte pode ser muito baixo, o que poderia correr o risco de secção da medula espinhal ao atravessar o músculo do pescoço. Um terceiro hemostato é utilizado para segurar a porção superior da incisão e é mantido no lugar pelo auxiliar cirúrgico.
A dissecação romba é utilizada para expor o osso occipital. Lembre-se de permanecer sempre no lado direito da crista occipital externa e de que a orelha esquerda serve como controle. Neste modelo, um elevador periostal tipo lumper é então usado para expor ainda mais o crânio e revelar a crista occipital externa e a linha da sutura occipital temporal. A perfuração com uma broca de diamante de 1,5 milímetro começa logo abaixo da linha da sutura.
O objetivo é expor a fossa auricular posterior e o seio sigmoide. Toda perfuração deve permanecer na linha de junção temporoccipital ou inferior a ela em todos os momentos. Mantenha um tubo de sucção número cinco para aspirar o sangue.
Também peça a um assistente manter o campo irrigado com soro fisiológico estéril, gotejando continuamente de uma seringa de 10 cc. A perfuração causará algum sangramento da medula, mas a broca de diamante pode ser usada para estancar os vasos sangrantes a uma profundidade de aproximadamente um milímetro.
Uma linha azul pálida ficará visível. Este é o seio sigmoide. Fique apenas aqui.
Sua un lateral ao seio sigmoide. Pode-se encontrar a porção do ducto endolinfático. É importante definir as bordas do seio sigmoide sem penetrá-lo.
Uma vez que o osso subjacente tenha ficado suficientemente fino, a perfuração é interrompida e a sucção é alterada para um número 40. Também se utiliza uma ampliação maior. Um pique reto é usado para remover suavemente o osso subjacente.
O seio sigmoide é suavemente retratado medialmente, revelando o opérculo, que pode não ser claramente visível, pois frequentemente estará obscurecido por sangue. Agora, o seio sigmoide esqueletizado é suavemente retratado medialmente, revelando o opérculo. O sulco é então alargado com uma broca menor de corte de 0,5, obliterando o saco endolinfático e, finalmente, levando ao ducto endolinfático.
O ducto é visível como uma oval escura na brancura do osso circundante. Cerca de um milímetro do ducto é perfurado antes de ser preenchido com cera óssea. A cera óssea é empurrada para dentro do ducto usando espuma de gel.
Essa oclusão do ducto linfático endolinfático induzirá hidrodrops endolinfático. O fio 4.0 poly shorb é usado para reunir o músculo. Em seguida, há uma transição contínua para uma técnica de sutura subcutânea para a incisão na pele. Com esse fechamento, não há necessidade de remover os pontos posteriormente, e não há risco de o animal arranhar o local ou puxar um ponto ou grampeamento para fora.
Após a cirurgia, o porquinho-da-índia é colocado em uma incubadora para manter a temperatura corporal, com verificações a cada 30 minutos até que esteja acordado. O animal é examinado quanto à frequência respiratória e cor do corpo. Este centro utiliza o antibiótico de amplo espectro inin e buprenorfina para complicações dolorosas.
Como em qualquer cirurgia, existem riscos para o animal. Agora abordarei algumas possíveis complicações intraoperatórias e como evitá-las. Depressão respiratória: o cirurgião deve estar sempre atento às respirações do animal, caso a respiração pare ou diminua.
Interrompa a cirurgia e inspecione visualmente a presença de movimento torácico. Se o animal estiver apneico, verifique se a boca e a via aérea não estão obstruídas. Em caso de penetração do seio sigmoide, utilize espuma gelatinosa e compressão juntamente com a ponta de sucção até que o sangramento cesse.
Cobertura da penetração dural com espuma de gel; para evitar danos ao vestíbulo, não perfure mais de um milímetro lateralmente ao seio sigmoide, pois caso contrário pode-se lesionar o canal semicircular posterior, o que invalidaria todos os dados para aquele porquinho-da-índia específico. O bloqueio cirúrgico do ducto endolinfático no porquinho-da-índia é uma cirurgia tecnicamente exigente, mas com as ferramentas adequadas, instruções corretas e conhecimento da anatomia relevante, pode ser realizado de maneira que seja ao mesmo tempo humanitária para o animal e útil como modelo para a doença de Ménière humana.
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Este vídeo demonstra a obstrução cirúrgica do ducto endolinfático do porquinho-da-índia, levando à formação de hidropisia endolinfática. Este modelo é significativo para o estudo de patologias auditivas relacionadas à doença de Meniere.
Este modelo cirúrgico fornece um método reprodutível para induzir hidropisia endolinfática em cobaias, permitindo estudos mecanicistas da desregulação do fluido da orelha interna relevante para a fisiopatologia da doença de Menière. A abordagem extradural reduz a morbidade cirúrgica mantendo a fidelidade do modelo, apoiando a validação pré-clínica de alvos terapêuticos e o desenvolvimento de ensaios para fármacos otológicos. Ele serve como um sistema relevante para a doença na avaliação dos efeitos de compostos sobre a homeostase endolinfática e a função auditiva.
O modelo integra-se ao continuum de descoberta, desde a validação do alvo até a identificação de compostos líder e os testes de eficácia pré-clínica, especialmente para distúrbios otológicos envolvendo desregulação do equilíbrio hídrico.